化學(xué)檢測實驗室的方法驗證與確認(rèn)

周科煖

（衢州方圓檢測有限公司，浙江 衢州 324002）

化學(xué)檢驗實驗室主要依靠準(zhǔn)確掌握檢驗方法和掌控測試結(jié)果的有效性兩個方面來保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，通常對檢測方法的控制要求有兩個控制理念，分別為方法驗證和方法確認(rèn)。一部分實驗室工作人員在進(jìn)行檢測時，不區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)方法和非標(biāo)準(zhǔn)方法，直接使用同一種方式和操作方法進(jìn)行檢測，這就會在實驗室檢測標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)方面出現(xiàn)很大的不確定度，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文首先介紹了化學(xué)檢驗實驗室人員應(yīng)掌握的方法驗證和方法確認(rèn)兩個基本概念，然后采用幾種的技術(shù)方法手段，滿足檢測結(jié)果準(zhǔn)確行的要求，達(dá)到客戶的檢測目標(biāo)。

1 方法驗證和方法確認(rèn)的區(qū)別

方法驗證的對象：實驗室應(yīng)該在引入檢測或校準(zhǔn)前，能夠證實并正確應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)方法。所謂標(biāo)準(zhǔn)方法，是由相關(guān)專業(yè)機(jī)構(gòu)評價確認(rèn)后，向社會公開的技術(shù)規(guī)范文件。方法驗證是指實驗室在進(jìn)行檢測前所需要證實其自身技術(shù)能力是否滿足符合了相關(guān)的規(guī)定要求。

方法確認(rèn)的對象：實驗室在使用非標(biāo)準(zhǔn)方法或其它超出、擴(kuò)充修改后的方法等情形時，要首先進(jìn)行方法確認(rèn)，確認(rèn)這些方法的目標(biāo)是能夠獲得準(zhǔn)確有效的檢測結(jié)果。

2 方法驗證和方法確認(rèn)的步驟

2.1 方法驗證的步驟

在進(jìn)行新檢測驗證時，實驗室要首先對所對應(yīng)的新建立的檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析，對實驗室人員、設(shè)備、試劑材料和檢測環(huán)境等進(jìn)行評估，判別實驗室是否符合檢測工作的基本標(biāo)準(zhǔn)要求。當(dāng)評估結(jié)果滿足條件后，要驗證實驗室是否具備準(zhǔn)確執(zhí)行檢測標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)能力。針對化學(xué)檢測實驗室，要經(jīng)過試驗進(jìn)行驗證實驗室人員所工作的技術(shù)參數(shù)是否達(dá)到檢測標(biāo)準(zhǔn)要求，具體參數(shù)有標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限、回收率和精密度等。如表1～3。

當(dāng)檢測標(biāo)準(zhǔn)發(fā)生變化后，首先要對新標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估，若發(fā)現(xiàn)新標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)僅僅是名稱、文本格式、技術(shù)參數(shù)單位等方面變化的話，直接通過技術(shù)評審，通過實驗室認(rèn)證機(jī)構(gòu)更改需要變更項目就可以滿足實驗室審核需求。若發(fā)現(xiàn)新標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)與之前的技術(shù)路線有重大變化，需要對實驗室所有資源條件重新進(jìn)行評審，通過檢測標(biāo)準(zhǔn)的需求后，再通過試驗驗證相關(guān)技術(shù)參數(shù)是否具備能夠執(zhí)行新檢測標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)能力。

2.2 方法確認(rèn)的步驟

在使用標(biāo)準(zhǔn)方法和制定實驗室方法等情況下，實驗室工作人員要首先進(jìn)行試驗，確認(rèn)技術(shù)路線和技術(shù)參數(shù)是否合理，并進(jìn)行相關(guān)不確定度評估；之后通過做比對試驗或與外部實驗室進(jìn)行對比等方法，完成非標(biāo)準(zhǔn)方法的準(zhǔn)確有效性評價，根據(jù)相關(guān)規(guī)定通過技術(shù)審批，在使用前告知客戶；在進(jìn)行技術(shù)確認(rèn)中，還要完成方法特異性、抗干擾性、不確定度等評估。

非標(biāo)準(zhǔn)方法投入使用后，也要對方法進(jìn)行變更，除了通過上述步驟方法外，還要對新的非標(biāo)準(zhǔn)文本中的技術(shù)路線及參數(shù)做出評估與修正，并要通過相關(guān)部門的技術(shù)審核。

3 化學(xué)檢測方法與參數(shù)的確認(rèn)

化學(xué)檢測的對象包括禁用物質(zhì)、限制使用的物質(zhì)和無限制物質(zhì)三類，考慮到這三類物質(zhì)的不同特性，在進(jìn)行化學(xué)檢測和確認(rèn)過程中要充分考慮到對試驗方案和結(jié)果評價的相關(guān)影響。從方法驗證和確認(rèn)參數(shù)角度看，化學(xué)檢測方法制表為校準(zhǔn)曲線、回收率、精密度、準(zhǔn)確度；非標(biāo)準(zhǔn)方法確認(rèn)技術(shù)指標(biāo)出上述條件外，還要進(jìn)行方法的特異性、耐用性、不確定度評估等。

3.1 方法的校準(zhǔn)曲線

在進(jìn)行化學(xué)檢測實驗室方法校準(zhǔn)曲線過程中，校準(zhǔn)曲線包含的工作范圍至少要包含5個檢測點，對于篩選方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，對于確證方法，線性回歸方程相關(guān)系數(shù)不得低于0.99。

3.2 方法的回收率

回收率主要表示在檢測過程中所獲得測試結(jié)果的準(zhǔn)確性程度。

影響回收率試驗結(jié)果的主要因素之一是被測物濃度的變化，因此，在進(jìn)行實驗驗證過程中，對于禁用物質(zhì)，回收率應(yīng)在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進(jìn)行試驗；對已制定的最大化學(xué)殘留量，回收率應(yīng)在方法測定低限、最大化學(xué)殘留量、隨機(jī)選點進(jìn)行試驗；對于未明文規(guī)定的化學(xué)殘留量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)在方法測定低限、常見限量指標(biāo)、隨機(jī)選點進(jìn)行試驗。可參考表1數(shù)據(jù)進(jìn)行評價。

表1 回收率接受范圍

表2 實驗室精密度變異系數(shù)

表3 實驗室內(nèi)變異系數(shù)偏差范圍

3.3 方法的精密度

精密度主要表示操作檢測過程所獲得測試結(jié)果的穩(wěn)定水平。精密度試驗在對于禁用物質(zhì)進(jìn)行檢測時，應(yīng)在測定低限、兩倍測定低限和十倍測定低限進(jìn)行；對于已制定和未指定最大化學(xué)殘留量的情況，參照回收率方法進(jìn)行試驗。所選取的濃度范圍需最少重復(fù)測量六次，測試結(jié)果通過實驗室內(nèi)變異系數(shù)表達(dá)，標(biāo)準(zhǔn)偏差通過Bessel公式計算，系數(shù)如表2所示。

3.4 方法的準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確度是指重復(fù)分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，測定的含量經(jīng)過回收率校準(zhǔn)后，得到測定值與真實值之間的偏差范圍，如表3所示。

3.5 方法的特異性

實驗室在使用非標(biāo)方法、實驗室設(shè)計等方法時，僅依靠色譜分析的技術(shù)手段不能夠準(zhǔn)確的區(qū)分同一種分子量物質(zhì)，因此需要使用方法特異性來進(jìn)行確認(rèn)。對于能夠準(zhǔn)確定量檢測的方法要保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，避免對異構(gòu)體結(jié)果出現(xiàn)誤判。根據(jù)待測物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，使用分子光譜等其它檢測技術(shù)，最終可以達(dá)到方法的特異性檢測需求。

3.6 方法的抗干擾性和耐用性

實驗室采用的非標(biāo)準(zhǔn)方法應(yīng)具有一定的抗干擾性，即對外界環(huán)境及其它影響因素對檢測的影響具有一定得抗干擾性能；在測試條件在一定條件及范圍內(nèi)發(fā)生變動時，檢測方法應(yīng)具有一定的容錯功能，保證測試結(jié)果不出現(xiàn)大的波動改變。檢測方法的技術(shù)設(shè)備、操作過程等應(yīng)在多數(shù)環(huán)境條件下具有適用性和耐用性，不宜具有苛刻的使用要求。

結(jié)語

在實驗室檢測工作中，方法驗證和方法確認(rèn)是能夠做到檢測準(zhǔn)確的重要環(huán)節(jié)之一，只有做好這兩項才能夠用數(shù)據(jù)來證實實驗室使用標(biāo)準(zhǔn)方法的操作能力，證實非標(biāo)準(zhǔn)方法的準(zhǔn)確有效性，最終能夠保證實驗室檢測結(jié)果的科學(xué)性、適用性及準(zhǔn)確無誤。

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