安乃近注射液細菌內毒素檢驗方法的建立

【摘 要】本實驗對安乃近注射液的細菌內毒素檢查方法進行研究，建立快速準確的細菌內毒素檢查法。按《中國藥典》2010版附錄XIE細菌內毒素檢查方法進行。利用不同廠末生產的鱟試荊進行干擾試驗，全面考察安乃近注射液對細茼內毒素控查的干擾作用，以確定最佳試驗條件。安乃近注射液可以采用稀釋方法排除干擾。本細茵內毒素檢查結果安全、可靠。

【關鍵詞】安乃近注射液；細菌內毒素；研究

安乃近化學名為[（1，5-二甲基-2-苯基-3-2，3-二氫-1H-吡唑-4-基）甲氨基]甲烷磺酸鈉鹽—水合物[1-5]。安乃近主要用于退熱，一般不作首選用藥，僅在急性高熱、病情急重，又無其他有效解熱藥可用的情況下用于緊急退熱，亦用于治療急性關節炎、頭痛、風濕性痛、牙痛及肌肉痛等[6-10]。安乃近可用于急性風濕性關節炎，但因本品有可能引起嚴重的不良反應，很少在風濕性疾病中應用。本實驗對安乃近注射液的細菌內毒素檢查方法進行研究，建立快速準確的細菌內毒素檢查法。

1.材料與方法

1.1材料

（1）DHG-9030B電熱恒溫水槽（上海秣馬恒溫設備廠），DHG-9240A電熱干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司）；JFC-001百級凈化工作臺（廣州嘉凡凈化科技有限公司）。

（2）試劑。鱟試劑（廈門市鱟試劑實驗廠有限公司）；鱟試劑2（科德角國際生物醫學科技（北京）有限公司）鱟試劑3（廈門市鱟試劑實驗廠有限公司）；鱟試驗用水（杭州拓目科技有限公司）；細菌內毒素工作標準品（中國藥品生物制品檢定所）；pH調節劑（杭州拓目科技有限公司）。

1.2方法

（1）試驗準備所有容器、用具都必須經過處理，去除外源性內毒素，玻璃用具的滅菌處理為180℃2小時或250℃30分鐘以上，塑料用具須確證不干擾實驗結果。

（2）鱟試劑靈敏度復核按《中國藥典》2010版二部附錄ⅪE細菌內毒素檢查法規定，進行鱟試劑的標示靈敏度復核。杭州拓目科技有限公司、科德角國際生物醫學科技（北京）有限公司、深圳市三利化學品有限公司三個廠家的鱟試劑均符合規定。

（3）供試品細茵內毒素限值的確定。

公式：L=K/M，M為500mg/60kg，K為5EU/（kg·h）；計算限值L=0.6EU/mL，擬定限值為：每1mg中含細菌內毒素的量應<0.6EU。

1.3安乃近注射液細菌內毒素檢查干擾試驗

1.3.1干擾試驗

按照《中國藥典》2005年版二部附錄XIE中細菌內毒素檢查法規定，使用三個廠家生產的鱟試劑，對安乃近注射液進行了干擾試驗預試驗和正式干擾試驗。使用深圳市三利化學品有限公司的鱟試劑天津集團新鄭股份、上海現代哈森商丘公司、海南制藥廠公司二廠、上海信誼金朱藥業有限公司、浙江瑞新藥業股份有限公司、成都天臺山制藥有限公司、四川美大康華康藥業有限公司、云南傣藥有限公司、國藥集團新疆制藥有限公司、云南生物谷燈盞花藥業有限公司、云南白藥集團股份有限公司、浙江萬馬藥業有限公司的20mg/mL稀釋液對細菌內毒素檢查樣品無干擾作用，陜西永壽制藥有限責任公司、昆明市宇斯藥業有限責任公司、寧夏啟元國藥有限公司、黃山盛基藥業有限公司、甘肅莫高實業發展股份有限公司制藥廠、福建古田藥業有限公司、廣東南國藥業有限公司、安徽聯誼藥業股份有限公司、甘肅蘭藥藥業有限公司、貴州天地藥業有限責任公司、海南制藥廠有限公司、廣東邦民制藥廠有限公司、開封制藥（集團）有限公司、新鄉市常樂制藥有限責任公司20mg/mL稀釋液均有干擾。使用科德角國際生物醫學科技（北京）有限公司的鱟試劑陜西永壽制藥有限責任公司、昆明市宇斯藥業有限責任公司、寧夏啟元國藥有限公司、黃山盛基藥業有限公司、甘肅莫高實業發展股份有限公司制藥廠、福建古田藥業有限公司、廣東南國藥業有限公司、天津集團新鄭股份、上海現代哈森商丘公司、成都天臺山制藥有限公司、四川美大康華康藥業有限公司、云南傣藥有限公司、國藥集團新疆制藥有限公司、云南生物谷燈盞花藥業有限公司、云南白藥集團股份有限公司、浙江萬馬藥業有限公司的20mg/mL稀釋液對細菌內毒素檢查樣品無干擾作用，海南制藥廠公司二廠、上海信誼金朱藥業有限公司、浙江瑞新藥業股份有限公司、安徽聯誼藥業股份有限公司、甘肅蘭藥藥業有限公司、貴州天地藥業有限責任公司、海南制藥廠有限公司、廣東邦民制藥廠有限公司、開封制藥（集團）有限公司、新鄉市常樂制藥有限責任公司20mg/mL稀釋液均有干擾。使用深圳市三利化學品有限公司的鱟試劑陜西永壽制藥有限責任公司、昆明市宇斯藥業有限責任公司、廣東南國藥業有限公司、天津集團新鄭股份、上海現代哈森商丘公司、成都天臺山制藥有限公司、四川美大康華康藥業有限公司、云南傣藥有限公司、國藥集團新疆制藥有限公司、云南生物谷燈盞花藥業有限公司、云南白藥集團股份有限公司、浙江萬馬藥業有限公司的20mg/mL稀釋液對細菌內毒素檢查樣品無干擾作用，海南制藥廠公司二廠、上海信誼金朱藥業有限公司、浙江瑞新藥業股份有限公司、安徽聯誼藥業股份有限公司、甘肅蘭藥藥業有限公司、貴州天地藥業有限責任公司、海南制藥廠有限公司、寧夏啟元國藥有限公司、黃山盛基藥業有限公司、甘肅莫高實業發展股份有限公司制藥廠、福建古田藥業有限公司、廣東邦民制藥廠有限公司、開封制藥（集團）有限公司、新鄉市常樂制藥有限責任公司20mg/mL稀釋液均有干擾。確認稀釋至10mg/mL的安乃近注射液，對使用3個廠家的鱟試劑進行細菌內毒素檢查均無干擾作用。

1.3.2細菌內毒素檢查

按《中國藥典》2005年版二部附錄XIE中檢查法和擬定限值，對所有樣品進行細菌內毒素檢查，結果各廠家的樣品均符合規定。

2.結果

通過干擾試驗，確定本品在稀釋至10mg/mL時對細菌內毒素檢查無干擾。 [科]

【參考文獻】

[1]殷麗娟，杜德清，尹進華，陳學璽.安乃近結晶過程的研究[J].精細石油化工進展，2011（03）.

[2]李銳.紅外分光光度法鑒別安乃近片[J].中國藥師，2006（12）.

[3]閆韶華，王衛鋼.高效液相色譜法測定安乃近注射液的含量[J].中國藥業，2008（22）.

[4]張春強，馬江華，張兆宏.口服安乃近后特殊環境下死亡1例[J].法醫學雜志，2007（06）.

[5]史學慧，宋英姬.安乃近片含量測定方法的比較[J].中國醫藥工業雜志，1994（06）.

[6]錢琳，肖雙.安乃近片含量測定方法的探討[J].中國藥師，2005（06）.

[7]張紅，王早斌.高效液相色譜法測定安乃近片的含量[J].中國藥業，2008（15）.

[8]章曉軍，徐彬彬，陸萍.安乃近臨床不良反應的觀察與護理[J].現代實用醫學，2007（12）.

[9]辛俊衡，陳江濤，黃林杰.安乃近片含量測定方法的探討[J].首都醫藥，2005（05）.

[10]金立弟，韓宇.安乃近片劑及其注射液的紅外光譜鑒別[J].中國現代醫藥雜志，2007（01）.