包埋技術在超聲波提取烏飯樹葉工藝中的應用

梁紅昌，李百健，邵京，盧美娟

（江蘇九久環境科技有限公司，江蘇無錫214036）

烏飯樹為杜鵑花科越桔屬植物，屬常綠灌木，是一種藥食兼用的植物[1]?！侗静菥V目》稱之為“墨飯草”，《本草拾遺》稱“牛筋”，《本草圖經》稱為“南燭草”。李時珍曾在《本草綱目》中寫道：“南燭樹葉氣味甘平、無毒、止瀉除睡，利腸胃、補骨髓，久服，固精駐顏，輕身明目”[2]?，F代科學證實，烏飯樹葉中除含有豐富的微量元素和營養物質以外，還含有以黃酮類物質為主的多種功能性成分[3]。

目前國內對烏飯樹葉的提取工藝多采用熱浸法、酶提法及超臨界CO2萃取法等對其進行研究，超臨界CO2萃取法的成本和設備要求高，可行性受到限制[4-6]；熱浸法加熱溫度較高，加熱時間較長，會導致一些熱敏性物質及一些易揮發成分降解損失。超聲波是一種彈性機械波，利用超聲振動能量，可以改變物質組織結構、狀態、功能和加速這些改變的過程。將其運用在固液萃取過程中，則可使細胞周圍和細胞內產生環流，從而提高細胞壁和細胞膜的通透性[7-8]，起到強化萃取過程、有利于細胞內有效成分浸出的作用。

傳統工藝所得的提取物原料存在色澤暗淡、渾濁，感官性質較差；異味明顯；香氣流失嚴重；極易吸潮等缺陷，不僅影響到產品的質量，也會給原料的保藏和運輸帶來不便。

針對以上存在的問題，本實驗利用超聲波工藝對烏飯樹葉進行提純，并添加適量環糊精至所得提取液中進行包埋法處理，探討提取物在物化性質方面的變化，并通過HPLC法檢測提取物中總黃酮的含量。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

1.1.1 材料

烏飯樹干葉、環糊精、純凈水、甲醇（液相）、蘆丁標品等。

1.1.2 儀器

THC-206型超聲波提取機：濟寧天華超聲電子儀器有限公司；RE-5205型旋轉蒸發器：上海亞榮生化儀器廠；FD-1C-50型真空冷凍干燥機：上海比朗儀器有限公司；安捷倫高效液相1200：北京科益恒達科技有限公司；TG20-WS型臺式高速離心機：長沙維爾康湘鷹離心機有限公司；水分測定儀：上海儀田精密儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 超聲波提取烏飯樹葉工藝

分別量取1 000 mL水溶液于A、B兩個蒸餾燒瓶中，各加入100.0 g烏飯樹葉原料，于35℃～40℃溫度條件下、頻率35 kHz超聲波儀器中提取30 min后，過濾取上清液，重復二次以上步驟，合并濾液，得到提取液A和提取液B備用。

1.2.2 包埋物質對提取液的后處理

稱取20.0 g環糊精溶于收集得到的提取液B中，于35℃水浴中加熱攪拌30 min至完全溶解收集上清液備用。

1.2.3 提取液的濃縮與干燥

所得上清液A、B在真空度為0.09 MPa的65℃溫度條件下進行減壓濃縮，收集濃縮液于冷阱盤管溫度-45℃，真空度50 Pa以下的真空冷凍干燥器中進行干燥，分別得到樣品A和樣品B。

1.2.4 樣品的檢測

1.2.4.1 水分的測定

準確稱取10.0 g待測樣品至水分測定儀托盤中，于檢測溫度105℃下觀察刻度盤指針的變化，待指針穩定不變后，讀取對應的刻度值，記錄樣品的水分含量。

1.2.4.2 HPLC檢測條件

檢測器：紫外檢測器；檢測波長：348 nm；流動相：水/甲醇；檢測時間：45 min；柱溫：30℃；色譜柱：Lichrospher C182.1×250 mm；流量：0.9 mL/min；進樣量：10 μL；定性方法：蘆丁外標法。

2 結果與分析

2.1 包埋法對提取物感官性狀的影響

稱取1.0 g未經包埋技術處理的超聲波提取物A和1.98 g用環糊精包埋處理的超聲波提取物B（含烏飯樹葉提取物50.7%），分別溶解于20 mL純凈水中制備對照溶液。包埋技術對提取物色澤的影響見圖1。

圖1 包埋技術對提取物色澤的影響Fig.1 Effect of pack cementation technique on colour and lustre

觀察結果（見圖1）顯示，經包埋技術處理的提取物B溶液色澤清澈、明亮，呈黃褐色；與樣品A溶液相比，異味消失，且具有烏飯樹葉特殊的淡淡的清香。

2.2 包埋法對提取物吸潮性的影響

樣品平鋪在平皿中，放置在溫度24℃、相對濕度72%的環境中30 min后，稱取一定質量樣品利用水分測定儀檢測其含水量M值。不同時間樣品的含水量檢測結果見表1。

表1 不同時間樣品的含水量Table 1 Water content of the samples in different time

包埋法對提取物吸潮性能的影響效果見圖2。

圖2 包埋法對提取物吸潮性能的影響效果Fig.2 Effect of pack cementation technique on hygroscopicity

分析結果顯示，樣品B與樣品A相比，在相同濕度相同時間內，其ΔM值較小，這說明了包埋法能極大的改善烏飯樹葉提取物易吸潮的缺陷，對原料的保藏具有很大的現實意義。

2.3 高效液相色譜法對烏飯樹葉提取物中總黃酮的檢測

選取蘆丁作為標準品，按照上述所設定的HPLC檢測條件采用外標法進行檢測，蘆丁標品的HPLC圖譜及烏飯樹葉提取物的HPLC圖譜見圖3～4。

圖3 蘆丁標品的HPLC圖譜Fig.3 HPLC spectra of rutin

圖4 烏飯樹葉提取物的HPLC圖譜Fig.4 HPLC spectra of Vaccinium bracteatum Thunb

通過對比表明，在相同的分析條件下，樣品和蘆丁標準品的保留時間相差約0.02 min；通過公式計算得出：樣品中總黃酮的含量為0.017 2 mg/mg。

3 討論與結論

經包埋技術處理的提取物溶液色澤清澈、明亮；與對照品溶液相比，異味消失，且具有烏飯樹葉特殊的淡淡的清香；在相同濕度相同時間內，其ΔM值較小，提取物易吸潮的缺陷明顯改善；通過蘆丁外標法對樣品進行HPLC檢測，結果顯示總黃酮的含量為0.017 2 mg/mg。

[1]王立,姚惠源,陶冠軍,等.烏飯樹樹葉中槲皮素的提取分離和鑒定[J].食品與生物技術學報,2005,24(4):89-91

[2]江蘇中醫學院.中藥大辭典(下冊)[M].上海:上海人民出版社,1977:56

[3]王立.烏飯樹黑色素中功能成分的研究[D].無錫:江南大學,2005

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[5]杜建明,史建慧,張艷芬,等.烏飯樹葉色素的提取技術及其穩定性研究[J].食品科學,1992(4):14

[6]楊瑞萄.烏飯樹葉營養飲料研制[J].食品研究與開發,1994(1):27-28

[7]宋小妹,崔九成,強軍,等.超聲法提取紋股藍總皂甙的工藝研究[J].中成藥,1998,20(5):4-5

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