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常青白參顆粒防治兔球蟲病的試驗研究

2014-07-03 15:16:47劉向東等
科技與創(chuàng)新 2014年7期

劉向東等

摘 要:該試驗旨在研究常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。選用(35±2)日齡仔兔80只,隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實驗動物模型。

關(guān)鍵詞:常青白參顆粒;兔球蟲病;化學(xué)藥物;藥效

中圖分類號:S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病,是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高,特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染,而且對不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同,可分為腸型、肝型和混合型,但在臨床上多見混合型。目前,對該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主,但這些化學(xué)藥物的長期使用易產(chǎn)生耐藥性,使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生,但是,強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng),球蟲基因工程疫苗目前還處于實驗室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視,一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰,而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難,且費(fèi)用昂貴。中藥相對化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點,比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等。現(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下(主要以散劑為主)和組方龐大等原因,導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源,且潞黨參為黨參地道藥材。為了對黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用,課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥,研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型,研究了常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

常青白參顆粒:由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成,由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成,規(guī)格為50 g/袋(1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g)。

地克株利溶液:購于四川齊金動物藥業(yè)有限公司,規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場,按漂浮法收集卵囊,將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min,取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中,29 ℃恒溫孵育3 d,卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗動物及分組設(shè)計

選用體重相近的(35±2)日齡斷奶幼兔80只,經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查,糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組、中藥治療組。空白對照組不感染球蟲卵囊,也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個球蟲卵囊。模型對照組感染前后不用藥;陽性藥物組從感染當(dāng)天開始,在飲水中添加地克珠利溶液(每100 mL兌水500 L),連用14 d;中藥治療組從感染當(dāng)天開始,灌服常青白參顆粒(用純凈水稀釋,每50 g用水1 000 mL),10 mL/只,1次/d,連用14 d。

1.4 測定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對所有的兔進(jìn)行稱重,隨后在球蟲感染14 d時,稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對增重率

相對增重率(%)=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率(%)=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度,用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分,具體記分方法為:腸道壁無肉眼可見病變者記為0分;腸道壁有少量散在的淤血點,腸道壁不增厚,內(nèi)容物正常者記為1分;腸道壁有較多的淤血點,腸道內(nèi)容物明顯帶血,腸道壁增厚,盲腸內(nèi)容物正常者記為2分;腸道有較多血液或有盲腸芯(血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物)、腸道壁明顯增厚者記為3分:腸道充滿大量血液或盲腸芯很大,致使盲腸腫大或死亡者記為4分,對每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分,再按下式計算每組的病變值:病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中,充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉螅梦⒘恳埔浩魑? μL于載玻片上,在顯微鏡下計數(shù)卵囊數(shù)量,重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù),按下式算出克卵囊數(shù)(Oocyst pergram,OPG):

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. (1)

當(dāng)0≤OPG<0.1時,卵囊值為0;當(dāng)0.1≤OPG<1時,卵囊值為1;當(dāng)1≤OPG<6時,卵囊值為10;當(dāng)6≤OPG<11時,卵囊值為20;當(dāng)OPG≥11時,卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計算藥物的抗球蟲指數(shù)(Anticoccidial Index,ACI):抗球蟲指數(shù)(ACI)=(相對增重率+存活率)-(病變值+平均卵囊值)。

判定標(biāo)準(zhǔn)為:ACI≥180者為高效;180>ACI≥160者為中效;160>ACI≥120者為低效;ACI<120者為無效。

由表1可知,中藥治療組的相對增重率為92.48%,存活率為100%,抗球蟲指數(shù)為186.48,療效達(dá)到高效。陽性對照藥地克珠利的相對增重率為73.94%,存活率為95%,抗球蟲指數(shù)為146.94,療效僅為低效。試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。

3 討論

該試驗除了空白對照組外,其他試驗組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀,比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對照組的相對增重率為46.25%,病變值為33,存活率為75%,抗球蟲指數(shù)為48.25,這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥,在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上,采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒,入肝、肺經(jīng),抗瘧殺蟲、清熱利水,為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒,入肝、膽、腎經(jīng),退虛熱、解暑熱,截瘧。白頭翁苦、寒,入大腸、肝、胃經(jīng),清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥,協(xié)助常山抗瘧殺蟲,兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平,入脾、肺經(jīng),補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥,期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面:①呵護(hù)胃氣,克制前三味藥苦寒傷胃的副作用;②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ),達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48,具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。此試驗結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗提供了可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉以民,彭光林.地克珠利、鹽霉素、氯苯胍對兔球蟲病的影響[J].中國養(yǎng)兔雜志,2008(11):25-26.

[2]宋鴻雁,邵義祥.國內(nèi)兔球蟲病流行現(xiàn)狀及防控研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī),2013(9):89-91.

[3]朱樓英,何忠平,余建國.兔球蟲病藥物防治的進(jìn)展[J].福建畜牧獸醫(yī),2010,32(3):35-36.

[4]許金俊.動物寄生蟲病學(xué)實驗教程[M].南京:河海大學(xué)出版社,2007.

摘 要:該試驗旨在研究常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。選用(35±2)日齡仔兔80只,隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實驗動物模型。

關(guān)鍵詞:常青白參顆粒;兔球蟲病;化學(xué)藥物;藥效

中圖分類號:S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病,是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高,特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染,而且對不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同,可分為腸型、肝型和混合型,但在臨床上多見混合型。目前,對該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主,但這些化學(xué)藥物的長期使用易產(chǎn)生耐藥性,使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生,但是,強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng),球蟲基因工程疫苗目前還處于實驗室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視,一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰,而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難,且費(fèi)用昂貴。中藥相對化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點,比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等。現(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下(主要以散劑為主)和組方龐大等原因,導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源,且潞黨參為黨參地道藥材。為了對黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用,課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥,研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型,研究了常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

常青白參顆粒:由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成,由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成,規(guī)格為50 g/袋(1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g)。

地克株利溶液:購于四川齊金動物藥業(yè)有限公司,規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場,按漂浮法收集卵囊,將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min,取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中,29 ℃恒溫孵育3 d,卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗動物及分組設(shè)計

選用體重相近的(35±2)日齡斷奶幼兔80只,經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查,糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組、中藥治療組。空白對照組不感染球蟲卵囊,也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個球蟲卵囊。模型對照組感染前后不用藥;陽性藥物組從感染當(dāng)天開始,在飲水中添加地克珠利溶液(每100 mL兌水500 L),連用14 d;中藥治療組從感染當(dāng)天開始,灌服常青白參顆粒(用純凈水稀釋,每50 g用水1 000 mL),10 mL/只,1次/d,連用14 d。

1.4 測定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對所有的兔進(jìn)行稱重,隨后在球蟲感染14 d時,稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對增重率

相對增重率(%)=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率(%)=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度,用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分,具體記分方法為:腸道壁無肉眼可見病變者記為0分;腸道壁有少量散在的淤血點,腸道壁不增厚,內(nèi)容物正常者記為1分;腸道壁有較多的淤血點,腸道內(nèi)容物明顯帶血,腸道壁增厚,盲腸內(nèi)容物正常者記為2分;腸道有較多血液或有盲腸芯(血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物)、腸道壁明顯增厚者記為3分:腸道充滿大量血液或盲腸芯很大,致使盲腸腫大或死亡者記為4分,對每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分,再按下式計算每組的病變值:病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中,充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉螅梦⒘恳埔浩魑? μL于載玻片上,在顯微鏡下計數(shù)卵囊數(shù)量,重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù),按下式算出克卵囊數(shù)(Oocyst pergram,OPG):

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. (1)

當(dāng)0≤OPG<0.1時,卵囊值為0;當(dāng)0.1≤OPG<1時,卵囊值為1;當(dāng)1≤OPG<6時,卵囊值為10;當(dāng)6≤OPG<11時,卵囊值為20;當(dāng)OPG≥11時,卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計算藥物的抗球蟲指數(shù)(Anticoccidial Index,ACI):抗球蟲指數(shù)(ACI)=(相對增重率+存活率)-(病變值+平均卵囊值)。

判定標(biāo)準(zhǔn)為:ACI≥180者為高效;180>ACI≥160者為中效;160>ACI≥120者為低效;ACI<120者為無效。

由表1可知,中藥治療組的相對增重率為92.48%,存活率為100%,抗球蟲指數(shù)為186.48,療效達(dá)到高效。陽性對照藥地克珠利的相對增重率為73.94%,存活率為95%,抗球蟲指數(shù)為146.94,療效僅為低效。試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。

3 討論

該試驗除了空白對照組外,其他試驗組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀,比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對照組的相對增重率為46.25%,病變值為33,存活率為75%,抗球蟲指數(shù)為48.25,這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥,在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上,采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒,入肝、肺經(jīng),抗瘧殺蟲、清熱利水,為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒,入肝、膽、腎經(jīng),退虛熱、解暑熱,截瘧。白頭翁苦、寒,入大腸、肝、胃經(jīng),清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥,協(xié)助常山抗瘧殺蟲,兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平,入脾、肺經(jīng),補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥,期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面:①呵護(hù)胃氣,克制前三味藥苦寒傷胃的副作用;②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ),達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48,具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。此試驗結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗提供了可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉以民,彭光林.地克珠利、鹽霉素、氯苯胍對兔球蟲病的影響[J].中國養(yǎng)兔雜志,2008(11):25-26.

[2]宋鴻雁,邵義祥.國內(nèi)兔球蟲病流行現(xiàn)狀及防控研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī),2013(9):89-91.

[3]朱樓英,何忠平,余建國.兔球蟲病藥物防治的進(jìn)展[J].福建畜牧獸醫(yī),2010,32(3):35-36.

[4]許金俊.動物寄生蟲病學(xué)實驗教程[M].南京:河海大學(xué)出版社,2007.

摘 要:該試驗旨在研究常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。選用(35±2)日齡仔兔80只,隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實驗動物模型。

關(guān)鍵詞:常青白參顆粒;兔球蟲病;化學(xué)藥物;藥效

中圖分類號:S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:2095-6835(2014)07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病,是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高,特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染,而且對不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同,可分為腸型、肝型和混合型,但在臨床上多見混合型。目前,對該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主,但這些化學(xué)藥物的長期使用易產(chǎn)生耐藥性,使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生,但是,強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng),球蟲基因工程疫苗目前還處于實驗室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視,一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰,而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難,且費(fèi)用昂貴。中藥相對化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點,比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等。現(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下(主要以散劑為主)和組方龐大等原因,導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源,且潞黨參為黨參地道藥材。為了對黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用,課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥,研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型,研究了常青白參顆粒對兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實驗藥物

常青白參顆粒:由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成,由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成,規(guī)格為50 g/袋(1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g)。

地克株利溶液:購于四川齊金動物藥業(yè)有限公司,規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場,按漂浮法收集卵囊,將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min,取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中,29 ℃恒溫孵育3 d,卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗動物及分組設(shè)計

選用體重相近的(35±2)日齡斷奶幼兔80只,經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查,糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個處理組,每組20只,分別為空白對照組、模型對照組、陽性藥物組、中藥治療組。空白對照組不感染球蟲卵囊,也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個球蟲卵囊。模型對照組感染前后不用藥;陽性藥物組從感染當(dāng)天開始,在飲水中添加地克珠利溶液(每100 mL兌水500 L),連用14 d;中藥治療組從感染當(dāng)天開始,灌服常青白參顆粒(用純凈水稀釋,每50 g用水1 000 mL),10 mL/只,1次/d,連用14 d。

1.4 測定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對所有的兔進(jìn)行稱重,隨后在球蟲感染14 d時,稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對增重率

相對增重率(%)=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率(%)=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度,用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分,具體記分方法為:腸道壁無肉眼可見病變者記為0分;腸道壁有少量散在的淤血點,腸道壁不增厚,內(nèi)容物正常者記為1分;腸道壁有較多的淤血點,腸道內(nèi)容物明顯帶血,腸道壁增厚,盲腸內(nèi)容物正常者記為2分;腸道有較多血液或有盲腸芯(血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物)、腸道壁明顯增厚者記為3分:腸道充滿大量血液或盲腸芯很大,致使盲腸腫大或死亡者記為4分,對每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分,再按下式計算每組的病變值:病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中,充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉螅梦⒘恳埔浩魑? μL于載玻片上,在顯微鏡下計數(shù)卵囊數(shù)量,重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù),按下式算出克卵囊數(shù)(Oocyst pergram,OPG):

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. (1)

當(dāng)0≤OPG<0.1時,卵囊值為0;當(dāng)0.1≤OPG<1時,卵囊值為1;當(dāng)1≤OPG<6時,卵囊值為10;當(dāng)6≤OPG<11時,卵囊值為20;當(dāng)OPG≥11時,卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計算藥物的抗球蟲指數(shù)(Anticoccidial Index,ACI):抗球蟲指數(shù)(ACI)=(相對增重率+存活率)-(病變值+平均卵囊值)。

判定標(biāo)準(zhǔn)為:ACI≥180者為高效;180>ACI≥160者為中效;160>ACI≥120者為低效;ACI<120者為無效。

由表1可知,中藥治療組的相對增重率為92.48%,存活率為100%,抗球蟲指數(shù)為186.48,療效達(dá)到高效。陽性對照藥地克珠利的相對增重率為73.94%,存活率為95%,抗球蟲指數(shù)為146.94,療效僅為低效。試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。

3 討論

該試驗除了空白對照組外,其他試驗組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀,比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對照組的相對增重率為46.25%,病變值為33,存活率為75%,抗球蟲指數(shù)為48.25,這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論,結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法,精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥,在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上,采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒,入肝、肺經(jīng),抗瘧殺蟲、清熱利水,為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒,入肝、膽、腎經(jīng),退虛熱、解暑熱,截瘧。白頭翁苦、寒,入大腸、肝、胃經(jīng),清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥,協(xié)助常山抗瘧殺蟲,兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平,入脾、肺經(jīng),補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥,期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面:①呵護(hù)胃氣,克制前三味藥苦寒傷胃的副作用;②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ),達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗結(jié)果表明,常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48,具有明顯的抗球蟲作用,其臨床療效優(yōu)于陽性對照藥地克珠利。此試驗結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗提供了可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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