前列腺癌組織中TRAIL受體的表達及意義

謝禮仁，潘衛兵，曾 燦，朱 斌，周建華

(1.深圳市坪山新區人民醫院泌尿外科，廣東 深圳 518118；

2.深圳市龍崗區人民醫院泌尿外科，廣東 深圳 518172)

前列腺癌組織中TRAIL受體的表達及意義

謝禮仁1，潘衛兵1，曾 燦1，朱 斌1，周建華2

(1.深圳市坪山新區人民醫院泌尿外科，廣東 深圳 518118；

2.深圳市龍崗區人民醫院泌尿外科，廣東 深圳 518172)

目的 探討前列腺癌組織中TRAIL受體的表達及意義。方法采用免疫組織化學方法檢測45例前列腺癌組織及15例良性前列腺增生組織中DR4、DR5及DcR1受體的表達水平。結果高分化、中分化、低分化前列腺癌組織與前列腺增生組織比較DR4、DR5受體的表達水平差異均無統計學意義(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中DcR1的表達水平均明顯低于前列腺增生組織，其差異均有統計學意義(P＜0.05)，且DcR1的表達水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中依次降低，差異有統計學意義(P＜0.05)。結論TRAIL受體DcR1在前列腺癌的發生發展中可能發揮重要作用。

前列腺癌；細胞凋亡；免疫組織化學；腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體；受體

前列腺癌是最常見的男性惡性腫瘤之一，在我國的發病率雖然較西方低，但是隨著生活水平和診斷技術的不斷提高，其發病率也在不斷上升[1]。傳統的治療方法包括手術、激素治療、放化療等，對于早期患者效果尚可，但是對于中晚期患者療效不佳，且存在治療后復發、轉移[2]。基于這一現狀，前列腺癌治療亟待改進，需要更精確的靶向和對惡性細胞更為有效的殺滅。近年來，腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)被發現具有誘導腫瘤細胞凋亡的作用，且前列腺是TRAIL及其受體(TRAILR)高表達組織之一，因此TRAIL成為前列腺癌的基因治療的新方向[3]。本研究采用免疫組織化學方法檢測了45例不同分化程度前列腺癌組織中TRAIL死亡受體DR4、DR5及誘騙受體DcR1的表達水平，并與15例良性前列腺增生組織進行對照，以探討前列腺癌組織TRAIL受體表達及與病理分級的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 經病理證實的45例前列腺癌組織標本均來自我院，根據按WTO病理分級標準包括低分化腺癌15例、中分化腺癌15例、高分化腺癌15例，同樣選取經病理證實的為良性前列腺增生組織標本15例作為對照。

1.2 免疫組織化學方法檢測方法 采用SP免疫組織化學DAB染色法，步驟：將切片進行常規脫蠟、水化，用雙氧水(3%)將內源性過氧化物酶去除，微波抗原修復采用枸櫞酸鹽緩沖液進行，予兔血清(5%)封閉15 min后分別滴加DR4、DR5及DcR1單克隆抗體，4℃過夜；滴加生物素標記的二抗IgG，置于室溫下15 min后滴加鏈酶親和素-過氧化物酶15 min，依次進行DAB染色、蘇木素復染、梯度酒精脫水和二甲苯透明，最后采用中性樹膠進行封片。陰性對照以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗，按著色范圍及強度判斷結果。DAB顯色試劑盒和超敏SP(羊)免疫組化試劑盒購自武漢博士德公司。羊抗人受體DR4、DR5及DcR1單克隆抗體購自Santa Cruz公司。DR4、DR5及DcR1陽性表達的平均吸光度值(A)采用HPIAS-1000型圖像分析系統測定，該切片的代表值為隨機測定的5個高倍視野的平均值。

1.3 統計學方法 應用SPSS17.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（±s)表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

高分化、中分化、低分化前列腺癌組織與前列腺增生組織比較DR4、DR5受體的表達水平差異均無統計學意義(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中DcR1的表達水平均明顯低于前列腺增生組織，差異有統計學意義(P＜0.05)，且DcR1的表達水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中依次降低，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 前列腺增生及不同病理分級前列腺癌組織TRAILR表達水平±s)

表1 前列腺增生及不同病理分級前列腺癌組織TRAILR表達水平±s)

注：與前列腺增生比較，aP＜0.05；與高分化前列腺癌比較，bP＜0.05；與中分化前列腺癌比較，cP＜0.05。

3 討論

近年來研究證明腫瘤是由細胞增殖和凋亡失衡所引起，其發生、發展及消退與細胞凋亡有密切關系，因此細胞增殖增加和凋亡減少都參與了前列腺癌的形成過程[4]。Drachenbery等[4]研究發現前列腺癌的細胞增殖及細胞凋亡指數都明顯增高。腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體TRAIL于1995和1996年分別分離并鑒定，是在TNF和FASL之后TNF超家族中的第3個凋亡分子，其特點在于能有效、快速地誘導腫瘤細胞凋亡，但不作用于大多數正常組織[5]。TRAIL受體包括DR4、DR5、DcR1、DcR2和OPG等，其中DR4、DR5為死亡受體，不同程度的表達于各種腫瘤細胞及正常細胞，而DcR1、DcR2為誘騙受體，在腫瘤組織中不表達或極少表達，而表達于正常組織中。OPG主要調節骨密度，DcR1、DcR2在正常組織中通過與死亡受體DR4、DR5競爭性的結合TRAIL，從而使正常組織不被TRAIL殺傷[6]。因此，TRAIL能夠選擇性誘導腫瘤細胞凋亡而未發現明顯的副作用[7]。基于TRAIL的這一特性，其被作為多種腫瘤基因治療的靶基因[8]。而TRAIL受體表達的種類和數量是TRAIL治療腫瘤是否敏感的關鍵環節。因此，我們應用免疫組織化學方法對前列腺癌組織表達TRAIL受體表達的種類和數量進行了觀察。

本研究結果顯示，前列腺癌組織與前列腺增生組織比較DR4、DR5受體的表達水平差異均無統計學意義(P＞0.05)，但高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中DcR1的表達水平均明顯低于前列腺增生組織(P＜0.05)，且DcR1的表達水平在高分化、中分化、低分化前列腺癌組織中依次降低(P＜0.05)。提示由于TRAIL受體DcR1的大量表達于良性前列腺增生組織而使其避免被TRAIL殺傷，DcR1在前列腺癌的發生發展中可能具有重要作用，同時本研究也證明前列腺癌對TRAIL在受體水平上敏感，為TRAIL治療前列腺癌提供基礎。

綜上所述，TRAIL受體DcR1在前列腺癌的發生發展中可能發揮重要作用，對前列腺癌組織各種TRAIL受體的表達進行研究可以進一步了解TRAIL受體與前列腺癌的關系。

[1]曾 翔,梁 勇,付光慶.IGF-1、PCNA和Caspase3在前列腺癌組織的表達及臨床意義[J].海南醫學,2013,24(19):2809-2812.

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[3]Wu GS.TRAIL as a target in anti-cancer therapy[J].Cancer Lett, 2009,285(1):1-5.

[4]Drachenberg CB,Ioffe OB,Papadimitriou JC.Progressive increase of apoptosis in prostatic intraepithelial neoplasia and carcinoma: comparison between in situ end-labeling of fragmented DNA and detection by routine hematoxylin-eosin staining[J].Arch Pathol Lab Med,1997,121(1):54-58.

[5]曹關義,劉 霞,李維前,等.TRAIL聯合5-Fu對結腸癌細胞的增殖抑制作用及機制探討[J].山東醫藥,2013,53(30):16-20.

[6]郝建軍.TRAIL及其受體在腫瘤治療中作用機制研究的現狀與展望[J].河北醫科大學學報,2012,33(7):862-866.

[7]朱 鑫,何衛陽.TRAIL在前列腺癌的研究進展[J].國際泌尿系統雜志,2012,32(4):518-521.

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Expression of TRAIL receptors in human prostate cancer and its significance

XIE Li-ren1,PAN Wei-bing1,ZENG Can1,ZHU Bin1,ZHOU Jian-hua2
1.Department of Urology,the People's Hospital of Pingshan District of Shenzhen,Shenzhen 518118,Guangdong,CHINA;2.Department of Urology,the People's Hospital of Longgang District of Shenzhen,Shenzhen 518172,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression of TRAIL receptors in human prostate cancer and its clinical significance.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression levels of DR4,DR5 and DcR1 receptors in 45 cases of prostate cancer and 15 cases of benign prostatic hyperplasia.ResultsThere were no significant differences in the expression levels of DR4 and DR5 receptor in well-differentiated,moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer and benign prostatic hyperplasia(P＞0.05).However,the expression levels of DcR1 in well-moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer tissue were significantly lower than that in benign prostatic hyperplasia(P＜0.05).And the expression levels of DcR1 in well-differentiated,moderately differentiated,poorly differentiated prostate cancer tissues were gradually reduced(P＜0.05).ConclusionTRAIL receptors DcR1 may play an important role in the development of prostate cancer.

Prostate cancer;Apoptosis;Immunohistochemistry;Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand;Receptor

R737.25

A

1003—6350(2014)15—2191—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.15.0853

2014-03-19)

深圳市龍崗區2013年度科技計劃項目(編號：YS2013024)

謝禮仁。E-mail：lirenx1972@126.com