HPLC法測定頭孢呋辛酯中高分子聚合物含量

【摘 要】固定相為：TSK·GELG2000SWXL色譜柱（7.8mm×300mm，5μm），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調節pH值7.0）-乙腈（95：5）流動相，檢測波長為280nm；頭孢呋辛酯濃度在0.3～1.5mg/mL范圍內內呈良好的線性關系。本法簡便、重現性好，可用于頭孢呋辛酯中高分子聚合物的含量測定。

【關鍵詞】頭孢呋辛酯；高分子聚合物；測定

頭孢呋辛酯為（6R，7R）-7-2-呋喃基（甲氧亞氨基）乙酰氨基-3-氨基甲酰氧甲基-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環4辛-2-烯-2-羧酸，1-乙酰氧基乙酯[1-4]。頭孢呋辛酯在體內水解后釋出頭孢呋辛而發揮其抗菌活性，對革蘭陰性菌如淋球菌、奇異變形桿菌、流感桿菌、卡他摩拉菌和大腸桿菌科等均有抑制作用[5-7]。頭孢呋辛酯適用于溶血性鏈球菌、流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等腸桿菌科細菌敏感菌株所致成人急性咽炎或扁桃體炎、急性中耳炎、急性支氣管炎、單純性尿路感染、皮膚軟組織感染及無并發癥淋病奈瑟菌性尿道炎和宮頸炎。本文用高效液相法對頭孢呋辛酯中的高分子聚合物的進行了含量測定。

1.儀器與試藥

DL-820E超聲波清洗機（上海高創化學科技有限公司）； ABS 220-4分析天平（德祥科技有限公司）；RE-5220旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；AT-830制冷、加熱兩用色譜柱溫箱（杭州瑞析科技有限公司）；XYJ-H帕恩特實驗室中央超純水系統（北京湘順源科技有限公司）；SHB-III型臺式循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）；LC3100高效液相色譜儀（安徽皖儀科技股份有限公司）；UV-1800紫外/可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）。

磷酸（湖北興銀河化工有限公司）、醋酸（湖北興銀河化工有限公司）、甲醇（徐州賽?；び邢薰荆⒈宜幔ê贾菝卓嘶x器有限公司）、乙腈（廣州振威化工科技有限公司）、磷酸氫二銨（張家港雅瑞化工有限公司）、醋酸銨（濟南樂奇化工有限公司）、鹽酸（廣州花之王化工有限公司）。

2.含量測定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[8-12]。色譜柱為TSK·GELG2000SWXL色譜柱（7.8mm×300mm，5μm）；0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（ 0.06mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調節pH 值7.0）-乙腈（ 95：5）為流動相；檢測波長為280nm；流速0.5mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數按頭孢呋辛酯峰計算應不得低于2000。

2.2供試品溶液的制備

取頭孢呋辛酯適量，研細，精密稱定至容量瓶內，加流動相適量超聲溶解，放涼，流動相定容，過0.45μm的濾膜，即得。

2.3對照品溶液的制備

精密稱取頭孢呋辛酯對照品適量，置5毫升棕色容量瓶中，用流動相超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4陰性干擾試驗

分別精密吸取頭孢呋辛酯對照品溶液、供試品樣品溶液、和高溫、光照、酸堿和氧化的強制降解樣品溶液各10μL注入液相色譜儀，按“2.1色譜條件”下方法進行分析，記錄色譜圖。結果在該色譜條件下所有強制的條件下降解產物與頭孢呋辛酯的峰相同保留時間處不存在吸收峰，說明此方法具有較強的專屬性。

2.5標準曲線的制備

精密稱定頭孢呋辛酯對照品15mg置10ml量瓶中加流動相定容.再分別量取1，2，3，4，5mL置5ml量瓶中，加入流動相稀釋至刻度，分別精密上述溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜，以對照品進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。試驗表明，頭孢呋辛酯對照品在0.3～1.5mg/mL范圍內內呈良好的線性關系。

2.6精密度試驗

精密吸取頭孢呋辛酯對照品溶液10μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.59%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.7重現性試驗

分別稱取同批頭孢呋辛酯樣品6份，分別制備成供試品，按色譜條件測定高分子聚合物含量，并計算樣品的RSD值為0.98%，結果表明，此含量測定方法的重現性良好。

2.8穩定性試驗

取供試品溶液和對照品溶液，分別在0，0.5，1，2，3，4h精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，對照品峰面積積分值的RSD為0.53%。結果表明對照品至少在4h內穩定。供試品溶液在常溫下2h后各個時間點其高分子聚合物雜質的含量都在明顯地增加，表明供試液在常溫下不穩定，須臨用前現配。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定頭孢呋辛酯三批樣品中高分子聚合物的含量，結果三批樣品的含量分別0.86%、0.85%、0.86%。

3.討論

藥物不良反應（adverse drug reactions，簡稱ADR）系指正常劑量的藥物用于預防、診斷、治療疾病或調節生理機能時出現的有害的和與用藥目的無關的反應。高分子聚合物是引發不良反應的主要成分之一[8-12]。分別考察醋酸鹽的緩沖溶液（pH3.5）-乙腈（90∶10），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調節pH 值7.0）-乙腈（85：15），0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調節pH 值7.0）-乙腈（95：5），0.2mol/L磷酸（用氨水調pH至6.0）-乙腈（95：5），磷酸鹽緩沖液（0.01mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調節pH 值7.0）-乙腈（90：10）不同比例的流動相，結果0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調節pH值7.0）-乙腈（ 95：5）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.06mol/L磷酸鹽緩沖液（0.06mol/L磷酸氫二銨溶液，用磷酸調節pH 值7.0）-乙腈（95：5）為流動相。本實驗方法是一種簡便、準確、安全的測定頭孢呋辛酯中高分子聚合物的含量。 [科]

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