棘孢木霉菌天Q1對幾種植物病原菌拮抗作用研究

摘要：本研究采用對峙培養的方法，研究了棘孢木霉菌天Q1對稻瘟病菌、尖孢鐮刀菌、立枯絲核菌及核盤菌等9種植物病原菌生長的抑制作用。結果表明：棘孢木霉菌天Q1對不同病原菌都具有較好的抑制作用。對赤霉菌的抑制效率最高，為59.09%，其次是串珠菌，對核盤菌的抑制率較低；棘孢木霉菌天Q1產生的非揮發性物質和揮發性物質的抑菌實驗結果表明，其產生的非揮發性物質對9種病原菌都具有一定的抑制效果，但是揮發性物質沒有明顯的抑制作用。

關鍵詞：大棘孢木霉菌天Q1；對峙；拮抗活性

中圖分類號：S482 文獻標識碼： A 文章編號： 1674-0432（2014）-16-19-1

隨著生態農業可持續發展重要思想的提出，生物防治受到了人們越來越多的關注。在農作物病蟲害防治技術中生物防治是一門傳統應用科學，因具備對環境友好，人、畜、作物安全，應用價值高等諸多優點而受到世界各地政府和科學界關注。用來防治作物病害的真菌主要有木霉菌、鐮刀菌、青霉菌等，其中木霉菌是應用最多的一種。木霉菌屬于半知菌類絲孢綱叢梗孢目叢梗孢科，廣泛存在于土壤、植物殘體、植物根圍、植物葉片及種子、球莖表面及動物糞便上。通過對木霉菌對不同病原菌拮抗作用的測定，可為開發木霉生物防治產品提供科學依據，為農業的可持續發展奠定堅實基礎的同時也豐富了木霉菌種類資源，這是木霉研究中亟待完善的一項基礎工作。

1 材料與方法

1.1 材料

P天A培養基：馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂15～18克，水1000毫升。

CA 培養基：胡蘿卜200克，瓊脂18克，水1000毫升。

1.2 方法

1.2.1 對峙培養 從活化2天的病原菌菌落邊緣打取菌餅（直徑5毫米），將其置于P天A平板一側，28℃培養24小時后，將同樣大小的木霉菌餅置于病原菌的對側。每菌株重復8次，以只接種病原菌的平板作對照。對峙平板于28℃恒溫培養箱中培養3天，測量病原菌的菌落半徑，并計算抑制率。抑菌率=（對照菌落半徑-處理菌落半徑）/對照菌落半徑×100%。

1.2.2 非揮發性產物對病原菌的抑制作用 在直徑9厘米的P天A平板上平鋪滅過菌的圓形玻璃紙（直徑9.2厘米），將活化2天的木霉菌（直徑5毫米）置于平板玻璃紙中央，28℃恒溫培養。1天后去除玻璃紙，在平板中央接入病原菌菌餅（直徑5 毫米）。以只接種病原菌的處理為對照。恒溫培養3天，測量病原菌菌落半徑，并計算抑制率。

1.2.3 揮發性產物對病原菌的抑制作用 在活化2天的木霉菌菌落邊緣打取直徑5毫米的菌餅，接種于P天A平板中央，黑暗條件下28℃恒溫培養至菌落半徑約5厘米。此時，棄去平板上的菌餅，在平板上方蓋直徑為9厘米的單層無菌玻璃紙，然后對扣1個大小相等、且接種有直徑5毫米的病原菌菌餅的平板，病原菌菌餅與上方玻璃紙之間的空間供木霉菌揮發性物質與病原菌互作，封口膜密封后，將平板置于黑暗條件下28℃恒溫培養。以未接種供試木霉菌株的P天A平板和接種病原菌的平板對扣處理作為對照，每處理重復8次，3天后測量病原菌菌落半徑并計算抑制率。

2 結果與分析

2.1 對峙培養

對峙試驗結果表明，天Q1對不同病菌的拮抗效果有明顯差異（見圖1）。對赤霉菌的抑制效果最高，為59.09%；其次是串珠菌，為57.14%；對紋枯菌、早疫菌、灰霉菌和茄腐菌的抑制效果也較好，分別為55.17%，51.51%，53.85%，52.78%；對立枯菌和核盤菌的抑制效果較低，分別為42.86%和40%；對稻瘟菌的抑制率最低，為38.89%。

2.2 非揮發性產物對病原菌的抑制作用

由圖2可以看出，天Q1對立枯菌的抑制效果最好，對病原菌的抑制率為77.78%；對紋枯菌也表現出較好的抑制作用，抑制率為73.33%；對灰霉菌、茄腐菌和早疫菌的抑制效果一般，分別為35.56%、24.44%和21.12%；對核盤菌、串珠菌和赤霉菌的抑制效果較弱，分別為18.18%、13.33%和15.56%；對稻瘟菌的抑制效果最弱，為5.4%。

2.3 揮發性產物對病原菌的抑制作用

通過實驗測得結果顯示，天Q1的揮發性產物對立枯菌的抑制效果較明顯，為37.23%；對赤霉菌、灰霉菌、核盤菌和串珠菌的抑制效果一般，分別為5.73%、1.43%、6.22%和5.43%；對紋枯菌、早疫菌、稻瘟菌和茄腐菌的抑制效果不明顯，分別為0.02%、0.15%、0.01%和0.12%。

3 結語

本研究結果顯示，天Q1對9種病原菌都有抑制效果，對赤霉病菌的抑制效果最好；對紋枯病菌、串珠病菌和立枯病菌抑制效果較好；對茄腐病菌、灰霉病菌和早疫病菌也有較好的抑制效果。其中天Q1的非揮發性產物抑制作用較明顯，而揮發性產物沒有表現出明顯的抑制效果。由于木霉菌極高的生防應用價值，因此對局部地域的優勢木霉菌的篩選就顯得尤為重要，從而可以充分開發優勢種，生產木霉菌制劑，大面積推廣使用用于防治農作物的病害。這對減少化學農藥的使用，大力發展綠色農業，提高食品安全性等工作具有非凡的意義。

作者簡介：侯巨梅，碩士，黑龍江八一農墾大學，研究方向：應用微生物及生物防治。