鏈霉菌菌株F-1的鑒定及其對(duì)水稻紋枯病防效的初步測定

王巖,李國慶

1.臨沂大學(xué)地質(zhì)古生物研究所,山東臨沂276000 2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院,湖北武漢430070

鏈霉菌菌株F-1的鑒定及其對(duì)水稻紋枯病防效的初步測定

王巖1,2,李國慶2*

1.臨沂大學(xué)地質(zhì)古生物研究所,山東臨沂276000 2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué)院,湖北武漢430070

采用形態(tài)特征觀察及16S rDNA序列分析等方法，對(duì)分離自健康水稻植株的內(nèi)生鏈霉菌菌株F-1進(jìn)行了鑒定；采用對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)測定了菌株F-1對(duì)水稻紋枯病菌（Rhizoctonia solani）的拮抗作用，在離體水稻葉片和活體水稻植株上，測定了菌株F-1代謝產(chǎn)物對(duì)水稻紋枯病的防治效果。結(jié)果表明：菌株F-1與普特拉鏈霉菌（Streptomyces platensi）親緣關(guān)系最近，同源性達(dá)100%，且形態(tài)與培養(yǎng)特征、生理生化特性與普特拉鏈霉菌相符，故將其命名為普特拉鏈霉菌（Streptomyces platensi）F-1；其對(duì)水稻紋枯病菌有顯著的拮抗作用，其代謝產(chǎn)物導(dǎo)致水稻紋枯病菌頂端菌絲彎曲，菌絲體皺縮畸形；在離體葉片和活體水稻植株上，菌株F-1的培養(yǎng)物濾液能夠有效防治水稻紋枯病。普特拉鏈霉菌菌株F-1對(duì)水稻紋枯病具有較好的生防潛力。

普特拉鏈霉菌菌株F-1;鑒定;水稻紋枯病;生物防治

由茄絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn）引起的水稻紋枯病是世界范圍內(nèi)分布最為廣泛的水稻病害之一，一般可減產(chǎn)10～30%，嚴(yán)重時(shí)減產(chǎn)幅度可達(dá)50%[1]。在控制水稻紋枯病為害的多種防治方法中,利用有益微生物進(jìn)行生物防治是一種經(jīng)濟(jì)有效,且無副作用的防治方法。利用拮抗微生物防治水稻紋枯病，報(bào)道較多的是利用拮抗真菌和拮抗細(xì)菌。對(duì)水稻紋枯病生物防治研究最多的是拮抗細(xì)菌[2]。鏈霉菌是存在于土壤當(dāng)中的一類重要的微生物類群，其可以產(chǎn)生豐富的次生代謝產(chǎn)物，是重要的天然抗生素來源，一些鏈霉菌代謝產(chǎn)生的抗生素類的次生代謝產(chǎn)物可以有效抑制水稻紋枯病的發(fā)生[3～4]。目前，利用分離自水稻植株的鏈霉菌對(duì)水稻紋枯病進(jìn)行防效潛力測定，并對(duì)其進(jìn)行種類鑒定，尚未見報(bào)道。鏈霉菌菌株F-1(StreptomycesplatensisF-1)是分離自湖北武漢地區(qū)水稻植株上的一株拮抗鏈霉菌，其水稻紋枯病菌等多種病原真菌均有較強(qiáng)的拮抗作用。本研究對(duì)鏈霉菌菌株F-1進(jìn)行了種類鑒定，在離體水稻葉片和盆栽水稻植株上初步測定其代謝產(chǎn)物對(duì)水稻紋枯病的防治效果，探討其對(duì)水稻紋枯病的防病機(jī)制，評(píng)價(jià)其生防應(yīng)用潛力。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

鏈霉菌菌株F-1分離于湖北武漢地區(qū)健康水稻植株，由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植病生防實(shí)驗(yàn)室保存。

1.2 種類鑒定

1.2.1 形態(tài)觀察用葡萄糖馬鈴薯瓊脂埋片培養(yǎng),28℃下分別培養(yǎng)7,14,21,28 d后,光學(xué)顯微鏡觀察基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲形態(tài)，掃描電子顯微鏡觀察培養(yǎng)7 d時(shí)的形態(tài)特征。

1.2.2 培養(yǎng)性狀將試驗(yàn)菌株用接種環(huán)畫線接種于葡萄糖馬鈴薯瓊脂、高氏合成一號(hào)、酵母浸出物麥芽糖瓊脂、燕麥瓊脂、無機(jī)鹽淀粉瓊脂、甘油天冬氨酸瓊脂、察氏蔗糖瓊脂、葡萄糖酪氨酸瓊脂、葡萄糖馬鈴薯瓊脂等各測定培養(yǎng)基，28℃光照培養(yǎng)，3～14 d分別觀察記錄菌株生長情況，對(duì)照《鏈霉菌鑒定手冊(cè)》[5]記錄氣生菌絲、基內(nèi)菌絲和可溶性色素的顏色變化。

1.2.3 生理生化特征將試驗(yàn)菌株畫線接種于PDA培養(yǎng)基，分別在5～45℃（每5℃設(shè)一梯度）暗光培養(yǎng)，7 d后，觀察記錄其生長情況。參考《鏈霉菌鑒定手冊(cè)》測定淀粉水解、纖維素利用、明膠液化、牛奶凝固與胨化、H2S產(chǎn)生、碳源利用等生理生化特征。

1.2.4 16S rDNA序列分析總DNA的提取按CTAB法，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物使用以下引物：Primer A:5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′;PrimerB:5′-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3′。PCR反應(yīng)體系(總體積50 μL):10×Buffer5.0 μL，dNTP(2 mmol/L)4.0 μL，Primer A(10 pmol/L)1.0 μL，PrimerB(10 pmol/L)1.0 μL，Taq酶(2 U/μL)0.4 μL，DNA模板(50 ng～1 μg)1.0 μL，去離子水37.4 μL反應(yīng)條件：95℃5 min；95℃1 min，55℃1 min，72℃3 min，35個(gè)循環(huán)；72℃5 min。PCR產(chǎn)物用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測。PCR回收純化后的產(chǎn)物送北京奧科生物技術(shù)有限公司測序。

1.3 抗生作用

1.3.1 對(duì)峙培養(yǎng)試驗(yàn)用接種環(huán)蘸取培養(yǎng)好的菌株F-1孢子，劃線接種于PDA平板兩側(cè)，28℃光照培養(yǎng)3 d，平板中央接種水稻紋枯菌菌絲瓊脂塊。28℃培養(yǎng)24 h，觀察在菌株F-1菌落和紋枯菌菌落之間產(chǎn)生的抑菌帶。分別挑取受抑制的紋枯菌頂端菌絲和對(duì)照紋枯菌頂端菌絲，乳酚棉蘭染色，光學(xué)顯微鏡下觀察菌絲特征。

1.3.2 菌株F-1液體培養(yǎng)濾液對(duì)水稻紋枯菌的抑制效果從菌株F-1菌落表面洗下孢子（孢子濃度為107個(gè)孢子/mL），按0.1%（V/V）的比例將菌株F-1孢子液接種至PDB液體培養(yǎng)液中，28℃振蕩培養(yǎng)（200 r/min）3 d后離心（10000 r/min,10 min），上清液用細(xì)菌過濾器過濾，得到含有抗真菌物質(zhì)的鏈霉菌菌株F-1 PDB培養(yǎng)濾液，記為AFSPDB。將制備AFSPDB按10%比例（V/V）與PDA混合倒平板，冷卻后中央接種直徑6 mm水稻紋枯菌菌絲塊，28℃光照培養(yǎng)24 h,以加無菌水處理為對(duì)照。將處理組和對(duì)照組的紋枯菌頂端菌絲乳酚棉蘭染色，光學(xué)顯微鏡觀察菌絲狀況。在含有10%比例AFSPDB的PDA平板上鋪一層無菌玻璃紙，接種紋枯菌，28℃培養(yǎng)24 h，將附有頂端菌絲的玻璃紙剪成長寬各4 mm的小片，電鏡掃描觀察菌絲形態(tài)。以加無菌水處理為對(duì)照。

1.4 防效測定

1.4.1 離體葉片防效試驗(yàn)盆栽水稻生長約40 d（水稻品種汕優(yōu)63，為水稻紋枯病感病品種），采集生理部位一致的健康水稻葉片，沖洗干凈，放入加有0.5%土溫20的自來水中潤濕葉表，剪取相同生理部位長約6 cm的水稻葉片，用AFSPDB均勻潤濕水稻葉片表面，放入無菌的培養(yǎng)皿（3片/皿），在同一端接種紋枯菌菌絲塊（直徑6 mm），28℃光照保濕培養(yǎng)，并于第1～6 d按0～4級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（0級(jí):葉片健康無癥狀；1級(jí):1%～25%葉片發(fā)病；2級(jí):26%～50%葉片發(fā)病；3級(jí):51%～75%葉片發(fā)病；4級(jí)：76%以上葉片黃化，水漬狀枯黃）記錄各葉片紋枯病病害嚴(yán)重度。設(shè)6個(gè)重復(fù)，以無菌水處理做對(duì)照。

1.4.2 盆栽防效試驗(yàn)選取新鮮、粗細(xì)均勻的水稻秸稈，剪成6 cm的小段放至三角瓶中，高壓滅菌后接種新鮮的水稻紋枯菌菌絲塊，28℃光照培養(yǎng)至水稻秸稈表面長滿水稻紋枯菌備用。盆栽水稻生長至第50 d時(shí)，將含有0.05%土溫20的AFSPDB均勻噴施到水稻植株上，分別以5%的井岡霉素乳油和無菌水處理為對(duì)照，每組處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。室溫下水稻表面晾干后，在每簇水稻植株基部接種1根長有紋枯菌的稻稈，用半透明塑料袋罩住盆栽水稻的底部，留出中上部，溫室培養(yǎng)15 d后，按照0～9級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記錄每株水稻的病害嚴(yán)重度（0級(jí)：健康無病害；1級(jí)：病斑面積小于葉鞘面積的1/4；3級(jí)：病斑面積小于葉鞘面積的1/2；5級(jí)：病斑面積大于葉鞘面積的1/2，水稻基部葉片（倒數(shù)第3、第4葉）；7級(jí)：病斑面積大于葉鞘面積的3/4，頂部葉片受到嚴(yán)重侵染；9級(jí)：病斑到達(dá)植株頂部，所有葉片被嚴(yán)重侵染，有些植株枯死[18]）。按以下公式計(jì)算水稻株發(fā)病率、病情指數(shù)和防病效果：

水稻株發(fā)病率＝發(fā)病總株數(shù)/接種總株數(shù)×100%

病情指數(shù)＝∑(各級(jí)發(fā)病株數(shù)×病級(jí)值)/(總株數(shù)×最高病級(jí)值)×100

防治效果＝(對(duì)照病情指數(shù)－處理病情指數(shù))/對(duì)照病情指數(shù)×100%

2 結(jié)果

2.1 種類鑒定

2.1.1 形態(tài)特征菌株F-1在葡萄糖馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)一周后，氣生菌絲、基內(nèi)菌絲均生長豐茂，無可溶性色素，孢子絲波曲或螺旋狀，孢子呈卵圓形或短桿狀，表面光滑，孢子直徑約1 μm。菌絲彎曲較多分枝，無橫膈膜，無斷裂（圖1）。

圖1 鏈霉菌菌株F-1菌落、孢子絲及孢子形態(tài)特征（PDA,28℃,7 d）A.菌落正面B.菌落背面C.孢子絲D.孢子鏈及孢子(SEM)Fig.1 Morphology of colony and conidia spores of Streptomyces platensis F-1 A.Obverse of colony B.Inverse of colony C.Spore hypha D.Spore chain and single spore(SEM)

2.1.2 培養(yǎng)特征菌株F-1在多數(shù)培養(yǎng)基上氣絲豐茂呈粉狀，孢子多為灰白到灰色。在多數(shù)培養(yǎng)基上均不產(chǎn)生色素，僅在甘油天冬氨酸瓊脂上7 d后漸有輕微色素產(chǎn)生（表1）。

表1 鏈霉菌菌株F-1不同培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征Table 1 Streptomyces F-1 cultural characteristics on different media

2.1.3 生理生化特征菌株F-1生長溫度范圍在10℃～40℃之間，最適宜生長的溫度為28℃～35℃。菌株F-1可使淀粉水解，在纖維素上不生長，明膠液化微弱，牛奶胨化可凝固，不產(chǎn)生H2S。該菌較好利用葡萄糖、麥芽糖、果糖、肌醇，可利用乳糖、甘油、甘露醇，不利用蔗糖山梨醇。

2.1.4 16S rDNA序列分析鏈霉菌菌株F-1 16S rDNAPCR產(chǎn)物在約1500 bp位置有一條明顯的電泳帶。將測序所得的16S rDNA序列根據(jù)測序結(jié)果,先利用BLAST搜索軟件從GenBank數(shù)據(jù)庫中調(diào)出的相關(guān)放線菌菌株的16S rDNA序列,選取同屬的10個(gè)菌株及類鏈霉菌屬（Streptomycoides），異壁鏈霉菌屬(Actinoalloteichus)放線菌屬（Actinomyces）的16S rDNA做同源性分析，利用DNAMAN軟件進(jìn)行序列比對(duì)，并構(gòu)建進(jìn)化樹。從16S rDNA序列為基礎(chǔ)的聚類圖可以看出，所選鏈霉菌屬的14個(gè)種基本聚成4個(gè)主要的分支，放線菌屬的一個(gè)菌株獨(dú)自構(gòu)成一支。待測鏈霉菌菌株F-1與Streptomyces platensis16S rDNA的同源性為100%,它們?cè)诰垲悎D上聚在一起的置信度達(dá)到100%(圖2)。

圖2 鏈霉菌菌株F-1及相關(guān)菌株的16S rDNA系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2 Phylogenetic tree showing the relationship between Streptomyces platensis F-1 and related species based on 16S rDNAsequences

綜合形態(tài)特征、培養(yǎng)性狀及生理生化性狀，將鏈霉菌菌株F-1定名為普特拉鏈霉菌(Streptomyces platensis F-1)，其16S rDNA序列已在GenBank數(shù)據(jù)庫中注冊(cè)，注冊(cè)號(hào)為EF583557。

2.2 抗生作用

28℃培養(yǎng)24 h后，在F-1菌落和紋枯菌菌落之間形成明顯的抑菌帶，寬度為10～15 mm。顯微觀察，對(duì)照菌落的紋枯菌頂端菌絲生長筆直，呈直角分枝；與鏈霉菌菌株F-1對(duì)峙培養(yǎng)的紋枯菌菌絲頂端彎曲，有的菌絲膨大，分枝異常呈銳角，明顯畸形，說明鏈霉菌菌株F-1代謝所產(chǎn)生的物質(zhì)對(duì)水稻紋枯菌菌絲生長具有顯著的抑制作用。在28℃下培養(yǎng)1 d后，加無菌水的對(duì)照組紋枯菌幾乎長滿平板，其頂端菌絲生長旺盛，呈直角分支。加AFSPDB處理組的紋枯菌生長受到抑制，菌落變厚，邊緣菌絲出現(xiàn)腫大、彎曲、分支增多等異常形態(tài)（圖3）。電鏡掃描顯示：對(duì)照組紋枯菌菌絲生長均勻，伸展自然，菌絲體飽滿光滑，分支成典型的直角；與之相反，AFSPDB處理的紋枯菌菌絲不規(guī)則扭曲，菌絲體干癟皺縮，表面粗糙，分支較多（圖4）。

圖3 鏈霉菌菌株F-1液體培養(yǎng)濾液(AFSPDB）對(duì)水稻紋枯菌菌絲生長抑制作用A.對(duì)照水稻紋枯菌菌落形態(tài)B.對(duì)照水稻紋枯菌菌絲頂端菌絲顯微形態(tài)C.AFSPDB處理的水稻紋枯菌菌落形態(tài)D.AFSPDB處理的水稻紋枯菌菌菌絲頂端顯微形態(tài)標(biāo)尺=100 μmFig.3 Effect of cultural filtrate of Streptomyces sp.F-1 on mycelial growth of Rhizoctonia solani A.R.solani culture treated with sterile distilled water B.Hyphal tips of R.solani from culture treated with sterile distilled water C.R.solani culture treated with AFSPDBand D.Hyphal tips R.solani from culture treated with AFSPDBBars=100 μm

圖4 鏈霉菌菌株F-1液體培養(yǎng)物濾液對(duì)水稻紋枯菌菌絲抑制作用的掃描電子顯微鏡觀察A.對(duì)照水稻紋枯菌菌絲形態(tài)B.AFSPDB處理的水稻紋枯菌菌絲形態(tài)Fig.4 SEM micrographs showing inhibitory effect of AFSPDBof Streptomyces sp.F-1 on Rhizoctonia solani A.Hyphal of R.solani from culture treated with sterile distilled waterB.Hyphal of R.solani from culture treated with AFSPDB

2.3 防效測定

2.3.1 離體葉片防效試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果（表2）表明：鏈霉菌F-1 PDB培養(yǎng)物濾液對(duì)水稻紋枯病均有顯著的防效(P＜0.05)。例如，在接種培養(yǎng)第3 d時(shí)，無菌水對(duì)照處理組的水稻紋枯病嚴(yán)重度為2.2級(jí)，而鏈霉菌F-1 PDB培養(yǎng)物濾液處理組的水稻葉片病害等級(jí)為0.9，僅有零星病斑；第6 d時(shí)，無菌水處理的水稻葉片病害嚴(yán)重度接近4級(jí)，葉片黃化，潰爛，并且葉片上出現(xiàn)菌核，而鏈霉菌F-1 PDB培養(yǎng)物濾液處理組處理的水稻葉片病害嚴(yán)重度只有1.8級(jí)。

表2 鏈霉菌F-1培養(yǎng)物濾液（AFSPDB）對(duì)水稻紋枯病菌侵染的影響Table 2 Effect of the culture filtrate on infection of detached rice leaves by Rhizoctonia solani

2.3.2 盆栽防效試驗(yàn)接種培養(yǎng)15 d后（表3），對(duì)照組發(fā)病率達(dá)到100%，水稻植株發(fā)病嚴(yán)重，病害嚴(yán)重度達(dá)到6.1級(jí)，病情指數(shù)達(dá)到67.7%，在莖基部接種水稻紋枯菌的附近區(qū)域，形成1～2 cm長的不規(guī)則水漬狀病斑，菌絲擴(kuò)展到葉部，并引起葉部病斑并形成菌核。濃度為5%的井岡霉素乳油處理組，發(fā)病率為89.1，水稻病害嚴(yán)重度有所降低，為3.7級(jí)，病情指數(shù)為41.4。鏈霉菌菌株F-1液體培養(yǎng)濾液處理的水稻長勢旺盛，病害嚴(yán)重度較井岡霉素陽性對(duì)照進(jìn)一步降低，僅有少量發(fā)病，發(fā)病率為34.3%，病害嚴(yán)重度僅為0.4，病情指數(shù)為4.5，與井岡霉素處理及無菌水對(duì)照均差異顯著(P＜0.05)。

表3 鏈霉菌菌株F-1液體培養(yǎng)物濾液與井岡霉素對(duì)水稻紋枯病的防治效果Table 3 Efficacy of the antifungal substances of Streptomyces platensis.F-1 and Jinggangmycin in suppression of R. solani on rice plants

3 討論與小結(jié)

本研究參照傳統(tǒng)的鏈霉菌分類鑒別方法對(duì)拮抗鏈霉菌菌株F-1的形態(tài)學(xué)和生理生化反應(yīng)進(jìn)行了觀察鑒定。對(duì)16S rDNA序列的比較分析可知，待測鏈霉菌菌株F-1與吸水鏈霉菌屬普特拉種群具有高度同源性和置信度，說明它們具有很近在親緣關(guān)系。因此，將菌株F-1定名為普特拉鏈霉菌菌株F-1（Streptomyces platensisF-1）。研究表明，普特拉鏈霉菌產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物中，有一些對(duì)真菌具有拮抗性[7-9]。沈寅初及日本Som kyo發(fā)現(xiàn)的活性菌株,菌號(hào)為Streptomyces platensis SAN K6091，該菌株產(chǎn)生的抗生物質(zhì)對(duì)多種植物病原菌有顯著的抗菌活性[10]。本研究首次報(bào)道了分離自健康水稻植株的普特拉鏈霉菌對(duì)水稻紋枯菌有顯著的拮抗作用。

鏈霉菌菌株F-1在PDA固體培養(yǎng)基及PDB液體培養(yǎng)基生長均可產(chǎn)生對(duì)水稻紋枯菌有拮抗作用的抗菌物質(zhì)，顯微觀察結(jié)果表面，其對(duì)水稻紋枯菌的抑制效果相同，進(jìn)而初步推測它們是相同的物質(zhì)，這種物質(zhì)可能有一種或幾種具有抑菌活性的成份組成[11-12]。離體和盆栽試驗(yàn)結(jié)果表面，鏈霉菌菌株F-1孢子液及其液體培養(yǎng)物濾液均對(duì)水稻紋枯病有顯著防效，具有成為水稻紋枯病生防因子的潛力，類似前人報(bào)道的鏈霉菌PM5[13]，可提取其抗菌物質(zhì)用于病害的防治。此外，鏈霉菌菌株F-1在液體和固體培養(yǎng)下均可產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)，尤其在固體培養(yǎng)時(shí)其產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)水稻紋枯菌所引起葉片紋枯，核盤菌(Sclerotinia.sclerotiorum)所引起的油菜葉枯和灰霉菌（Botrytis cinerea）引起的草莓灰霉病均有顯著防效[14]，進(jìn)一步增強(qiáng)了其生防潛力及開發(fā)利用價(jià)值。

拮抗放線菌生物防治病害的途徑主要有兩種途徑：一是寄生在植物組織體內(nèi)，誘導(dǎo)植物自身產(chǎn)生抗病性或代謝出一些具有抑菌作用的活性物質(zhì)（抗生素）影響病原菌的新陳代謝過程，從而達(dá)到防病治病的目的；二是在寄主體外利用[15]。本研究中，經(jīng)鏈霉菌菌株F-1抗菌物質(zhì)處理的水稻紋枯菌菌絲皺縮、干癟，水稻紋枯菌菌絲體內(nèi)容物外泄。Olivia研究發(fā)現(xiàn)，一些抗菌物質(zhì)能引起某些離子從菌體內(nèi)釋放出來，從而引起細(xì)胞死亡[16]。離體拮抗試驗(yàn)中，鏈霉菌菌株F-1產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)對(duì)水稻紋枯菌不是完全抑制，而是減慢其生長，說明鏈霉菌菌株F-1產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)只是對(duì)水稻紋枯菌細(xì)胞產(chǎn)生毒害，或是引起細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外泄后，導(dǎo)致細(xì)胞生長活力衰退，致病能力下降，而沒有將其殺死。根據(jù)以上結(jié)果初步推斷，鏈霉菌菌株F-1的防病機(jī)制之一是其產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)使水稻紋枯菌菌絲頂端彎曲畸形，生長速度大幅度減慢，導(dǎo)致了其致病力下降。這一結(jié)論與Moreno報(bào)道相一致[17]。

本研究表明，分離自健康水稻植株的普特拉鏈霉菌菌株F-1對(duì)水稻紋枯菌有較強(qiáng)拮抗性，其液體培養(yǎng)產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)在離體水稻葉片和盆栽水稻上均對(duì)水稻紋枯病具有顯著防效，對(duì)水稻紋枯病具有很好的防治潛力。

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Identification of Streptomyces platensi Strain F-1 and the Control Effect on Rice Sheath Blight

WANG Yan1,2,LI GUO-qing2*
1.Institute of Geology and Paleontology,Linyi University,Linyi 276000,China 2.College of Plant Science and Technology of Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China

Strain F-1 was identified by morphological and cultural traits,physio-biochemical characteristics and 16S rDNA sequence analysis.Antagonistic interaction between strain F-1 and Rhizoctonia solani,was tested using the dual cultural method.Cultural filtrate of strain F-1 was determined for control of R.solani on in vitro rice leaves and on rice plants.The results showed that strain F-1 was most closely related to Streptomyces platensis(100%si milarity)by the 16S rDNA sequence analysis,the morphological and cultural traits,and physio-biochemical characte ristics of strain F-1 conformed with S.Platensis,so strain F-1 was affiliated to Streptomyces platensis F-1.It inhib ited growth of R.solani,resulting in hyphal malformation.Application of the culture filtrate of strain F-1 to rice d etached rice leaves and to potted rice plants reduced disease incidence caused by R.solani effectively.Strain F-1w as preliminarily identified as S.platensis F-1,and it is an effective agent against R.solani.

Streptomyces platensis F-1;identification;rice sheath blight;biological control

S435.115

A

1000-2324(2014)03-0321-07

2012-10-21

2012-11-04

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30570079);臨沂市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(201312024);2013年山東省高等學(xué)校青年骨干教師國內(nèi)訪問學(xué)者項(xiàng)目(1413097)

王巖(1979-),女,講師,博士,主要從事生物學(xué)研究.E-mail:wangyan6696@lyu.edu.cn

*通訊作者:Author for correspondence.E-mail:guoqingli@mail.hzau.edu.cn