松針提取物對廣西麻雞血液生化指標、抗氧化能力及免疫功能的影響

陸海英，葛洪偉，*，唐燕飛，韋宗海，吳芳輝

（1.廣西南寧市富鳳農牧有限公司，南寧 530001；2.泰州市河橫家禽育種有限公司，江蘇 姜堰 225538）

在畜禽生產過程中，由于各類抗生素和化學合成類藥物的不規范使用造成了許多問題，如細菌性疾病的耐藥性不斷加大，治療成本不斷加大，殘留在畜禽產品的藥物危害人體健康，并對周邊環境造成一定的污染。因此，尋求高效、環保、安全的抗生素可替代物是目前畜牧業工作者研究的熱點和當務之急[1-2]。松針含有多種成分，包括揮發油類、粗蛋白質、氨基酸、色素、多元酚類、脂肪酸等，具有抗氧化、抗疲勞、抗衰老、抑菌等多種作用，能提高動物的生產性能[3-5]。基于松針上述作用，設計飼用松針提取物對廣西麻雞產蛋性能的試驗，探討其對廣西麻雞產蛋性能的影響，以期為廣西麻雞的健康養殖提供依據。

1 材料與方法

1.1 松針提取物制備

將松針切碎后與一定量的95%乙醇溶液混合，常溫下浸提3 h，抽濾（重復3次），合并濾液，減壓蒸餾，揮去乙醇，并在真空旋轉儀上濃縮（水浴恒溫60℃，水真空），制成相對密度1.18～1.25的清膏，再與二氧化硅以1:3進行混合（質量比），干燥（經測定水分含量＜8.0%），密封備用。

1.2 試驗動物及飼糧

試驗雞為1日齡廣西麻雞1 600只，隨機分為2組，每組2個重復，每個重復400只，試驗期120 d。對照組飼喂基礎飼糧；試驗組飼喂基礎飼糧+松針提取物300mg·kg-1，飼糧組成及營養水平見表1。

表1 飼糧組成及營養水平

1.3 試驗地點和時間

試驗期為2014年2月19日～6月16日，全期為120 d。試驗地點為廣西南寧市富鳳農牧有限公司叮當育種中心。

1.4 飼養管理

所有試驗雞全程人工投料，自由采食和飲水；常規免疫接種；專人負責管理，每天專人收集試驗雞的采食量、雞群的糞便、呼吸道情況、精神狀態等相關數據和資料。

1.5 測定方法

1.5.1 血液抗氧化指標測定

血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過超氧化物歧化酶（SOD）的活性，總抗氧化能力（TAOC）和丙二醛（MDA）含量均用PowerWave XS型全波長酶標儀比色法測定，按試劑盒所提供的方法進行測定。

1.5.2 血液免疫指標測定

免疫球蛋白A（IgA）、血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、補體C3和補體C4的含量測定使用RX DAYTONA全自動生化分析儀測定，按照廠家提供的試劑配制和操作步驟按說明書進行。

1.5.3 血清生化指標的測定

在試驗結束時，各重復組隨機抽取試驗蛋雞30只，翅靜脈采集血樣，使用離心機分離血清（3 000 rpm·min-1，10min），分裝入凍存管中于-20℃保存，測定各項血液指標前于4℃冰箱中自然化凍。鈣、磷和膽固醇含量的測定均用廠家提供的試劑盒配置和操作步驟按說明書進行。

1.6 統計分析

試驗結果采用SPSS 10.0軟件OneWay ANOVA進行統計，并進行Duncan's多重比較，結果以“平均值±標準誤”表示。

2 試驗結果

2.1 對抗氧化能力的影響

對抗氧化能力的影響見表2。

表2 對抗氧化能力的影響

由表2可知，與對照組相比，血清中GSH-Px、SOD和T-AOC分別比對照組顯著提高57.01μmol·L-1、28.78U·mL-1和3.98U·mL-1（P＜0.05）；MDA含量顯著下降7.73（P＜0.05），說明松針提取物能夠顯著提高雞群的抗氧化能力。

2.2 對免疫功能的影響

對免疫功能的影響見表3。

由表3可知，與對照組相比，試驗組免疫球蛋白A（IgA）活性提高0.082 g·L-1（P＜0.05）、免疫球蛋白G（IgG）的活性提高0.114 g·L-1（P＜0.05）、免疫球蛋白M（IgM）提高0.082 g·L-1（P＜0.05）、補體C3提高0.35 g·L-1（P＜0.05）、補體C4的活性則提高0.044 g·L-1（P＜0.05）。說明本試驗方案能顯著提高廣西麻雞免疫功能。

表3 對免疫功能的影響g·L-1

2.3 對血清生化指標的影響

對血清生化指標的影響見表4。

表4 對血清生化指標的影響mmol·L-1

由表4可知，與對照組相比，試驗組雞群的血清中鈣、磷含量分別提高0.81和1.17mmol·L-1（P＜0.05）；膽固醇含量則比對照組下降0.64mmol·L-1（P＜0.05），說明本試驗方案能顯著提高廣西麻雞的血清生化指標。

3 討 論

3.1 對廣西麻雞血清抗氧化能力的影響

松針含有豐富的黃酮類化合物，Kwak等通過研究表明，松針黃酮有清除氧自由基的作用[6]。李慶明等對4種松針春季老葉和嫩葉水提物的還原力和抗氧化能力進行了測定，原料經研磨、用蒸餾水浸提和離心得到水提液，還原力的測定以BHT為對照，抗氧化能力的測定采用DPPH#、羥自由基（OH#）、超氧根陰離子自由基（O-2#）3種方法，經直線回歸分析和計算IC50值，結果表明4種松針老葉都有較高的還原力和抗氧化能力，且對上述幾種自由基清除率存在顯著的劑量效應關系，說明松針在抗氧化方面有巨大的開發潛力[7]。本試驗結果表明，松針能顯著提高廣西麻雞血清中的GSH-Px、SOD含量，提高T-AOD能力，顯著降低MDA含量，本試驗結果與上述學者結果一致。

3.2 對廣西麻雞免疫功能的影響

陳長武等通過利用白鼠為試驗動物，觀察白鼠的存活時間，連續游泳時間，并做免疫器官重量試驗表明，松針能夠提高小鼠SOD活性，降低老年鼠血清過氧化脂質（LPO）含量，這表明松針具有抗衰老作用，進而提升白鼠免疫功能[8]。曾明等以小鼠為試驗動物研究松針對小鼠抗疲勞的影響，結果表明，松針能夠試驗小鼠的SOD和乳酸脫氫酶（LDH）的活性、血紅蛋白（Hb）的含量顯著升高，這表明松針有顯著的抗疲勞作用，提高免疫功能的作用與本試驗結論一致[9]。梁衛花研究表明，添加松針提取物飼料添加劑能增加免疫器官指數，促進巨噬細胞的吞噬功能，提高淋巴細胞（增殖）轉化率，對肉雞的體液免疫和細胞免疫有明顯促進作用[10]。

3.3 對廣西麻雞血清生化指標的影響

鄭曉珂等研究表明，大鼠去卵巢15周后血清總膽固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）均升高，松針提取物有降低TC、TG、LDL-C的作用，但對高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）無影響[11]。王春梅等研究表明，松針提取物200、400、800mg·kg-1對正常小鼠的血糖水平無明顯影響，但均可降低由腎上腺素和四氧嘧啶引起的高血糖小鼠的血糖，且呈現良好的劑量依賴性[12]。說明松針具有抗應激、降低膽固醇、降血糖和抑菌等作用。鈣、磷是影響蛋品質的重要因子，應激會干擾蛋雞體內的鈣磷代謝，造成血清中鈣、磷含量下降，從而影響蛋雞產蛋性能和蛋品質。膽固醇是類固醇激素合成的前體，應激能夠刺激腎上腺素加強，從而增強對膽固醇需求。本試驗結果表明，松針提取物能顯著提高血清中鈣磷含量，從而提高雞蛋品質，降低膽固醇水平，因此可知本方案可顯著改善上述血清生化指標。

4 結論

松針提取物作為飼料添加劑，能明顯提高廣西麻雞血清生化指標，抗氧化能力和免疫能力。除松針外，糖萜素、微生態制劑在畜禽養殖應用中也有不俗表現，這些研究成果也為畜禽的健康養殖提供了思路[12-14]。

[1]葛洪偉，顧文松，陳文峰，等.中藥復方制劑對綠殼蛋雞生產性能的影響[J].中國家禽，2009，31（4）:24-26.

[2]顧文松，葛洪偉，陳文峰，等.中藥復方提取物對新城疫病毒感染細胞能力的影響[J].中國家禽，2009.31（12）:64-65.

[3]張霞，孫愛東.松針提取物的研究進展[J].中國食物與營養，2009（9）:23-25.

[4]劉曉庚，陳梅梅.我國松針的開發利用研究進展[J].糧食與食品工業，2003，（3）:25-29.

[5]吳艷梅，顧文松，顧娟.豬用促生長類中草藥飼料添加劑集錦[J].北方牧業，2011（5）:27.

[6]Kwak C S，Moon SC，Lee M S，et al.Antioxidant antimutagenic，and antitumor effects of pine needies（Pinus densiflora）[J].Nutrition and Canner.2006，56（2）:162-171.

[7]李慶明，莫開菊.幾種松針水提液抗氧化活性的比較研究[J].湘南民族學報.2008，26（2）:212-216.

[8]陳長武，昌友權，曲紅光，等.松針提取液抗衰老抗氧化作用研究[J].食品科學，2005，26（9）:465-467.

[9]曾明，李守漢.松針提取物抗疲勞作用研究[J].中國體育科技，2005，41（2）:117-119.

[10]梁衛花.松針提取物（前花青素）對肉仔雞增重和免疫作用的試驗研究[D].福州:福建農林大學，2009.

[11]鄭曉珂，王小蘭，馮衛生.松針提取物降血脂作用研究[J].中國藥理與臨床，2008，24（3）:81-82.

[12]王春梅，王海莉，李賀，等.松針提取物降糖作用的實驗研究[J].北華大學學報，2007，8（2）:121-123.

[13]葛洪偉，韋宗海，唐燕飛，等.糖萜素對廣西麻雞產蛋性能的影響[J].飼料廣角，2012（13）:28-29.

[14]葛洪偉，唐燕飛，韋宗海，等.糖萜素對廣西麻雞蛋品質的影響[J].廣西畜牧獸醫，2013（1）:3-5.

[15]梁永紅，葛洪偉，韋宗海，等.中草藥復方制劑、糖萜素、微生態制劑聯合應用對廣西麻雞生產性能的影響[J].飼料博覽，2013（5）:33-36.