朱惠照,鄭化先,王 瑛,李建淼,徐 靖,朱衛東,李明焱,,?
(1.浙江壽仙谷醫藥股份有限公司,浙江武義 321200;2.金華壽仙谷藥業有限公司,浙江武義 321200;3.浙江省珍稀植物藥工程技術研究中心,浙江武義 321200)
靈芝品種仙芝1號的選育
朱惠照1,鄭化先1,王 瑛2,李建淼2,徐 靖3,朱衛東1,李明焱1,2,3?
(1.浙江壽仙谷醫藥股份有限公司,浙江武義 321200;2.金華壽仙谷藥業有限公司,浙江武義 321200;3.浙江省珍稀植物藥工程技術研究中心,浙江武義 321200)
以一野生赤靈芝的分離組織為材料,采用紫外線誘變技術,經菌株分離、培養等步驟,育成子實體和孢子產量高、抗逆性好、品質優的赤靈芝新品種仙芝1號。該品種于2009年通過浙江省非主要農作物品種審定。采用袋料栽培,仙芝1號子實體鮮品、干品和孢子產量為(61.21±0.93),(19.28±0.47)和(16.05± 0.23)kg,靈芝多糖、三萜酸含量為2.13%±0.01%和0.67%±0.02%;采用段木栽培,仙芝1號子實體鮮品、干品和孢子產量為(95.88±0.26),(39.93±0.17)和(24.65±0.22)kg,粗多糖、三萜酸含量為2.47%± 0.08%和0.83%±0.06%。仙芝1號耐高溫上限為35℃,抗木霉、青霉、根霉和綠霉能力強,成品率達99%。
赤靈芝;仙芝1號;紫外線誘變;品種選育;品種比較
靈芝(Ganodermalucidum(Curtis)P.Karst.)又名赤芝、紅芝、靈芝草,入載《中國藥典》,自古作為“扶正固本,久食長生”的傳統保健藥物[1]。現代科學研究發現,靈芝富含多糖類、三萜類、肽類、核苷類、甾醇類、生物堿等活性成分,有雙向調節機體功能,具提高免疫力、抗輻射、抗缺氧、抗腫瘤、抗氧自由基、強心及保護心肌缺血、保肝、鎮靜安神、降壓、降血脂、降血糖、鎮咳、平喘等藥理作用[2-3]。
我國是靈芝3大主產國之一,但是主栽品種為日本紅芝、韓芝,缺乏具有自主知識產權的優良品種。上述2個主栽品種早年分別引自日本、韓國,因為長期種植,種性已出現嚴重退化,因此生產上迫切需要新的替代品種。
本團隊自20世紀90年代開始收集野生種質資源,經過十多年的努力,通過多代的分離、培養并結合紫外線誘變技術培育出了優良赤芝新品種仙芝1號[4-5],該品種于2009年通過了浙江省非主要農作物品種審定。現將選育過程和特征特性總結如下。
1999年6月,從武義縣仙童村白洋山采集到一棵野生赤芝,子實體重1216g。同年,經組織分離、培養獲10支試管種,編號為仙源1號至仙源10號。試管培養期間,發現其中仙源1號、仙源2號、仙源5號、仙源9號菌絲生長較好,并進行了保留。2000年,對該4菌株的發菌速度、成品率、產量等指標進行比較,發現仙源5號表現最優。隨后,對仙源5號子實體進行紫外線誘變,誘變后的子實體經培養、分離等程序,又獲得15支試管種,編號為仙芝1號至仙芝15號。
2001年,將仙芝系列菌株與仙源5號進行比較,因為部分菌絲生長力較弱,在發菌階段即被淘汰,僅剩下1,2,3,5,8,10,12,14,15號等9個菌株與仙源5號進行比較,結果(表1)仙芝1號綜合農藝性狀表現最好,正式定名為仙芝1號。
仙芝1號的菌蓋呈半圓形或腎形,木栓質,紅褐色,富有光澤,有環狀棱紋和輻射狀皺紋(圖1);菌柄側生,不規則圓柱形,紫褐色,有漆樣光澤(圖2)。

表1 仙芝系列赤靈芝菌株段木栽培農藝性狀比較

圖1 靈芝仙芝1號與3個對照品種的菌蓋形態比較

圖2 靈芝仙芝1號的植株形態
3.1 材料
試驗在浙江壽仙谷醫藥股份有限公司武義縣桃溪灘靈芝栽培基地進行,按照仿野生栽培方式種植于設施大棚內。
仙芝1號、仙源5號由浙江省珍稀植物藥工程技術研究中心提供;日本紅芝、韓芝由上海市農業科學院食用菌研究所提供。
3.2 方法
母種培養。采用PDA培養基,用接種針挑取黃豆大小的菌絲塊,轉接于滅菌后的試管斜面培養基中央,置28℃恒溫箱或培養室中避光發菌,待菌絲長滿斜面后使用,或置4℃冰箱中先保存。
原種培養。培養基范圍較廣,可根據情況選用。培養基滅菌后溫度降至30℃以下時,在接種室(箱)內按無菌操作接入母種,25~28℃下避光發菌。一般培養20~25d菌絲可長滿瓶。
栽培種培養。培養基配方為木屑、麩皮、白糖、石膏粉等,含水量60%~65%。高壓滅菌,接種與培養方法同原種。
品種比較。以日本紅芝、韓芝和仙源5號為對照品種。試驗同時采用袋料栽培和段木栽培2種方式,袋料栽培150袋,種植面積約16.7m2,段木栽培150段,約26.7m2,重復3次,2002-2005連續進行4年。
3.3 結果與分析
3.3.1 子實體和孢子產量
表2顯示,無論是子實體產量還是孢子產量都是仙芝1號顯著高于對照。用袋料栽培,150袋仙芝1號的子實體鮮品、子實體干品和孢子產量分別為(61.21±0.93)kg,(19.28±0.47)kg和(16.05± 0.23)kg,比日本紅芝增加12.40%,37.90%和45.30%,比韓芝增加16.99%,40.13%和44.65%,比仙源5號增加8.92%,17.08%和12.12%;用段木栽培,150段仙芝1號的子實體鮮品、子實體干品和孢子產量分別為(95.88±0.26)kg,(39.93±0.17)kg和(24.65±0.22)kg,比日本紅芝增加26.17%,24.61%和61.92%,比韓芝增加21.54%, 23.32%和56.40%,比仙源5號增加16.59%,17.26%和15.60%。

表2 2002-2005年仙芝1號品比試驗產量表現
3.3.2 靈芝多糖和三萜酸含量
靈芝多糖和三萜酸的含量是靈芝品質的重要指標。表3表明,用袋料栽培,仙芝1號子實體干品中的靈芝多糖、三萜酸含量分別為2.13%±0.01%和0.67%±0.02%,比日本紅芝增加40.13%和30.32%,比韓芝增加13.75%和13.43%,比仙源5號增加8.54%和6.52%;用段木栽培,仙芝1號的靈芝多糖、三萜酸含量分別為2.47%±0.08%和0.83%± 0.06%,比日本紅芝增加31.03%和39.04%,比韓芝增加21.20%和20.48%,比仙源5號增加15.73%和3.74%。

表3 2002-2005年仙芝1號品比試驗子實體干品功效成分含量
3.3.3 菌株生長速度、抗逆性
仙芝1號菌絲生長速度較快,從接種到滿袋時間較比日本紅芝、韓芝和仙源5號分別縮短了6,3和2d;從接種到第1潮芝采收的時間比日本紅芝、韓芝和仙源5號分別縮短了3,4和2d。
仙芝1號抗木霉、青霉、根霉、綠霉能力強,其雜菌污染率為1.0%±0.0%,日本紅芝、韓芝和仙源5號分別為8.1%±0.1%,11.8%±0.3%和3.3%±0.1%。仙芝1號耐高溫能力強,在夏天大棚溫度高達33℃時,仍能良好生長,菌蓋外形美觀,而日本紅芝、韓芝、仙源5號子實體停止生長。綜合比較表明,仙芝1號耐高溫上限分別較日本紅芝和韓芝高3℃和5℃。
紫外線誘變技術在真菌、細菌等微生物育種中較為常用,往往能獲得正向突變的菌株。通過品種比較試驗發現,選育的靈芝新品種仙芝1號具有產量高、品質優、抗逆性強等特點,且它的優良特性可穩定遺傳。仙芝1號的成功選育將為我國靈芝種植提供優良品種,替代目前已出現種性退化的日本紅芝和韓芝品種,有助于該產業的健康可持續發展。
[1] 卯曉嵐.中國蕈菌[M].北京:科學出版社,2009:624-625.
[2] 活潑,馮緯,周利南,等.醬油渣發酵物對小鼠免疫功能影響的初步研究[J].浙江農業科學,2010(5):431-433.
[3] PatersonRR.Ganoderma-atherapeuticfungalbiofactory[J].Phytochemistry,2006(18):1985-2001.
[4] 朱惠照,李明焱,楚桐麗,等.仙芝1號赤芝新品種鑒定[J].食用菌學報,2009(3):25-28.
[5] 朱惠照,李明焱,楚桐麗,等.仙芝1號赤芝新品種穩定性及品比試驗[J].食用菌,2010(2):22-23.
(責任編輯:張才德)
S567.3
A
0528-9017(2014)08-1163-03
文獻著錄格式:朱惠照,鄭化先,王瑛,等,靈芝品種仙芝1號的選育[J].浙江農業科學,2014(8):1163-1165.
2014-05-15
浙江省重點農業科研項目(2006C22079)。
朱惠照(1964-),女,副研究員,主要從事珍稀食藥用菌和名貴中藥材的品種選育、栽培及新產品的研究開發和推廣工作。
李明焱,研究員。E-mail:zhenhao6@126.com。