人臍靜脈血管內皮細胞在體移植替代猴角膜內皮細胞的形態學分析△

張文佳 胡竹林 朱勤 韋春玲 孫曉梅 代解杰 劉海 楊忠昆

【實驗研究】

人臍靜脈血管內皮細胞在體移植替代猴角膜內皮細胞的形態學分析△

張文佳 胡竹林 朱勤 韋春玲 孫曉梅 代解杰 劉海 楊忠昆

血管內皮細胞；角膜內皮細胞；恒河猴

目的 使用去除后彈力層的恒河猴自體角膜為細胞載體，將培養的人臍靜脈血管內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)種植到角膜內表面，觀察HUVEC替代恒河猴角膜內皮細胞的功能情況以及HUVEC在恒河猴眼內生長的情況。方法 取恒河猴6只隨機分為3組：實驗組(3只)、實驗對照組(2只)、空白對照組(1只)。實驗組：用離心沉淀法將培養的HUVEC移植到去除后彈力層的恒河猴自體角膜內表面，之后將自體角膜縫回植床；實驗對照組：將撕除部分后彈力層的術眼角膜植片原位縫回植床；空白對照組：取下術眼角膜植片不做任何處理原位縫回植床。術后觀察各組角膜植片透明情況；實驗組及實驗對照組于術后30 d及60 d、空白對照組于術后60 d行術眼摘除，標本做病理切片、CD34免疫組化及掃描電鏡，觀察房角結構及HUVEC在角膜植片內表面形態分布。結果 實驗組角膜植片維持了一定的厚度和透明性，而實驗對照組角膜植片發生嚴重大泡性改變。病理切片示實驗組角膜內表面可見一層細胞生長，CD34染色陽性，提示為血管內皮細胞；實驗對照組角膜內表面未見任何細胞生長；空白對照組角膜植片保留完整后彈力層及內皮細胞層。掃描電鏡示實驗組有HUVEC單層在角膜內表面生長但有大量白細胞聚集及少量細胞碎片嵌頓于小梁網；……