櫻桃核主要成分分析及其抗氧化性研究

甄天元，肖軍霞

（青島農業大學食品科學與工程學院，山東青島266109）

櫻桃核主要成分分析及其抗氧化性研究

甄天元，肖軍霞*

（青島農業大學食品科學與工程學院，山東青島266109）

櫻桃可以加工成櫻桃汁、櫻桃酒、櫻桃醋、櫻桃果脯等農副產品，而櫻桃核卻在加工中成為廢棄物。以大紫紅和嶗山紅櫻桃核為材料，測定了其主要成分，并分別對其水、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物進行了抗氧化性研究。結果表明，櫻桃核中主要含有水分、蛋白質和油脂等成分，嶗山紅櫻桃核的4種提取物的還原能力、羥基自由基抑制率和超氧陰離子抑制率最高的均為水提取物，分別達到0.27%、61.5%和38.7%，這說明嶗山紅櫻桃核中起抗氧化作用的主要是水溶性成分。

櫻桃核；成分；抗氧化性

近年來，櫻桃種植面積急劇擴大，產量劇增，由于櫻桃果實的貯存保鮮性差，運輸不便，其深加工產品的開發顯得十分必要[1]。目前，櫻桃深加工產品主要有櫻桃果脯、櫻桃汁、櫻桃酒、櫻桃醋、櫻桃罐頭等，但是在這些深加工產品中，通常取櫻桃果肉用以生產，櫻桃果核一般棄之，櫻桃核便成了櫻桃加工中的廢棄物[2]。嶗山紅櫻桃和大紫紅櫻桃一直以來都是被廣泛接受的優良品種，具有極大的加工價值，但其櫻桃核仍未被利用。為了開發新的資源，加強櫻桃的綜合利用，本試驗分析了大紫紅櫻桃核和嶗山紅櫻桃核中的主要成分及其含量，并運用不同的溶劑對其進行提取，研究不同溶劑提取物的抗氧化性，對充分開發利用櫻桃核資源起到重要作用。

1 材料與方法

1.1 材料及設備

嶗山紅櫻桃，青島嶗山產；大紫紅櫻桃，山東煙臺產。石油醚、濃鹽酸、氫氧化鈉、乙醇等試劑均為分析純。

RE52-CS旋轉蒸發儀、SHZ—Ⅲ型真空循環水真空泵：上海亞榮生化儀器廠；HWS-20恒溫水浴箱：龍口市先科儀器有限公司；分析天平：北京賽多利斯儀器有限公司；UV-2000型可見分光光度計：尤尼柯（上海）儀器有限公司；烘箱：上海?，攲嶒炘O備有限公司。

1.2 方法

1.2.1 核重比的測定

隨機抽取若干個櫻桃，稱量櫻桃的總重，再除去果肉后稱量櫻桃核的總重，兩者之間的比值為櫻桃的核重比。

1.2.2 水分的測定

根據GB/T5009.3-2010《食品中水分的測定》測定櫻桃核中的水分含量。

1.2.3 油脂的測定

稱取測定過水分的櫻桃核粉30 g，裝入濾紙筒中，根據GB/T5009.6-2003《食品中脂肪的測定》測定櫻桃核中的油脂含量。根據文獻測定油脂中的酸價和碘價[3]。

1.2.4 蛋白質的測定

根據文獻采用凱氏定氮法測定櫻桃核中的蛋白質含量[3]。

1.2.5 還原糖的測定

根據GB/T5009.7-2008《食品中還原糖的測定》測定櫻桃核中還原糖含量。

1.2.6 灰分的測定

根據GB/T5009.4-2010《食品中灰分的測定》測定櫻桃核中灰分含量。

1.3 不同溶劑提取物的抗氧化性測定

1.3.1 不同溶劑提取物的制備[4]

按照上述工藝路線分別得到石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物，經過真空濃縮，4℃保存，做后續抗氧化實驗。

1.3.2 提取液對羥基自由基的抑制作用

采用D-脫氧核糖-鐵體系法測定。依次加入0.4mL 50mmol/L pH7.5的磷酸緩沖液，1.04 mmol/L EDTA、1.0mmol/L FeCl3、2.0mmol/LVC和10.0mmol/LH2O2各0.1mL，再加入提取液0.1mL（空白不加，補加蒸餾水0.1mL），0.1mL 60mmol/L脫氧核糖（對照不加）?；靹颍ＷC各管總體積為1.0mL，在37℃下保溫1 h后取出，加入1.0 mL25%鹽酸終止反應，再加入1.0 mL1.0%硫代巴比妥酸，于沸水浴中反應15min，冷卻后于532 nm處測定吸光值[5]。對羥基自由基的抑制率按下式計算：

式中：A0為未加清除劑的吸光值；A1為加入清除劑后的吸光值；A2為試劑空白的吸光值。

1.3.3 提取液還原能力的測定

采用鐵氰化鉀還原法測定。取1mL樣品液，加入pH6.6的磷酸緩沖液（0.2mol/L）2.5mL，1%鐵氰化鉀溶液2.5mL，混勻，在50℃條件下保溫20min，再加入2.5mL10%三氯乙酸，混合后以3000 r/min離心10min，取2.5mL上清液，加入0.5mL 0.1%FeCl3和2.5mL蒸餾水搖勻，放置5min，以蒸餾水調零，在700 nm處測定吸光值[6]。

以pH 7.8的0.05mol/L磷酸鹽緩沖液作溶劑，配置含13mmol/L甲硫氨酸（Met），10 mmol/L核黃素（RF），7.5×10-2mmol/L氮藍四唑（NBT），100mmol/L EDTA及不同提取物，總體積為3.0mL。在25℃，一定光強的熒光燈下照射30min后于560 nm處測定吸光度[7]。按下式計算提取物對的抑制率：

式中：A0為未加清除劑的吸光值；Ai為加入清除劑后的吸光值。

1.4 數據處理

實驗平行測定3次，采用Spss20.0對數據進行顯著性及相關性分析。

2 結果與討論

2.1 成分測定結果

嶗山紅和大紫紅櫻桃核成分含量見表1和表2。

表1 櫻桃核主要成分含量Tab le1 Contentsof the themajor components in cherry stone %

表2 櫻桃核油脂性質Table2 Propertiesof cherry stoneoil

由表1可知，櫻桃核中的營養成分除了水分之外，主要是油脂和蛋白質。大紫紅中水分、油脂和還原糖含量均顯著高于嶗山紅，而蛋白質含量卻顯著低于嶗山紅。由表2可知，嶗山紅櫻桃核油屬于半干性油脂，大紫紅櫻桃核油屬于不干性油脂，且都富含中短鏈脂肪酸和不飽和脂肪酸[8]。經過核重比的測定，嶗山紅的櫻桃核重比為（10.30±0.45）%，而大紫的核重比為（10.12±0.27）%。由于嶗山紅的核重比較大，而且，嶗山紅櫻桃為本地區的產品，所以，選擇嶗山紅櫻桃核為原料，分別制備水提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物進行后續研究。

2.2 提取物的抗氧化能力

2.2.1 提取物對羥基自由基的抑制作用

嶗山紅櫻桃核提取物對羥基自由基的抑制作用見圖1。

圖1 不同提取物對羥基自由基的抑制作用Fig.1 Inhibition of differenceextractson hydroxyl radical

羥基自由基是目前所知活性氧中對生物體毒性最強、危害最大的一種自由基，它可以通過電子轉移、加成以及脫氫等方式與生物體內的多種分子作用[9]，造成糖類、氨基酸、蛋白質、核酸和脂類等物質的氧化性損傷，使細胞壞死或突變。對羥基自由基和超氧自由基的清除率是評價一種物質抗氧化作用強弱的重要指標[10]。由圖1可知，水提取物對·OH的抑制作用最高達到61.5%，顯著高于正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚提取物。由此可見，水提取物具有較強的抗氧化性。而從顏色反應的初步判斷結果可知，水提取物中可能含有黃酮類物質，而黃酮類物質對羥基自由基具有較強的抑制作用，這與張靜敏等研究的櫻桃核中類黃酮的提取及其抗氧化性研究報道結果一致[11]。

2.2.2 提取物的還原能力

嶗山紅櫻桃核提取物的還原能力見圖2。

圖2 不同提取物的還原能力Fig.2 Reducing power of differenceextracts

還原能力是表示抗氧化物質提供電子能力的重要指標，抗氧化物質通過提供電子可使自由基變成穩定的分子，從而失去活性[9]。許多研究證實抗氧化活性同還原力是密切相關的。由圖2可知，水提取物、正丁醇提取物的還原能力均較強，且沒有顯著性差異。

2.2.3 提取物對超氧陰離子的清除作用

嶗山紅櫻桃核提取物對超氧陰離子的清除作用見圖3。

圖3 不同提取物對超氧陰離子清除作用Fig.3 Inhibition of differenceextractson superoxide free radical

超氧陰離子自由基的形成最早，是氧進行單電子的還原反應首先生成的產物。由它可生成羥自由基（·OH）、過氧化氫、脂質過氧化物（ROOH）及單線態氧等其它活性氧，引發人體許多疾病的生理變化過程[9]。一旦清除了它，則使·OH等的生成變為無源之水，可以從根本上預防體內形成過多的不必要的·OH和其它相應的活性氧自由基。由圖3中可知，嶗山紅櫻桃核水提取物對超氧陰離子的抑制作用最強達到38.7%，顯著高于正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚提取物。

3 結論

本文以大紫紅和嶗山紅櫻桃核為材料，測定了其主要成分，并對水、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物進行了抗氧化性研究。結果表明，櫻桃核中主要含有水分、蛋白質和油脂等成分，嶗山紅櫻桃核的4種提取物的還原能力、羥基自由基抑制率和超氧陰離子抑制率最高的均為水提取物，這說明嶗山紅櫻桃核中起抗氧化作用的主要是水溶性成分。

[1]Jacob RA,Spnozzi GM,Simon VA,et al.Consumption of cherries lowers plasmaurate in healthywomen[J].Journal of Nutrition,2003, 133(6):1826-1829

[2]BellDR,Gochenaur K.Directvasoactiveand vasoprotective propertiesofanthocyanin-rich extracts[J].Journalof Applied Physiology, 2006,100(4):1164-1170

[3]李和生.食品分析實驗指導[M].北京:科學出版社,2012.

[4]劉湘,汪秋安.天然產物化學[M].北京:化學工業出版社,2005

[5]莫簡.活性氧及其生物學作用[J].生物化學與生物物理進展, 1981,38(2):23-29

[6]焦中高,劉杰超,王思新.黑莓紅色素對活性氧自由基和亞硝基的清除作用[J].食品添加劑,2004,25(4):127-128

[7]吳春.花色素抗氧化作用的研究[J].哈爾濱商業大學學報,2003,4 (3):492-494

[8]冉軍艦,盧奎,張玲麗,等.櫻桃仁油的精煉工藝研究[J].中國糧油學報,2007,22(6):122-124

[9]呂曉玲,邱松山,孫曉俠,等.油茶總皂苷的抗氧化及清除自由基能力初步研究[J].食品科學,2005,26(11):86-89

[10]張敬敏,呂玲玲,郭磊.櫻桃核中類黃酮的提取及其抗氧化性研究[J].中國釀造,2010(6):65-68

[11]蘇偉,趙利,劉建濤,等.梔子總皂苷抗氧化能力的研究[J].食品科學,2009,30(15):75-77

M ajor Com ponents and Antioxidant Capability Analysis of Cherry Stone

ZHEN Tian-yuan，XIAO Jun-xia*
（College of Food Science and Engineering，Qingdao Agricultural University，Qingdao 266109，Shandong，China）

Cherry can be processed to juice，wine，vinegarand preserve，but the cherry stone isoften discarded asawaste.In this paper，themajor components in the stone of Dazhihong cherry and Laoshan red cherry were determined and theantioxidantcapabilitiesof theaqueousextract，pettroleum extract，ethylacetateextract，and n-butanol extract of Laoshan red cherry stone were measured.The results indicated that the cherry stones consistedmainly ofwater，protein，and lipid.The aqueous extract of the stone of Laoshan red cherry had the highest reducing capability，hydroxyl radical inhibition rate and superoxide anion inhibition activity compared with other organic solvent extracts，reaching 0.27%，61.5%and 38.7%respecitvely，implying that the antioxidantcapability of Laoshan red cherry stonewascontributedmainlybywater-soluble components.

cherry stone；components；antioxidantcapabilities

2013-07-09

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.23.030

甄天元（1974—），男（漢），講師，碩士，從事功能性食品開發。

*通信作者：肖軍霞（1977—），女（漢），教授，博士，從事功能因子穩態化技術研究。