金納米分光光度法測定尿中痕量鳥苷

劉慧，徐薇，王永生

(南華大學公共衛生學院，湖南衡陽 421001)

鳥苷是嘌呤核苷類物質的一種，在藥品和食品行業中是一種非常重要的中間體，并且它在制造無環鳥苷、三氮唑核苷、三磷酸鳥苷鈉等藥物當中充當主要原料。同時，鳥苷還在當今一些癌癥的確診中也突顯出了其重要意義［1-2］。目前，檢測鳥苷的主要手段有高效液相色譜法［3］、分子印跡固相微萃取［4］、毛細管電泳法［5］、薄層掃描法［6］等。雖然這些方法都有其優點，但普遍存在操作費時和設備昂貴等缺點。本研究基于鳥苷與金納米間的相互作用可改變吸光度的原理，建立了檢測鳥苷的金納米分光光度的新方法。該方法不僅操作簡單，而且還具備快速、廉價等優點。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

鳥苷、氯金酸、檸檬酸三鈉、氯化鈉、Britton-Robinson(BR)緩沖溶液等試劑均為分析純;實驗用水為雙蒸滅菌水。

島津UV2550紫外-可見分光光度計;TG16-WS離心機;AB204-S電子分析天平;PB-20酸度計。

1.2 金納米粒子制備

根據文獻［7-8］，金納米粒子可用檸檬酸還原法制得，再用0.22 μm的濾膜過濾。紫外-可見吸收光譜下520 nm 處消光系數為2.7 ×108(mol·cm－1)，濃度約為8.1 nmol/L，粒徑大小約(15±2)nm。

1.3 實驗方法

在2 mL EP管中，依次加入pH 3.6 BR緩沖液100 μL，金納米溶液 40 μL，放置 10 min，待反應完全后，加入鳥苷及氯化鈉70 μL，并用雙蒸滅菌水加至500 μL，放置5 min。在UV-2550紫外可見分光光度計上200～700 nm進行掃描，得到紫外吸收光譜。取λ630和λ530處的吸光度比值為檢測信號，用ΔA630/A530與不同濃度鳥苷建立標準曲線進行定量分析。

2 結果與討論

2.1 光譜特征

圖1b為制得金納米粒子(AuNPs)溶液的吸收光譜，其溶液為酒紅色，最大吸收峰在530 nm附近加入鳥苷后，溶液顏色由酒紅色變為藍紫色，530 nm吸收強度減小，而在630 nm處出現一個新的吸收峰(見圖1c)。……