心肌梗死患者血清HMGB1和H-FABP水平動態變化的研究

趙志強

(吉林市人民醫院，吉林 吉林 132001）

心肌梗死患者血清HMGB1和H-FABP水平動態變化的研究

趙志強

(吉林市人民醫院，吉林 吉林 132001）

目的 觀察心肌梗死患者血清HMGB1和H-FABP表達水平的動態變化，探討HMGB1和H-FABP在心肌梗死發病機制中的臨床意義。方法 患者分兩組：心肌梗死實驗組和對照組，實驗組和對照組分別于發病1 h、6 h、24 h和3 d取空腹靜脈血，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清HMGB1和H-FABP表達水平。結果 心肌梗死實驗組6 h、24 h和3 d時血清HMGB1表達水平顯著高于正常對照組，具有統計學差異(P＜0.05)；而心肌梗死實驗組1 h血清HMGB1表達水平和對照組比較無變化；心肌梗死實驗組中，患者在發病1 h、6 h、24 h時間段血清H-FABP表達水平持續升高，具有統計學差異(P＜0.05)，而患者在發病3 d時間段血清H-FABP表達水平和對照組比較無變化。結論 HMGB1作為重要的炎性因子是心肌梗死晚期炎性反應指標；而H-FABP是心肌梗死早期反應指標；二者在發病6 h、24 h兩個時間段H-FABP表達升高存在正相關。

心肌梗死；HMGB1；H-FABP

心肌梗死是一個極其復雜的病理生理過程，臨床危害性大，嚴重者危及患者的生命安全，是臨床的常見急危重癥，若發病后能迅速得到確診及有效治療，則可以減少病死率及改善預后。心肌型脂肪酸結合蛋白(H-FABP)作為最新研究和發現的細胞因子，受到了國內外學者的廣泛關注。有實驗表明H-FABP在人體血液中表達時間早，且特異性高，而高遷移率族蛋白1（HMGB1）是近年來研究發現的一種新的炎性細胞因子，發揮多種生物學功能。但二者在心肌梗死患者血清中的表達變化，目前尚不清楚。因此，本研究通過觀察心肌梗死患者血清HMGB1和H-FABP表達水平的動態變化，探討HMGB1和H-FABP在心肌梗死發病機制中的臨床意義及時間相關性，為臨床治療心肌梗死和判斷預后提供一定的理論依據。

1 資料與方法

1.1 病例資料

收取我院2008年7月至2011年1月臨床診斷為急性心肌梗死患者共150例，男82例，女68例，年齡50～75歲；對照組：150例，年齡50～75歲，均來自我院老年人健康體檢的正常成人，與患者組性別和年齡配對。實驗組和對照組的性別、年齡、比較差異無顯著意義，具有可比性。

1.2 納入與排除標準

本組所選病例為我院住院病例，符合中華心血管科學會急性心肌梗死病診斷要點。入選患者排除伴有近期急性感染、及患有肝、腎或心功能衰竭、腫瘤、風濕、結核等疾病。

1.3 血液標本

實驗組和對照組均于心肌梗死患者發病后1 h、6 h、24 h和3 d空腹采集靜脈血5 mL放入無菌離心管內，成批測定。

1.4 測定方法

采用膠體金免疫層析法方法檢測HMGB1和H-FABP表達水平；試劑盒由sigma公司提供。

1.5 統計學處理

2 結 果

血清HMGB1和H-FABP表達水平：心肌梗死實驗組6 h、24 h和3 d時血清HMGB1表達水平顯著高于正常對照組，具有統計學差異(P＜0.05)；而心肌梗死實驗組1 h血清HMGB1表達水平和對照組比較無變化；心肌梗死實驗組中，患者在發病1 h、6 h、24 h時間段血清H-FABP表達水平持續升高，具有統計學差異(P＜0.05)，而患者在發病3 d時間段血清H-FABP表達水平和對照組比較無變化；數據見表1和表2。

表1 血清HMGB1表達水平[pg/mL，（）]

表1 血清HMGB1表達水平[pg/mL，（）]

組別 病例數 發病時間1 h 6 h 24 h 3 d實驗組 150 10.87±2.38 36.89±4.27 48.66±4.32 67.19±1.92對照組 150 5.31±1.83 4.33±1.42 4.55±1.79 5.88±1.12

表2 血清H-FABP表達水平[pg/mL，（）]

表2 血清H-FABP表達水平[pg/mL，（）]

組別病例數 發病時間1 h 6 h 24 h 3 d實驗組 150 34.23±6.78 42.67±3.54 52.11±4.67 14.35±1.79對照組 150 7.32±2.44 7.39±1.29 8.66±2.45 8.17±1.22

3 討 論

心肌梗死是指心肌的缺血性壞死，為在冠狀動脈病變的基礎上，冠狀動脈的血流急劇減少或中斷，血液循環障礙最終導致心肌的缺血性壞死，是一個多病因、多發病機制過程，大量研究表明炎癥，組織和細胞凋亡，氧化應激等多種生物反應參與了心肌梗死的病理生理過程，心肌梗死發生一段時間后一些炎性介質和細胞因子的釋放，可導致心肌組織損傷的發生。

H-FABP是一種心肌特異性胞質蛋白，其分子量小，具有心肌特異性，直接參與細胞脂肪的攝取、轉運、代謝。H-FABP對早期心肌梗死診斷有較高的敏感性和特異性，可作為診斷早期心肌梗死的生化指標，該分子可以在心肌梗死發病后迅速釋放并立即進入血液循環。目前H-FABP的臨床應用非常廣闊，H-FABP比其他心肌標志物更適合用于再梗死的診斷，是目前學者研究較多的判斷心肌梗死的敏感性非常高的生化指標[1]。H-FABP在細胞內與長鏈脂肪酸結合，將其轉運至線粒體，并最終生成三磷酸腺苷，50%～80%的心臟能量都是由脂質氧化提供的，H-FABP在心肌代謝中特別重要，為心肌細胞提供能量。因此，H-FABP對于維持心肌細胞的穩態非常重要[2]。研究發現，當心肌細胞受損時，H-FABP在心肌梗死的早期診斷中明顯優于cTnT等其他指標[3]。

HMGB1是存在于真核細胞核內的非組蛋白染色體結合蛋白，非組核蛋白含量豐富，普遍存在于哺乳動物組織細胞中，在胞內參與脫氧核糖核酸的復制、轉錄、翻譯和修復，在膿毒血癥、急性胰腺炎等疾病中HMGB1作為重要的晚期炎性介質起著非常重要的作用，是內毒素致死效應的晚期重要炎性介質[4-6]。研究顯示，HMGB1在動脈粥樣硬化斑塊病理切片中表達指標高，在動脈粥樣硬化的早期炎性反應中就起到了重要作用。Oozawa[7]發現缺血的心肌再灌注損傷1 h后血清HMGB1比缺血前表達水平明顯增高。HMGB1在體外可直接刺激巨噬細胞，其合成TNF量增加，且TNF mRNA表達量也增加。受HMGB1刺激的單核細胞釋放TNF，腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素(IFN)等炎性因子，這些炎性因子反過來也可刺激HMGB1生成，維持并放大炎性反應。研究發現[8]，HMGB1蛋白水平在離體實驗中心肌體外缺氧30 min和在體心肌缺血性損傷中均有高表達，純化的HMGB1蛋白又反作用加重了心肌缺血再灌注損傷。那么HMGB1在急性心肌梗死發病機制中發揮什么作用呢？這正是我們想要探討的問題所在，目前國內外尚無此方面的研究。

我們采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測了實驗組和對照組心肌梗死患者發病1、6、24 h和3 d的血清HMGB1和H-FABP表達水平，實驗結果發現，心肌梗死實驗組6 h、24 h和3 d時血清HMGB1表達水平顯著高于正常對照組，具有統計學差異(P＜0.05)；而心肌梗死實驗組1 h血清HMGB1表達水平和對照組比較無變化；心肌梗死實驗組中，患者在發病1、6、24 h時間段血清H-FABP表達水平持續升高，具有統計學差異(P＜0.05)，而患者在發病3 d時間段血清H-FABP表達水平和對照組比較無變化；這說明HMGB1和H-FABP作為重要的炎性因子都參與了心肌梗死的炎癥發生過程，是一組與心肌梗死疾病發生進展相關的重要標志物。實驗結果心肌梗死患者在發病6、24兩個時間段血清HMGB1表達水平持續性升高與患者在發病6、24兩個時間段H-FABP表達升高存在正相關，這說明損傷后的早期心肌組織細胞缺氧，HFABP在細胞內與長鏈脂肪酸結合，將其轉運至線粒體，參與B氧化，并最終生成三磷酸腺苷，為心肌細胞提供能量，導致H-FABP水平急劇升高，進而局部炎癥激化，所以HMGB1作為炎性介質，在發病6、24兩個時間段也表達升高，而在發病3 d時間段HMGB1作為炎癥晚期調節因子持續性升高，而H-FABP表達水平開始下降，這說明HMGB1由壞死、損傷的細胞釋放到胞外，對周圍的炎性反應進行調控，維持并放大晚期炎性反應，而H-FABP并沒有參與晚期炎性反應發生。這些結果提示HMGB1和以H-FABP在腦心肌梗死炎性反應中表達具有時間相關性。

因此，我們可以得出結論HMGB1作為重要的炎性因子是心肌梗死晚期炎性反應指標；而H-FABP是心肌梗死早期反應指標；二者在發病6 h、24 h兩個時間段H-FABP表達升高存在正相關。臨床動態觀察和檢測心肌梗死患者血清的HMGB1和H-FABP表達水平可能對觀察病情變化及臨床治療具有重要的意義。

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R542.2+2

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1671-8194（2014）20-0131-02