商洛桔梗種子品質檢驗與質量標準

李小玲+華智銳

摘要：為制定商洛桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ）種子的質量標準，規范種子供需市場，參考種子凈度、千粒重、含水量、種子活力、發芽率等檢驗規程，對商州Ａ號、商州Ｂ號、丹鳳、商南和山陽桔梗種子進行品質檢驗。結果表明，不同桔梗種子凈度為５２．３８％～９２．１９％，千粒重０．９７３ ５～１．０９３ ０ ｇ，135℃高溫法含水量７．５３％～７．８５％，發芽勢５５．５％～８7．０％，發芽率６１．０％～８8．０％，發霉率1.33％～５．６７％，生活力７２．０％～９０．５％，活力指數０．０１１ ２～０．０２４ ３，種子的顏色有黑色和黃褐色兩種。商州Ａ號種子在凈度、千粒重、發芽能力方面均優于其他４種種子。采用發芽試驗與ＴＴＣ法測定的桔梗種子生活力基本一致。通過對商洛不同縣（區）桔梗種子的對比研究，選用種子凈度、千粒重、生活力和發芽率為主要分級指標，把商洛桔梗種子初步分成３類，提出了供生產應用的商洛桔梗種子分級標準建議。

關鍵詞：商洛桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ）；種子；品質檢驗；質量標準

中圖分類號：Ｓ５６７文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０14）09－2075-04

Quality Inspection and Quality Standards of Shangluo Platycodon grandiflorum Seeds

LI Xiao-ling, HUA Zhi-rui

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｓｈａｎｇｌｕｏ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｌｕｏ ７２６０００， Ｓｈａａｎｘｉ， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｓｈａｎｇｌｕｏ Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｓｅｅｄｓ ｗｅｒｅ ｐｕｔ ｆｏｒｗａｒｄ ｔｏ ｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅ ｔｈｅ ｍａｒｋｅｔ ｏｆ ｓｅｅｄｓ． Ｆｉｖｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｐ． ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｓｅｅｄｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｓｈａｎｇｚｈｏｕ ＮＯ．Ａ， Ｓｈａｎｇｚｈｏｕ ＮＯ．Ｂ， ａｎｄ Ｄａｎｆｅｎｇ，Ｌｕｏｎａｎ，Ｓｈａｎｙａｎｇ ｓｅｅｄｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐ． ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｓｅｅｄｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ， ｔｈｅ ｐｕｒｉｔｙ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｐ． ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｓｅｅｄｓ ｗａｓ ５２．３８％～９２．１９％． Ｔｈｅ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ａ ｔｈｏｕｓａｎｄ ｓｅｅｄｓ ｗａｓ ０．９７３ ５～１．０９３ ０ ｇ． Ｔｈｅ ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ７．５３％～７．８５％． Ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｅｎｅｒｇｙ ｗａｓ ５５．５％～８７．０％． Ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ６１．０％～８７．０％． Ｔｈｅ ｍｏｌｄｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ２．０％～５．６７％． Ｔｈｅ ｖｉｔａｌｉｔｙ ｗａｓ ７２．０％～９０．５％． Ｔｈｅ ｖｉｇｏｒ ｉｎｄｅｘ ｗａｓ ０．０１１ ２～０．０２４ ３． Ｓｅｅｄｓ ｃｏｌｏｒ ｗｅｒｅ ｂｌａｃｋ ａｎｄ ｔａｗｎｙ． Ｓｈａｎｇｚｈｏｕ ＮＯ．Ａ ｓｅｅｄｓ ｗａｓ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｔｏ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｆｏｕｒ ｓｅｅｄｓ ｗｉｔｈ ｒｅｓｐｅｃｔ ｏｆ ｓｅｅｄｓ ｐｕｒｉｔｙ， ｔｈｏｕｓａｎｄ－ｓｅｅｄｓ ｗｅｉｇｈｔ，ｔｈｅ ｓｅｅｄ ｖｉｔａｌｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ． Ｓｈａｎｇｚｈｏｕ ＮＯ．Ｂ ｓｅｅｄｓ ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｆｏｕｒ ｓｅｅｄｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｉｎｄｅｘｅｓ． Ｔｈｅ ｓｅｅｄ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｔｅｓｔ ａｎｄ ＴＴＣ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ａｌｍｏｓｔ ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ． Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｆｉｖｅ ｓｐｅｃｉｅｓ， ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｕｒｉｔｙ， ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ ａ ｔｈｏｕｓａｎｄ ｓｅｅｄｓ ａｎｄ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ， Ｓｈａｎｇｌｕｏ Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｗａｓ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ． Ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ａｂｏｕｔ Ｐ． ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ ｓｅｅｄｓ ｏｆ Ｓｈａｎｇｌｕｏ ｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｐｒｏｐｏｓｅｄ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｓｈａｎｇｌｕｏ Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ； ｓｅｅｄｓ； ｑｕａｌｉｔｙ ｔｅｓｔ； ｑｕａｌｉｔｙ ｓｔａｎｄａｒｄ

桔梗（Ｐｌａｔｙｃｏｄｏｎ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｕｍ）別名鈴鐺花、包袱花、道拉基（朝鮮語）、和尚帽等。李時珍在《本草綱目》一書中說，“此草之根結實而梗直，故名桔梗”。桔梗既是一種資源植物又是一種藥、食、觀賞兼用的經濟植物。它為桔梗科植物，以其干燥根入藥，味苦辛，性平，歸肺經；具宣肺，利咽，祛痰，排膿等功效，用于咳嗽痰多，胸悶不暢，咽痛，音啞，痢疾腹痛等［１］。

隨著桔梗市場需求量的增大，提高其產量和質量對提高我國藥農的收入和增加種植地區經濟效益都具有重要促進作用。種子作為藥材生產的源頭，是發展中藥材規范化生產的根本，中藥材種子的優良與否直接關系到中藥材的質量。目前，在桔梗生產中存在出苗率低的現象，這在很大程度上是由種子質量差造成的［２，３］。研究旨在通過對商洛桔梗種子凈度、千粒重、含水量、生活力、子粒狀況等主要檢驗指標的測定分析，初步制定桔梗種子的質量分級標準［４］，為商洛桔梗藥用種植提供一定的參考。

１材料與方法

１．１試驗材料

試驗用種為２０１２年３月分別在商州、商南、丹鳳、山陽四大桔梗種植縣（區）種子站購得。其中，商州購得的種子有兩種，購于天士力公司的種子命名為商州Ａ號（公司本地藥源基地種植），沙河子種子站提供的為商州Ｂ號（當地藥農種植）。室溫貯藏備用。

１．２方法

１．２．１種子凈度檢驗采用四分法［５］。分別將抽取的２份樣品稱重，在光潔的桌面上把凈度種子、廢種子和雜物分開，稱量凈度種子的重量。３次重復。種子凈度＝［（種子總重量－雜質重量）／種子總重量］×１００％。

１．２．２種子千粒重檢驗將全部凈種子分為４組，從每份中隨機取２５０粒，共１ ０００粒為１組，測定千粒重。３次重復。

１．２．３種子含水量檢驗１０５ ℃恒重法［６］測含水量：稱取０．５ ｇ整粒種子在烘箱中烘干，測烘干前后的重量差。３次重復。

種子含水量＝［（烘前試樣重-烘后試樣重）／烘前試樣重］×１００％

１３５ ℃高溫法：在１３５ ℃進行烘干測定，方法同“１0５ ℃恒重法”。

１．２．４種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗選取桔梗凈種子，用水浸種１２ ｈ后［７］，在２５ ℃每天光照１２ ｈ條件下，放入人工氣候箱中培養，每個培養皿中放１００粒種子，每組３次重復，測定其發芽狀況［８］。

發芽率＝（１２ ｄ發芽總粒數／供試種子粒數）×１００％

發芽勢＝（前７ ｄ內發芽種子數／供試種子粒數）×１００％

發芽指數（ＧI）＝ ∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，ＧI為發芽指數， Ｇｔ為ｔ日的發芽數， Ｄｔ為發芽時間（ｄ）。

１．２．５種子生活力檢驗活力指數Ｖ＝Ｓ·ＧI＝Ｓ·∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，Ｓ為幼苗的生長勢，也就是在種子發芽幾天后的幼苗干重或平均根長。試驗中選取發芽１２ ｄ后單株幼苗平均干重（１０５ ℃恒重法）。

用ＴＴＣ測定法［９］進行桔梗種子生活力檢驗。

1）配制。稱取 ０．５ ｇ ２，３，５－氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）放入小燒杯中，先加少許乙醇溶解，再加

２０ ｍＬ去離子水后用０．１ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液調ｐＨ至７．０，再用去離子水稀釋定容至１００ ｍＬ，配成的０．５％ＴＴＣ溶液避光保存。

2）顯色。對桔梗種子用水浸種４８ ｈ，挑選相對飽滿健全的種子，用刀片縱切成兩瓣，使胚對半分，取半粒放入裝有０．５％ＴＴＣ的試管中，于２５ ℃下染色１２ ｈ。

3）統計。倒出 ＴＴＣ 溶液，再用清水將種子沖洗 ｌ～２ 次，觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子，種胚不被染色的無活力。

１．２．６數據處理與分析 采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對試驗數據進行處理與分析。

２結果與分析

２．１桔梗種子凈度檢驗結果

從表１可知，商洛不同縣（區）的桔梗種子凈度相差較大，為５2.38％～９2.19％之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州Ａ號、商南、丹鳳、山陽、商州Ｂ號。其中，商州Ａ號種子凈度最高，為９２．１９％；商州Ｂ號種子凈度最低，含較多雜質，僅為５２．３８％。最高與最低之間相差３９．８１個百分點。

２．２桔梗種子千粒重檢驗結果

從表２可知，商洛桔梗種子的千粒重為０．９3７ 5～１．０９3 0 ｇ之間。其中，商州Ａ號種子千粒重最高，為１．０９３ ０ ｇ，最低的為山陽的種子，千粒重僅為０．９７３ ５ ｇ，最高與最低之間相差０．１１９ ５ ｇ。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近，只相差０．０３ ｇ。

２．３桔梗種子含水量檢驗結果

從表３可知，商洛不同縣（區）桔梗種子的含水量比較穩定。兩種測量方法中，１３５ ℃下烘７ ｈ測得的含水量較高，所以此方法獲得的結果較為準確。135℃高溫法下商州Ａ號種子的含水量最高，達到了７．８５％，而商南種子含水量最低，僅為７．５３％。

２．４桔梗種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗結果

從表４可知，在２５ ℃下每天光照１２ ｈ進行發芽試驗，其中發芽率最高的是商州Ａ號和丹鳳種子，分別達到８７.0％和８８.0％，而商州Ｂ號種子和山陽種子的發芽率較低，只有６３．５％和６１．０％，最高與最低相差２7．０個百分點。通過發芽指數可以看出，商州Ａ號、丹鳳和商南３種種子發芽比較整齊，而商州Ｂ號和山陽種子的發芽指數分別為19.95和15.50。

從表５可知，不同桔梗種子發霉率為商州Ｂ號種子＞山陽種子＞丹鳳種子＞商州Ａ號種子＞商南種子。其中，商州Ｂ號種子發霉率高達６．０0％，商南種子的發霉率最低，為１．３３％，兩者相差４．６７個百分點。總體上，商洛桔梗種子的發霉率較低，均小于１０％，對發芽試驗的準確性影響不大。

２．５桔梗種子生活力檢驗結果

從表６可知，商洛桔梗種子的活力指數為商州Ａ種子＞丹鳳種子＞商南種子＞商州Ｂ號種子＞山陽種子。活力指數與發芽指數的大小順序一致，它很好地反映了不同試樣點桔梗種子活力的大小。ＴＴＣ染色法測定的生活力從整體上與活力指數的大小順序一致，但不同試樣點種子染色結果相差較大。用ＴＴＣ法測得商州Ａ號種子和丹鳳種子生活力最高，分別達到９０．５％和８７．５％，而商州Ｂ號種子和山陽種子生活力最低，商南種子以８０．０％居中。

２．６數據處理與種子質量分級

試驗過程中最穩定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發芽率，采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對檢測的兩組數據進行Ｋ聚類分析，結果見表７。從表７可知，統計分析軟件把商洛桔梗種子分成３類，商州Ａ號種子和丹鳳種子為一類種子，一類種子的最低千粒重為１．０９２ １ ｇ，最低發芽率為８８％，其余兩類也都有各自的數值標準。從最低千粒重來看，一類與三類相差０．１１８ ６ ｇ，而與二類只相差０．００３ ｇ。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好，平均每個級別之間相差１３．５個百分點。

２．７商洛桔梗種子品質檢驗結果

通過對不同縣（區）桔梗種子的檢驗，從整體上得出商洛桔梗種子品質相關數據：平均凈度７６．85％，平均千粒重１．０４７ ９ ｇ，135 ℃高溫法下平均含水量７．６５％，平均發芽率７５．７％，平均發芽指數２2．28，平均發霉率３．４７％ ，平均活力指數０．０１８ １，平均生活力８１．０％。

２．８商洛桔梗種子質量分級標準的初步制定

桔梗種子品質分級還沒有制定國家和地方標準，參照本試驗研究取得的桔梗種子Ｋ聚類分析結果，結合其他作物種子質量標準，初步制定商洛桔梗種子質量分級標準（草案）見表８，以供參考。分級方法采用最低定級原則，即任何一項指標不符合規定標準都不能作為相應等級的合格種子。

３小結與討論

桔梗種子凈度相差較大，兩種購于商州區的種子卻有不同的結果，這可能與種子的采收過程有關，往往可通過再加工如篩選來提高質量。發芽率是以凈種子測定的，種子質量標準離不開凈度分析。

千粒重的差異性較小，其測定過程受干擾因素少，它反映了種子飽滿程度，其可能與發育程度及遺傳有關。

桔梗種子含水量比較穩定，這可能與地理氣候和貯藏條件有關。１３５ ℃高溫法測得的結果較準確，與郭巧生等［１０］對桔梗種子的含水量研究結論一致，也可以用粉碎烘干法測定含水量。

發芽勢、發芽率和發芽指數是發芽能力的主要指標，在發芽試驗中，不同縣（區）種子差異性明顯，較準確地體現了其發芽能力的大小。３個指標中發芽率最為重要，它直接反映種子的田間出苗率。種子的發芽情況還受發霉率的影響，發霉率主要由種子的自身特性和發芽初期的培養條件決定，若初期加水過多，桔梗種子則易發霉。

生活力是由人工短時間實驗測得，存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小，且種子表面很光滑，在浸泡種子的過程中時間長短不好把握，浸泡時間較短，種子不易切開，浸泡時間較長，種子變軟，切開時易損傷胚，這使切開種胚的操作變得困難。所以，使用染色法測桔梗種子活力難度較大。

Ｋ聚類分析結果中，分類的千粒重差值較小，這樣小的差值在實際分級工作中很難精確測出。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好。為了實際分級工作的方便，還需要對這些數值進行調整。本研究只測定了商洛4個縣（區）的桔梗種子，并未達到制定一個地區種子質量標準的嚴格要求，要保證分級標準的客觀性，只能把Ｋ聚類分析得到的結果作為一種參考依據。確定種子質量分級標準，必須在大量的實驗基礎上進行數據統計，本試驗測得的活力指數和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質量，但想要把它們當成種子質量的分級標準，就必須對商洛所有縣域的桔梗種子進行大量的、長時間的檢驗。另外，發芽結果表明，黑色種子的發芽數明顯高于黃褐色的種子，而黑色并帶有光澤的種子發芽情況最好。

綜上所述，將凈度、千粒重、生活力、發芽率作為衡量桔梗種子分級標準的主要依據，桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級標準的次要依據。可以通過把握合理的采收時間、提供良好的貯藏條件來提高桔梗種子的綜合質量，以更好地服務于中草藥生產。種子質量標準的制定需要一個長期的過程，具體有待進一步研究。

參考文獻：

［１］ 中國藥典委員會．中國藥典［M］．北京：化學工業出版社，２００５．

［２］ 孫麗娜，吳松權，王艷秋，等．市場上流通桔梗種子質量分析［Ｊ］． 中國種業，２００５（１１）：５３３．

［３］ 韋春蘭，劉麗，趙榮梅，等．桔梗種子發芽特性的研究［Ｊ］．中國中藥雜志，２００６，３１（１１）：２３．

［４］ 張春慶，王建華．藥用植物種子品質檢驗［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２００６，４２（１０）：３６－４１．

［５］ 顏啟傳．種子檢驗原理和技術［Ｍ］．杭州：浙江大學出版社，２００１．

［６］ 國際種子檢驗協會（ＩＳＴＡ）種苗評定與種子活力測定方法手冊［Ｍ］．徐本美，韓建國，等，譯.北京：北京農業大學出版社，１９９３．

［７］ ＤＡＶＩＤＳＯＮ Ｋ Ｇ Ｖ，ＳＡＷＡ Ｓ，ＭＯＯＲＥ Ｆ Ｄ， et al． Ｍａｉｚｅ ｓｅｅｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅ ｉｍｂｉｂｉｔｉｏｎ／ｄｒｙｂａｃｋ ｃｙｃｌｅｓ：ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｖｉｇｏuｒ［J］． Seed Science Research，１９９４，4（４）：31－37．

［８］ 劉自剛，張雁，王新軍，等．桔梗種子活力研究進展［Ｊ］．種子，２００６，２５（２６）：４－６．

［９］ 李錦文．種子活力測定方法研究［Ｊ］．林業科技，２０１０，１３（６）：８２－９１．

［１０］ 郭巧生，趙榮梅，劉麗，等．桔梗種子品質檢驗及質量標準研究［Ｊ］．中國中藥雜志，２００７（５）：９－１１．

１３５ ℃高溫法：在１３５ ℃進行烘干測定，方法同“１0５ ℃恒重法”。

１．２．４種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗選取桔梗凈種子，用水浸種１２ ｈ后［７］，在２５ ℃每天光照１２ ｈ條件下，放入人工氣候箱中培養，每個培養皿中放１００粒種子，每組３次重復，測定其發芽狀況［８］。

發芽率＝（１２ ｄ發芽總粒數／供試種子粒數）×１００％

發芽勢＝（前７ ｄ內發芽種子數／供試種子粒數）×１００％

發芽指數（ＧI）＝ ∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，ＧI為發芽指數， Ｇｔ為ｔ日的發芽數， Ｄｔ為發芽時間（ｄ）。

１．２．５種子生活力檢驗活力指數Ｖ＝Ｓ·ＧI＝Ｓ·∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，Ｓ為幼苗的生長勢，也就是在種子發芽幾天后的幼苗干重或平均根長。試驗中選取發芽１２ ｄ后單株幼苗平均干重（１０５ ℃恒重法）。

用ＴＴＣ測定法［９］進行桔梗種子生活力檢驗。

1）配制。稱取 ０．５ ｇ ２，３，５－氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）放入小燒杯中，先加少許乙醇溶解，再加

２０ ｍＬ去離子水后用０．１ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液調ｐＨ至７．０，再用去離子水稀釋定容至１００ ｍＬ，配成的０．５％ＴＴＣ溶液避光保存。

2）顯色。對桔梗種子用水浸種４８ ｈ，挑選相對飽滿健全的種子，用刀片縱切成兩瓣，使胚對半分，取半粒放入裝有０．５％ＴＴＣ的試管中，于２５ ℃下染色１２ ｈ。

3）統計。倒出 ＴＴＣ 溶液，再用清水將種子沖洗 ｌ～２ 次，觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子，種胚不被染色的無活力。

１．２．６數據處理與分析 采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對試驗數據進行處理與分析。

２結果與分析

２．１桔梗種子凈度檢驗結果

從表１可知，商洛不同縣（區）的桔梗種子凈度相差較大，為５2.38％～９2.19％之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州Ａ號、商南、丹鳳、山陽、商州Ｂ號。其中，商州Ａ號種子凈度最高，為９２．１９％；商州Ｂ號種子凈度最低，含較多雜質，僅為５２．３８％。最高與最低之間相差３９．８１個百分點。

２．２桔梗種子千粒重檢驗結果

從表２可知，商洛桔梗種子的千粒重為０．９3７ 5～１．０９3 0 ｇ之間。其中，商州Ａ號種子千粒重最高，為１．０９３ ０ ｇ，最低的為山陽的種子，千粒重僅為０．９７３ ５ ｇ，最高與最低之間相差０．１１９ ５ ｇ。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近，只相差０．０３ ｇ。

２．３桔梗種子含水量檢驗結果

從表３可知，商洛不同縣（區）桔梗種子的含水量比較穩定。兩種測量方法中，１３５ ℃下烘７ ｈ測得的含水量較高，所以此方法獲得的結果較為準確。135℃高溫法下商州Ａ號種子的含水量最高，達到了７．８５％，而商南種子含水量最低，僅為７．５３％。

２．４桔梗種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗結果

從表４可知，在２５ ℃下每天光照１２ ｈ進行發芽試驗，其中發芽率最高的是商州Ａ號和丹鳳種子，分別達到８７.0％和８８.0％，而商州Ｂ號種子和山陽種子的發芽率較低，只有６３．５％和６１．０％，最高與最低相差２7．０個百分點。通過發芽指數可以看出，商州Ａ號、丹鳳和商南３種種子發芽比較整齊，而商州Ｂ號和山陽種子的發芽指數分別為19.95和15.50。

從表５可知，不同桔梗種子發霉率為商州Ｂ號種子＞山陽種子＞丹鳳種子＞商州Ａ號種子＞商南種子。其中，商州Ｂ號種子發霉率高達６．０0％，商南種子的發霉率最低，為１．３３％，兩者相差４．６７個百分點。總體上，商洛桔梗種子的發霉率較低，均小于１０％，對發芽試驗的準確性影響不大。

２．５桔梗種子生活力檢驗結果

從表６可知，商洛桔梗種子的活力指數為商州Ａ種子＞丹鳳種子＞商南種子＞商州Ｂ號種子＞山陽種子。活力指數與發芽指數的大小順序一致，它很好地反映了不同試樣點桔梗種子活力的大小。ＴＴＣ染色法測定的生活力從整體上與活力指數的大小順序一致，但不同試樣點種子染色結果相差較大。用ＴＴＣ法測得商州Ａ號種子和丹鳳種子生活力最高，分別達到９０．５％和８７．５％，而商州Ｂ號種子和山陽種子生活力最低，商南種子以８０．０％居中。

２．６數據處理與種子質量分級

試驗過程中最穩定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發芽率，采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對檢測的兩組數據進行Ｋ聚類分析，結果見表７。從表７可知，統計分析軟件把商洛桔梗種子分成３類，商州Ａ號種子和丹鳳種子為一類種子，一類種子的最低千粒重為１．０９２ １ ｇ，最低發芽率為８８％，其余兩類也都有各自的數值標準。從最低千粒重來看，一類與三類相差０．１１８ ６ ｇ，而與二類只相差０．００３ ｇ。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好，平均每個級別之間相差１３．５個百分點。

２．７商洛桔梗種子品質檢驗結果

通過對不同縣（區）桔梗種子的檢驗，從整體上得出商洛桔梗種子品質相關數據：平均凈度７６．85％，平均千粒重１．０４７ ９ ｇ，135 ℃高溫法下平均含水量７．６５％，平均發芽率７５．７％，平均發芽指數２2．28，平均發霉率３．４７％ ，平均活力指數０．０１８ １，平均生活力８１．０％。

２．８商洛桔梗種子質量分級標準的初步制定

桔梗種子品質分級還沒有制定國家和地方標準，參照本試驗研究取得的桔梗種子Ｋ聚類分析結果，結合其他作物種子質量標準，初步制定商洛桔梗種子質量分級標準（草案）見表８，以供參考。分級方法采用最低定級原則，即任何一項指標不符合規定標準都不能作為相應等級的合格種子。

３小結與討論

桔梗種子凈度相差較大，兩種購于商州區的種子卻有不同的結果，這可能與種子的采收過程有關，往往可通過再加工如篩選來提高質量。發芽率是以凈種子測定的，種子質量標準離不開凈度分析。

千粒重的差異性較小，其測定過程受干擾因素少，它反映了種子飽滿程度，其可能與發育程度及遺傳有關。

桔梗種子含水量比較穩定，這可能與地理氣候和貯藏條件有關。１３５ ℃高溫法測得的結果較準確，與郭巧生等［１０］對桔梗種子的含水量研究結論一致，也可以用粉碎烘干法測定含水量。

發芽勢、發芽率和發芽指數是發芽能力的主要指標，在發芽試驗中，不同縣（區）種子差異性明顯，較準確地體現了其發芽能力的大小。３個指標中發芽率最為重要，它直接反映種子的田間出苗率。種子的發芽情況還受發霉率的影響，發霉率主要由種子的自身特性和發芽初期的培養條件決定，若初期加水過多，桔梗種子則易發霉。

生活力是由人工短時間實驗測得，存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小，且種子表面很光滑，在浸泡種子的過程中時間長短不好把握，浸泡時間較短，種子不易切開，浸泡時間較長，種子變軟，切開時易損傷胚，這使切開種胚的操作變得困難。所以，使用染色法測桔梗種子活力難度較大。

Ｋ聚類分析結果中，分類的千粒重差值較小，這樣小的差值在實際分級工作中很難精確測出。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好。為了實際分級工作的方便，還需要對這些數值進行調整。本研究只測定了商洛4個縣（區）的桔梗種子，并未達到制定一個地區種子質量標準的嚴格要求，要保證分級標準的客觀性，只能把Ｋ聚類分析得到的結果作為一種參考依據。確定種子質量分級標準，必須在大量的實驗基礎上進行數據統計，本試驗測得的活力指數和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質量，但想要把它們當成種子質量的分級標準，就必須對商洛所有縣域的桔梗種子進行大量的、長時間的檢驗。另外，發芽結果表明，黑色種子的發芽數明顯高于黃褐色的種子，而黑色并帶有光澤的種子發芽情況最好。

綜上所述，將凈度、千粒重、生活力、發芽率作為衡量桔梗種子分級標準的主要依據，桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級標準的次要依據。可以通過把握合理的采收時間、提供良好的貯藏條件來提高桔梗種子的綜合質量，以更好地服務于中草藥生產。種子質量標準的制定需要一個長期的過程，具體有待進一步研究。

參考文獻：

［１］ 中國藥典委員會．中國藥典［M］．北京：化學工業出版社，２００５．

［２］ 孫麗娜，吳松權，王艷秋，等．市場上流通桔梗種子質量分析［Ｊ］． 中國種業，２００５（１１）：５３３．

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［６］ 國際種子檢驗協會（ＩＳＴＡ）種苗評定與種子活力測定方法手冊［Ｍ］．徐本美，韓建國，等，譯.北京：北京農業大學出版社，１９９３．

［７］ ＤＡＶＩＤＳＯＮ Ｋ Ｇ Ｖ，ＳＡＷＡ Ｓ，ＭＯＯＲＥ Ｆ Ｄ， et al． Ｍａｉｚｅ ｓｅｅｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅ ｉｍｂｉｂｉｔｉｏｎ／ｄｒｙｂａｃｋ ｃｙｃｌｅｓ：ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｖｉｇｏuｒ［J］． Seed Science Research，１９９４，4（４）：31－37．

［８］ 劉自剛，張雁，王新軍，等．桔梗種子活力研究進展［Ｊ］．種子，２００６，２５（２６）：４－６．

［９］ 李錦文．種子活力測定方法研究［Ｊ］．林業科技，２０１０，１３（６）：８２－９１．

［１０］ 郭巧生，趙榮梅，劉麗，等．桔梗種子品質檢驗及質量標準研究［Ｊ］．中國中藥雜志，２００７（５）：９－１１．

１３５ ℃高溫法：在１３５ ℃進行烘干測定，方法同“１0５ ℃恒重法”。

１．２．４種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗選取桔梗凈種子，用水浸種１２ ｈ后［７］，在２５ ℃每天光照１２ ｈ條件下，放入人工氣候箱中培養，每個培養皿中放１００粒種子，每組３次重復，測定其發芽狀況［８］。

發芽率＝（１２ ｄ發芽總粒數／供試種子粒數）×１００％

發芽勢＝（前７ ｄ內發芽種子數／供試種子粒數）×１００％

發芽指數（ＧI）＝ ∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，ＧI為發芽指數， Ｇｔ為ｔ日的發芽數， Ｄｔ為發芽時間（ｄ）。

１．２．５種子生活力檢驗活力指數Ｖ＝Ｓ·ＧI＝Ｓ·∑（Ｇｔ／Ｄｔ）

式中，Ｓ為幼苗的生長勢，也就是在種子發芽幾天后的幼苗干重或平均根長。試驗中選取發芽１２ ｄ后單株幼苗平均干重（１０５ ℃恒重法）。

用ＴＴＣ測定法［９］進行桔梗種子生活力檢驗。

1）配制。稱取 ０．５ ｇ ２，３，５－氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）放入小燒杯中，先加少許乙醇溶解，再加

２０ ｍＬ去離子水后用０．１ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液調ｐＨ至７．０，再用去離子水稀釋定容至１００ ｍＬ，配成的０．５％ＴＴＣ溶液避光保存。

2）顯色。對桔梗種子用水浸種４８ ｈ，挑選相對飽滿健全的種子，用刀片縱切成兩瓣，使胚對半分，取半粒放入裝有０．５％ＴＴＣ的試管中，于２５ ℃下染色１２ ｈ。

3）統計。倒出 ＴＴＣ 溶液，再用清水將種子沖洗 ｌ～２ 次，觀察種胚被染色的情況。凡種胚全部或大部分被染成紅色的即為具有生活力的種子，種胚不被染色的無活力。

１．２．６數據處理與分析 采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對試驗數據進行處理與分析。

２結果與分析

２．１桔梗種子凈度檢驗結果

從表１可知，商洛不同縣（區）的桔梗種子凈度相差較大，為５2.38％～９2.19％之間。商洛桔梗種子凈度從高到低為商州Ａ號、商南、丹鳳、山陽、商州Ｂ號。其中，商州Ａ號種子凈度最高，為９２．１９％；商州Ｂ號種子凈度最低，含較多雜質，僅為５２．３８％。最高與最低之間相差３９．８１個百分點。

２．２桔梗種子千粒重檢驗結果

從表２可知，商洛桔梗種子的千粒重為０．９3７ 5～１．０９3 0 ｇ之間。其中，商州Ａ號種子千粒重最高，為１．０９３ ０ ｇ，最低的為山陽的種子，千粒重僅為０．９７３ ５ ｇ，最高與最低之間相差０．１１９ ５ ｇ。丹鳳和商南的種子千粒重比較接近，只相差０．０３ ｇ。

２．３桔梗種子含水量檢驗結果

從表３可知，商洛不同縣（區）桔梗種子的含水量比較穩定。兩種測量方法中，１３５ ℃下烘７ ｈ測得的含水量較高，所以此方法獲得的結果較為準確。135℃高溫法下商州Ａ號種子的含水量最高，達到了７．８５％，而商南種子含水量最低，僅為７．５３％。

２．４桔梗種子發芽率、發芽勢和發芽指數的檢驗結果

從表４可知，在２５ ℃下每天光照１２ ｈ進行發芽試驗，其中發芽率最高的是商州Ａ號和丹鳳種子，分別達到８７.0％和８８.0％，而商州Ｂ號種子和山陽種子的發芽率較低，只有６３．５％和６１．０％，最高與最低相差２7．０個百分點。通過發芽指數可以看出，商州Ａ號、丹鳳和商南３種種子發芽比較整齊，而商州Ｂ號和山陽種子的發芽指數分別為19.95和15.50。

從表５可知，不同桔梗種子發霉率為商州Ｂ號種子＞山陽種子＞丹鳳種子＞商州Ａ號種子＞商南種子。其中，商州Ｂ號種子發霉率高達６．０0％，商南種子的發霉率最低，為１．３３％，兩者相差４．６７個百分點。總體上，商洛桔梗種子的發霉率較低，均小于１０％，對發芽試驗的準確性影響不大。

２．５桔梗種子生活力檢驗結果

從表６可知，商洛桔梗種子的活力指數為商州Ａ種子＞丹鳳種子＞商南種子＞商州Ｂ號種子＞山陽種子。活力指數與發芽指數的大小順序一致，它很好地反映了不同試樣點桔梗種子活力的大小。ＴＴＣ染色法測定的生活力從整體上與活力指數的大小順序一致，但不同試樣點種子染色結果相差較大。用ＴＴＣ法測得商州Ａ號種子和丹鳳種子生活力最高，分別達到９０．５％和８７．５％，而商州Ｂ號種子和山陽種子生活力最低，商南種子以８０．０％居中。

２．６數據處理與種子質量分級

試驗過程中最穩定、受人為因素干擾最少的是千粒重和發芽率，采用ＳＰＳＳ １３．０軟件對檢測的兩組數據進行Ｋ聚類分析，結果見表７。從表７可知，統計分析軟件把商洛桔梗種子分成３類，商州Ａ號種子和丹鳳種子為一類種子，一類種子的最低千粒重為１．０９２ １ ｇ，最低發芽率為８８％，其余兩類也都有各自的數值標準。從最低千粒重來看，一類與三類相差０．１１８ ６ ｇ，而與二類只相差０．００３ ｇ。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好，平均每個級別之間相差１３．５個百分點。

２．７商洛桔梗種子品質檢驗結果

通過對不同縣（區）桔梗種子的檢驗，從整體上得出商洛桔梗種子品質相關數據：平均凈度７６．85％，平均千粒重１．０４７ ９ ｇ，135 ℃高溫法下平均含水量７．６５％，平均發芽率７５．７％，平均發芽指數２2．28，平均發霉率３．４７％ ，平均活力指數０．０１８ １，平均生活力８１．０％。

２．８商洛桔梗種子質量分級標準的初步制定

桔梗種子品質分級還沒有制定國家和地方標準，參照本試驗研究取得的桔梗種子Ｋ聚類分析結果，結合其他作物種子質量標準，初步制定商洛桔梗種子質量分級標準（草案）見表８，以供參考。分級方法采用最低定級原則，即任何一項指標不符合規定標準都不能作為相應等級的合格種子。

３小結與討論

桔梗種子凈度相差較大，兩種購于商州區的種子卻有不同的結果，這可能與種子的采收過程有關，往往可通過再加工如篩選來提高質量。發芽率是以凈種子測定的，種子質量標準離不開凈度分析。

千粒重的差異性較小，其測定過程受干擾因素少，它反映了種子飽滿程度，其可能與發育程度及遺傳有關。

桔梗種子含水量比較穩定，這可能與地理氣候和貯藏條件有關。１３５ ℃高溫法測得的結果較準確，與郭巧生等［１０］對桔梗種子的含水量研究結論一致，也可以用粉碎烘干法測定含水量。

發芽勢、發芽率和發芽指數是發芽能力的主要指標，在發芽試驗中，不同縣（區）種子差異性明顯，較準確地體現了其發芽能力的大小。３個指標中發芽率最為重要，它直接反映種子的田間出苗率。種子的發芽情況還受發霉率的影響，發霉率主要由種子的自身特性和發芽初期的培養條件決定，若初期加水過多，桔梗種子則易發霉。

生活力是由人工短時間實驗測得，存在人為的誤差可能性較大。桔梗種子非常小，且種子表面很光滑，在浸泡種子的過程中時間長短不好把握，浸泡時間較短，種子不易切開，浸泡時間較長，種子變軟，切開時易損傷胚，這使切開種胚的操作變得困難。所以，使用染色法測桔梗種子活力難度較大。

Ｋ聚類分析結果中，分類的千粒重差值較小，這樣小的差值在實際分級工作中很難精確測出。從最低發芽率來看，３個分類標準的梯度良好。為了實際分級工作的方便，還需要對這些數值進行調整。本研究只測定了商洛4個縣（區）的桔梗種子，并未達到制定一個地區種子質量標準的嚴格要求，要保證分級標準的客觀性，只能把Ｋ聚類分析得到的結果作為一種參考依據。確定種子質量分級標準，必須在大量的實驗基礎上進行數據統計，本試驗測得的活力指數和生活力能在一定程度上代表桔梗種子質量，但想要把它們當成種子質量的分級標準，就必須對商洛所有縣域的桔梗種子進行大量的、長時間的檢驗。另外，發芽結果表明，黑色種子的發芽數明顯高于黃褐色的種子，而黑色并帶有光澤的種子發芽情況最好。

綜上所述，將凈度、千粒重、生活力、發芽率作為衡量桔梗種子分級標準的主要依據，桔梗種子的外觀色澤可作為衡量其分級標準的次要依據。可以通過把握合理的采收時間、提供良好的貯藏條件來提高桔梗種子的綜合質量，以更好地服務于中草藥生產。種子質量標準的制定需要一個長期的過程，具體有待進一步研究。

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