地龍配方顆粒的質量標準分析

摘要：目的：分析地龍配方顆粒的質量標準，以保證地龍配方顆粒的臨床療效。方法：本次研究主要采用高效液相色譜法對地龍配方顆粒中的次黃嘌呤進行定量

測定；采用薄層色譜法對地龍配方顆粒進行定性研究；采用高效毛細管電泳法對地龍配方顆粒中的琥珀酸含量進行測定。結果：地龍配方顆粒中次黃嘌呤的含量與峰面積呈現的線性關系良好。薄層色譜法檢測中的地龍配方顆粒與對照品在相應的位置上，會呈現相同顏色的斑點。地龍配方顆粒中琥珀酸的濃度與峰面積的線性關系良好。結論：高效液相色譜法、薄層色譜法以及高效毛細管電泳法能夠有效地控制地龍配方顆粒的質量，值得大力推廣應用。

關鍵詞：地龍配方顆粒；質量標準；分析研究

【中圖分類號】R927.2【文獻標識碼】A【文章編號】1672-8602（2014）06-0240-02

地龍原名為白頸蚯蚓，最初記載于《本經》，書中將其列為下品[1]。其中，地龍蛋白主要提取于地龍，含有豐富的膠原酶、核酸以及微量元素等多種成分，被廣泛地運用于各種藥物中。地龍配方顆粒具有清熱、通絡以及利尿等功效，可用于腦梗塞、中風以及關節麻痹等病癥的治療。本文選取高效液相色譜法對地龍配方顆粒中的次黃嘌呤進行定量測定；采用薄層色譜法對地龍配方顆粒進行定性研究；采用高效毛細管電泳法對地龍配方顆粒中的琥珀酸含量進行測定。以期為更好地保證地龍配方顆粒的質量提供一定的指導意義。

1儀器與試藥

1.1儀器

對地龍配方顆粒中的次黃嘌呤進行定量測定主要采用高效液相色譜儀。日本島津LC-10ATVP溶劑輸入泵，HW-2000色譜工作站（南京千譜軟件有限公司制造），上海之信儀器有限公司制造的超聲波清洗器，AY-120電子天平，由廣州市富誠科技儀器有限公司制造的8W-離心機。

1.2試藥

地龍原藥材主要來自于江西樟樹和廣東惠州等地。地龍配方顆粒則來自于江陰天江藥業有限公司，批號分別為0412055、0407132。次黃嘌呤則來自于國藥集團化學試劑有限公司，批號為F20050219。甲醇、色譜純；水、超純水；硅膠G由青島海洋化工廠制造。

2方法與結果

2.1地龍配方顆粒中次黃嘌呤含量的測定

色譜柱為ODS-EP5um，4.6mm*150mm，填充柱為不銹鋼材質，來自于迪馬公司，編號為4DI81506。流動相為水、流速為1.0ml/min，波長為254nm[2]。同時，在此基礎上保證柱溫為室溫，地龍配方顆粒中的次黃嘌呤分類效果較為理想。其中，供試品溶液的制備抽取本品所研制成的細小粉末約0.073克，并對其進行精密地稱定。同時，試驗人員將其放置于30毫升的容量瓶中，加入適量的水將其溶解和稀釋。在稀釋的過程中，試驗人員將容量瓶輕輕地搖勻和過濾，然后取出過濾后的液體，作為試品的溶液標本。然后，試驗人員參照供試品溶液制備的方法，制備適量的陰性對照品溶液。首先，實驗人員用精密稱稱取次黃嘌呤對照品約20毫克，并放置于100毫升的容量瓶中，通過加入一定比例的水對其進行超聲處理和溶解，并進行搖勻，形成貯備液。其次，試驗人員抽取貯備液20毫升，將其放置于100毫升的容量瓶中，然后加入一定比例的水對其進行進一步地稀釋至刻度，分別稀釋成溶度為不同型號的對照品溶液。再次，試驗人員分別吸取不同濃度的對照品，并將其分別注入液相色譜儀器進行線性關系考察。其中，測定的回歸方程可以參照峰面積對對照品溶液濃度的回歸。最后，試驗人員提取濃度為8.0ug/ml-1的次黃嘌呤對照品溶液，并注入液相色譜儀器中進行連續地測定，記錄每次測定的面積。結果發現，次黃嘌呤峰面積的平均值為335.6，證明儀器的精密度良好。

2.2對地龍配方顆粒進行定性研究

本次試驗中主要選取地龍配方顆粒1.0克，并加入清水20毫升，對其進行加熱和放冷，將上清液進行提取，作為供試品的溶液。同時，試驗人員選取0.5克的空白顆粒作為陰性對照溶液。在試驗過程中，地龍飲片的薄層鑒定方法與空白顆粒的鑒定方法相同。試驗結果發現，在供試品色譜中，斑點的顏色與對照品色譜的相同。最后，試驗人員將已經制作好的溶液采用照薄層色譜法進行試驗。具體步驟為：先每一種溶液吸取5ul，依次滴于同一材質的硅膠G薄層板上，使用甲苯丙酮作為展開劑，依次展開、取出和晾干，在紫外燈下進行檢視，與對照藥材色譜的相應位置上也具有相同顏色的斑點。通過對地龍配方顆粒裝量情況進行檢查發現，批號為0412055裝量差異值為4.17%，規定量為10%；水分含量為3.00%，規定量為6%；結果合格；批號為0407132裝量差異值為4.16%，規定量為10%；水分含量為4.50%，規定量為6%；結果合格。

2.3琥珀酸毛細管電泳的測定

本次試驗中主要采用反向毛細血管電泳分離對地龍藥材中的琥珀酸含量進行測定。通常，在堿性條件下，琥珀酸陰離子的電離方向是由負極流向正極。為了使電滲流的方向與待分析成分琥珀酸陰離子的流動方向一致，試驗人員在試驗的過程中加入了電滲流抑制劑和改向劑。具體操作方法如下：首先稱取適量的琥珀酸對照品，加入一定比例的蒸餾水制作成儲備溶液。然后，試驗人員稱取適量的儲備溶液，分別配置成不同濃度的琥珀酸標準溶液。同時，試驗人員對每一種濃度的琥珀酸標準溶液的峰面積進行測定。其中，標準溶液的濃度為橫坐標，峰面積作為縱坐標形成一種線性回歸方程，得出A=5.589*104C+46.38[3]，R=0.998。結果發現，琥珀酸的濃度與峰面積的線性關系良好。按照樣品溶液的制作方法，試驗人員還對不同批號的地龍配方顆粒中的琥珀酸的含量進行了測定。

3討論

通過不斷的臨床研究表明，地龍能夠在治療濕疹、蕁麻疹以及糖尿病等過程中具有顯著的效果[4]。在本次試驗中分別使用水和不同濃度的乙醇對樣品進行溶解，測定次黃嘌呤的含量，其中水溶解樣品中的提取含量較高，乙醇溶解樣品中次黃嘌呤的含量與乙醇的濃度呈現負相關。由此可知，水溶液中次黃嘌呤的溶解度要大于乙醇溶液中次黃嘌呤的溶解度。

同時，在本次試驗中發現依照藥典中的方法出現了嚴重的脫尾現象，需要對該方法進行進一步地改進。例如，試驗人員在試驗過程中可以將已經準備好的薄層板放置于烘箱里進行烘干，從而可以明顯地改善脫尾問題。相對于傳統的使用薄層掃描法對地龍藥材中的琥珀酸含量進行測定，本文采用毛細管電泳法對地龍配方顆粒中的琥珀酸進行測定，具有快速、檢測成本低等優點，因而值得推廣應用。

參考文獻

[1]張紅梅，宋景政，譚紅勝，徐宏喜，李松林，陳士林.從湯劑到顆粒劑：中藥配方顆粒20年回顧與展望[J].世界科學技術（中醫藥現代化）.2012，08（20）：123-124.

[2]唐婉清，廖彩震，馮艷妮.劉法錦地龍藥材及地龍配方顆粒中鉛的含量測定[J].廣東藥學.2013，06（30）：111-112.

[3]楊豐云，付廷明，郭立瑋，劉峰，張偉.地龍濕法超微粉碎提取物在模擬胃腸環境中的降解研究[J].藥學學報.2012，01（12）：156-157.

[4]李勇文.地龍的研究進展[J].廣西醫學.2004，05（15）：113-114.