復(fù)合生物提取物對(duì)榆紫葉甲毒殺效果研究

李曉楠+楊紹斌+

摘要：為研究大型真菌和植物提取物的殺蟲效果，篩選了１２種真菌和１７種植物，選定橙黃鵝膏菌［Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ］、艾蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ）和橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物測(cè)定其對(duì)榆紫葉甲（Ａｍｂｒｏｓｔｏｍａ ｑｕａｄｒｉｉｍｐｒｅｓｓｕｍ Ｍｏｔｓｃｈｌｓｋｙ）的殺蟲效果。急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和復(fù)合提取物對(duì)榆紫葉甲均有毒殺作用，橙黃鵝膏菌提取物的１２、２４、４８、７２ ｈ半致死濃度（ＬＣ５０）分別是１７．８８９、１６．５２１、１４．６８８、１３．５８８ ｍｇ／ｍＬ；艾蒿提取物的１２、２４、４８、７２ ｈ ＬＣ５０分別是３．５５５、２．７６４、１．７８４、１．４３６ ｍｇ／ｍＬ；橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物的１２、２４、４８、７２ ｈ ＬＣ５０分別是１６．３１７、１５．１９３、１４．０２８、１３．５０３ ｍｇ／ｍＬ；橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物無(wú)拮抗作用，且１２、２４ ｈ呈增效作用；短時(shí)間大劑量使用殺蟲效果更好。

關(guān)鍵詞：橙黃鵝膏菌［Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ］；艾蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ）；榆紫葉甲（Ａｍｂｒｏｓｔｏｍａ ｑｕａｄｒｉｉｍｐｒｅｓｓｕｍ Ｍｏｔｓｃｈｌｓｋｙ）；急性毒性；半致死濃度；復(fù)合提取物

中圖分類號(hào)：Ｓ７６３．３８；Ｓ４３３．５文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０14）08－1815-04

Toxic Insecticidal Effects ofComposite Biological Extract on

Ambrostoma quadriimpressum Motschlsky

LI Xiao-nan,YANG Shao-bin

(College of Life Science and Engineering/Key Lab of Urban Pests Control and Ecological Security in Shenyang province，Shenyang University，Shenyang 110044,China)

Abstract： Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｏｘｉｃ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｓｅｖｅｒａｌ ｌａｒｇｅ ｆｕｎｇｉ ａｎｄ ｐｌａｎｔ， １２ ｆｕｎｇｉ ａｎｄ １７ ｐｌａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ（Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｏ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｎ Ａｍｂｒｏｓｔｏｍａ ｑｕａｄｒｉｉｍｐｒｅｓｓｕｍ Ｍｏｔｓｃｈｌｓｋｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ（Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ ｈａｄ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ． Ｆｏｒ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｎ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎｅ（Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ， ｔｈｅ ＬＣ５０ ｏｎ １２， ２４， ４８ ａｎｄ ７２ ｈ ｗａｓ １７．８８９， １６．５２１， １４．６８８ ａｎｄ １３．５８８ ｍｇ／ｍＬ． Ｆｏｒ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｎ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ， ｔｈｅ ＬＣ５０ ｏｎ １２， ２４， ４８ ａｎｄ ７２ ｈ ｗａｓ ３．５５５， ２．７６４， １．７８４ ａｎｄ １．４３６ ｍｇ／ｍＬ． Ｆｏｒ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｏｎ ｔｈｅ ｍｉｘｅｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ，ｔｈｅ ＬＣ５０ ｏｎ １２，２４，４８ ａｎｄ ７２ ｈ ｗａｓ １６．３１７ １５．１９３， １４．０２８ｌ ａｎｄ １３．５０３ｍｇ／ｍＬ． Ｉｔ ｈａｄ ｓｔｒｏｎｇ ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ｏｆ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔ ａｆｔｅｒ ｍｉｘｅｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ ｉｎ １２ ａｎｄ ２４ ｈ ｗｉｔｈ ｎｏ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ ｉｔ ｈａｄ ｂｅｔｔｅｒ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｅｃｔ ｗｈｅｎ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｏｆ ｉｔ ｉｎ ａ ｓｈｏｒｔ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｔｉｍｅ．

Key words: Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ（Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ． ｅｘ Ｓ． Ｆ． Ｇｒａｙ；Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ；Ａｍｂｒｏｓｔｏｍａ ｑｕａｄｒｉｉｍｐｒｅｓｓｕｍ Ｍｏｔｓｃｈｌｓｋｙ；ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ； ＬＣ５０

榆紫葉甲（Ａｍｂｒｏｓｔｏｍａ ｑｕａｄｒｉｉｍｐｒｅｓｓｕｍ Ｍｏｔｓｃｈｌｓｋｙ）又名榆紫金花蟲，是鞘翅目（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ） 葉甲總科（Ｃｈｒｙｓｏｍｅｌｏｉｄｅａ）昆蟲，主要分布于中國(guó)的遼寧、吉林、黑龍江、內(nèi)蒙古、河北、貴州和俄羅斯的西伯利亞等地，是一種食葉害蟲，主要危害的黃榆（Ｕｌｍｕｓ ｍａｃｒｏｃａｒｐａ）、家榆（Ｕ． ｐｕｍｉｌａ）、春榆（Ｕ． ｄａｖｉｄｉａｎａ）等榆科植物［１］。早春時(shí)節(jié)，榆紫葉甲開始啃食榆科植物，其密度大時(shí)，常使榆科植物在展葉期不見其葉，呈現(xiàn)出干枯狀［２］。榆紫葉甲連年危害，采食榆科植物的芽苞和葉片，食性較為單一。榆科植物作為城市中重要的綠化景觀樹種，在整個(gè)生長(zhǎng)季固氮量、釋氧量很高，對(duì)市區(qū)內(nèi)生態(tài)環(huán)境的改善起到了巨大的作用。近年來(lái)榆紫葉甲危害日趨嚴(yán)重，引起了社會(huì)的廣泛關(guān)注。

目前榆紫葉甲的防治方法主要有物理防治、化學(xué)防治和生物防治３種。物理防治法常用人工捕捉和纏結(jié)塑料布防治，耗費(fèi)的人力物力大，效果差，在榆紫葉甲大規(guī)模暴發(fā)時(shí)難以見效，且纏結(jié)塑料布會(huì)阻礙樹木的有氧呼吸［３］，對(duì)樹木的正常生長(zhǎng)造成一定影響?；瘜W(xué)防治法主要包括樹干涂抹毒環(huán)、樹冠防治、毒繩防治和根部施藥，采用化學(xué)防治方法見效快，耗費(fèi)人力物力小，但是容易造成農(nóng)藥殘留，引起環(huán)境污染［４］。生物防治目前較為有效的方法是利用榆紫葉甲的天敵昆蟲——異色瓢蟲（Ｈａｒｍｏｎｉａ ａｘｙｒｉｄｉｓ）成蟲對(duì)其進(jìn)行防治，但存在防治周期長(zhǎng)，不適合蟲災(zāi)大規(guī)模暴發(fā)時(shí)應(yīng)急使用，同時(shí)也有可能因引進(jìn)天敵昆蟲而對(duì)當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)的平衡造成一定影響［５］。

可見，目前防治榆紫葉甲雖以化學(xué)防治法最為有效，但安全性問(wèn)題是其在城市綠化中廣泛應(yīng)用的較大障礙，開發(fā)高效低毒環(huán)保的新農(nóng)藥可為防治榆紫葉甲提供新的無(wú)公害途徑。多種植物和微生物被證實(shí)其中的某些成分存在著殺蟲活性。

大型真菌中的酮類化合物、脂肪酸類化合物等被證實(shí)有殺蟲活性。植物中的除蟲菊酯、魚藤酮、煙堿也被證實(shí)有殺蟲活性并已實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化生產(chǎn)和應(yīng)用［６］。本研究通過(guò)殺蟲活性篩選，選用具有殺蟲活性的橙黃鵝膏菌［Ａｍａｎｉｔａ ｃｉｔｒｉｎａ （Ｓｃｈａｅｆｆ．） Ｐｅｒｓ．ｅｘ Ｓ．Ｆ．Ｇｒａｙ］和艾蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｒｇｙｉ）提取物以及二者復(fù)合提取物作為殺蟲藥劑，對(duì)榆紫葉甲進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，測(cè)定橙黃鵝膏菌和艾蒿提取物及復(fù)合物提取物的毒效，通過(guò)對(duì)共毒系數(shù)的計(jì)算，分析復(fù)合物殺蟲效果，旨在為生物農(nóng)藥的研制提供配比參考。

１材料與方法

１．１材料

１．１．１大型真菌和植物樣本大型真菌和植物于２０１２年６～９月采集自遼寧省沈陽(yáng)市棋盤山風(fēng)景區(qū)和沈陽(yáng)大學(xué)校園內(nèi)，參照《中國(guó)大型真菌》和《東北植物檢索表》，由遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院劉俊杰協(xié)助進(jìn)行鑒定。

采集到的大型真菌經(jīng)鑒定有１２種，分別為綠菇［Ｒｕｓｓｕｌａ ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ （ｓｃｈａｅｆｆ．ｅｘ Ｚａｎｔｅｄ）Ｆｒ］、褐鱗環(huán)柄菇（Ｌｅｐｉｏｔａ ｈｅｌｖｅｏｌａ Ｂｒｅｓ．）、冠狀環(huán)柄菇［Ｌｅｐｉｏｔａ ｃｒｉｓｔａｔａ（Ｂｏｌｔ．：Ｆｒ．）Ｑｕéｌ．］、黃孢紅菇［Ｒｕｓｓｕｌａ ｘｅｒａｍｐｅｌｉｎａ（Ｓｃｈａｅｆｆ．ｅｘ Ｓｅｃｒ．）Ｆｒ．］、晶粒鬼傘［Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ｍｉｃａｃｅｕｓ（Ｂｕｌｌ．）Ｆｒ．］、墨汁鬼傘［Ｃｏｐｒｉｎｕｓ ａｔｒａｍｅｎｔａｒｉｕｓ（Ｂｕｌｌ．：Ｆｒ）Ｆｒ．］、小牛肝菌［Ｂｏｌｅｔｉｎｕｓ ｐａｌｕｓｔｅｒ（Ｐｅｃｋ．）Ｐｅｃｋ．］、松林小牛肝菌［Ｂｏｌｅｔｉｎｕｓ ｐｉｎｅｔｏｒｕｍ（Ｃｈｉｕ）Ｔｅｎｇ］、小白杯傘［Ｃｌｉｔｏｃｙｂｅ ｃａｎｄｉｃａｎｓ（Ｐｅｒｓ．：Ｆｒ．） Ｋｕｍｍｅｒ］、白禿馬勃［Ｃａｌｖａｔｉａ ｃａｎｄｉｄａ（Ｒｏｓｔｋ） Ｈｏｌｌｏｓ］、橙黃鵝膏菌、蛹蟲草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌ．：Ｆｒ．）Ｌｉｎｋ．］。前期對(duì)１２種大型真菌提取物進(jìn)行預(yù)備篩選試驗(yàn)，在相同濃度下，進(jìn)行提取物對(duì)榆紫葉甲的２４ ｈ急性毒性試驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果表明榆紫葉甲死亡率最高的是橙黃鵝膏菌提取物，選定橙黃鵝膏菌為后續(xù)試驗(yàn)材料。

采集１７種植物經(jīng)鑒定分別為牛蒡（Ａｒｃｔｉｕｍ ｌａｐｐａｌ）、艾蒿、青蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｎｎｕａ Ｌ．）、蒲公英（Ｔａｒａｘａｃｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、大薊（Ｃｉｒｓｉｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ ＤＣ）、蒼術(shù)（Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ ｌａｎｃｅａ）、銀杏（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ）、桃（Ａｍｙｇｄａｌｕｓ ｐｅｒｓｉｃａ Ｌｉｎｎ．）、東北鐵線蓮（Ｃｌｅｍａｔｉｓ ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａ Ｒｕｐｔ）、澤漆（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｈｅｌｉｏｓｃｏｐｉａ）、東北天南星（Ａｒｉｓａｅｍａ ａｍｕｒｅｎｓｅ Ｍａｘｉｍ）、紫蘇［Ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ（Ｌ．） Ｂｒｉｔｔ．］、白屈菜（Ｃｈｅｌｉｄｏｎｉｕｍ ｍａｊｕｓ Ｌ．）、蒙古蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａｍｏｎｇｏｌｉｃａ Ｆｉｓｃｈ．ｅｔ Ｂｅｓｓ．）、蛇床花［Ｃｎｉｄｉｕｍ ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ．）Ｃｕｓｓ．］、毒芹（Ｃｉｃｕｔａ ｖｉｒｏｓａ Ｌｉｎｎ．）、大籽蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ｓｉｅｖｅｒｓｉａｎａ）。對(duì)１７種植物提取物進(jìn)行預(yù)備篩選試驗(yàn)，進(jìn)行相同濃度提取物對(duì)榆紫葉甲２４ ｈ急性毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明榆紫葉甲死亡率最高的是艾蒿提取物，選定艾蒿為后續(xù)試驗(yàn)材料。

１．１．２供試?yán)ハx榆紫葉甲于２０１２年９月采集于遼寧省葫蘆島市龍港區(qū)雙樹鄉(xiāng)，帶回實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)４８ ｈ室內(nèi)培養(yǎng)，觀察藥劑處理前活動(dòng)情況。

１．１．３提取物橙黃鵝膏菌取子實(shí)體菌蓋和菌柄交界處組織進(jìn)行固體斜面培養(yǎng)３～５ ｄ，分離菌落接種到液體培養(yǎng)基中搖床培養(yǎng)５～７ ｄ后超聲波破碎，破碎后的發(fā)酵物經(jīng)９ ０００ ｒ／ｍｉｎ離心取上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)得濃縮液，濃縮液放鼓風(fēng)干燥箱中４０ ℃干燥至恒重，放入藥瓶中備用［７］。

艾蒿全草剪切后放入鼓風(fēng)干燥箱中干燥至恒重，中草藥粉碎機(jī)粉碎過(guò)４０目篩得艾蒿粉。艾蒿粉與９５％乙醇按質(zhì)量比１∶４混合裝入溶劑瓶，在振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)振蕩提?。梗?ｈ，真空泵抽濾，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)后經(jīng)４０ ℃鼓風(fēng)干燥至恒重，放入藥瓶中備用［８］。

１．１．４主要儀器ＬＤＺＸ－７５ＫＢＳ型立式壓力蒸汽滅菌器、ＺＤＰ－１５０型恒溫培養(yǎng)振蕩器、ＨＧ９１４６Ａ型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、ＰＲＸ－２０５Ｂ型智能人工氣候箱、ＴＤ型電子天平、ＪＹ９９－２Ｄ型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)、ＳＷ－ＣＪ－２Ｆ（Ｄ）型醫(yī)用凈化工作臺(tái)、ＧＬ－１６１Ｘ型箱式高速冷凍離心機(jī)。

１．２方法

１．２．１毒殺效果測(cè)定０．１ ｇ橙黃鵝膏菌提取物中加入０．５ ｍＬ ９５％乙醇溶解后用蒸餾水稀釋，配制終濃度為１０、１２、１４、１５、１６、１８ ｍｇ／ｍＬ的藥液進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，確定毒殺試驗(yàn)所用處理終濃度分別為１４、１５、１６、１７、１８ ｍｇ／ｍＬ的橙黃鵝膏菌提取液，以蒸餾水為空白對(duì)照，藥液ｐＨ為６．８～７．３。榆紫葉甲以榆樹枝葉飼養(yǎng)于玻璃瓶中，每１２ ｈ換瓶１次。?。保?ｍＬ藥液用小噴壺噴淋蟲體后放入人工氣候箱中，溫度（２４±２） ℃，通風(fēng)，光暗比為１２ ｈ／１２ ｈ，每組試蟲３０頭，分別測(cè)定１２、２４、４８、７２ ｈ的急性毒性。試驗(yàn)重復(fù)３次。

艾蒿提取物藥液的稀釋終濃度分別為１．５、２．０、２．５、３．０、３．５ ｍｇ／ｍＬ，毒殺效果測(cè)定試驗(yàn)方法同橙黃鵝膏菌提取物。

共毒試驗(yàn)將橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物按照質(zhì)量比１００∶１進(jìn)行混合后得到復(fù)合物混劑，總濃度為１４、１５、１６、１７、１８ ｍｇ／ｍＬ，采用相同方式測(cè)定１２、２４、４８、７２ ｈ的急性毒性。

觀察試蟲中毒癥狀。以榆紫葉甲蟲體不動(dòng)、三對(duì)足收縮不動(dòng)、用針觸碰胸部時(shí)足末端不動(dòng)、觸角收縮或未收縮的觸角用針觸碰時(shí)不動(dòng)視為已死亡。

１．２．２數(shù)據(jù)處理

死亡率＝死亡蟲數(shù)／供試蟲數(shù)×１００％；校正死亡率＝（處理死亡率-對(duì)照死亡率）／（１-對(duì)照死亡率）×１００％。

運(yùn)用ＳＰＳＳ １７．０輔助進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算毒力回歸方程和半致死濃度（ＬＣ５０）。

共毒系數(shù)＝（１／混劑ＬＣ５０值）／（１／橙黃鵝膏菌提取物的ＬＣ５０值×橙黃鵝膏菌提取物占比＋１／艾蒿提取物的ＬＣ５０值×艾蒿提取物占比）×１００。

２結(jié)果分析

２．１榆紫葉甲中毒癥狀

噴藥前榆紫葉甲行動(dòng)活躍，沿著榆樹枝葉上下爬動(dòng)，早晨爬到樹枝高處，午間在樹葉背面，晚間爬到樹枝底部，用玻璃棒觸碰其身體或周圍時(shí)會(huì)出現(xiàn)假死現(xiàn)象，３對(duì)足呈收縮狀，受重力影響掉落于飼養(yǎng)瓶底部，不再觸碰其身體和周圍３０ ｓ后恢復(fù)活動(dòng)，伸出３對(duì)足繼續(xù)運(yùn)動(dòng)。噴藥后的榆紫葉甲行動(dòng)遲緩，早中晚未出現(xiàn)有規(guī)律性爬行，對(duì)陽(yáng)光的感應(yīng)變?nèi)?，但是仍?huì)出現(xiàn)假死性，反應(yīng)速度變慢，多數(shù)躲在固定的樹葉背面，不喜爬動(dòng)。

２．２橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和混劑對(duì)榆紫葉甲的毒殺效果

不同濃度的橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者的復(fù)合混劑藥后１２、２４、４８、７２ ｈ對(duì)榆紫葉甲的毒殺情況見表１。

橙黃鵝膏菌提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭；艾蒿提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭；復(fù)合混劑處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。

從表１可見，同種提取物同一濃度處理隨時(shí)間延長(zhǎng)試蟲死亡率提高，同種提取物處理相同時(shí)間，隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率，橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物，說(shuō)明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１混合，所得復(fù)合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。

分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復(fù)合混劑對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ毒力（表２-表4）可知，所有試驗(yàn)的Ｒ２均大于０．９０，說(shuō)明試驗(yàn)準(zhǔn)確性高，誤差?。?種藥劑處理的毒力方程都能實(shí)現(xiàn)直線回歸，說(shuō)明在同一處理時(shí)間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關(guān)。

橙黃鵝膏菌提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別是１７．８８９、１６．５２１、１４．６８８、１３．５８８ ｍｇ／ｍＬ。艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是３．５５５、２．７６４、１．７８４、１．４３６ ｇ／ｍＬ。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是１６．３１７、１５．１９３、１４．０２８、１３．５０３ ｍｇ／ｍＬ。同種藥劑對(duì)試蟲的半致死濃度隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低，而在相同時(shí)間內(nèi)，艾蒿提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最小，橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最大，橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)試蟲的半致死濃度介于二者之間，接近于橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度，說(shuō)明艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲的毒性最高，提取物復(fù)合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌?；靹┲谐赛S鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質(zhì)量比為１００∶１，橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠(yuǎn)大于艾蒿提取物，這可能是復(fù)合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。

計(jì)算和分析共毒系數(shù)得知，橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１復(fù)合混劑的共毒系數(shù)１２、２４、４８、７２ ｈ分別為１０５．４３、１０３．６４、９７．７０、９２．８４，表現(xiàn)出隨時(shí)間延長(zhǎng)而呈遞減的趨勢(shì)。

當(dāng)共毒系數(shù)大于１００時(shí)復(fù)合成分為增效作用，當(dāng)共毒系數(shù)小于８０時(shí)為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進(jìn)行混合的共毒系數(shù)來(lái)看，二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用，后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢(shì)。

３小結(jié)與討論

本試驗(yàn)研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性，明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復(fù)合物對(duì)榆紫葉甲不同時(shí)間內(nèi)的毒力情況，可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。

試驗(yàn)所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物（質(zhì)量比）１００∶１復(fù)合液，橙黃鵝膏菌提取物比例大，可能是其毒力較低，與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗(yàn)結(jié)果看，艾蒿提取物殺蟲效果較好，可以通過(guò)采用增加復(fù)合提取物中艾蒿提取物的比例來(lái)提高殺蟲效果；復(fù)合混劑在試驗(yàn)前期表現(xiàn)出一定的增效作用，加大混劑用量，在短時(shí)間內(nèi)可達(dá)到更好的殺蟲效果。

研究提取物復(fù)合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過(guò)大規(guī)模擴(kuò)繁微生物得到，一定程度上可解決殺蟲劑成本問(wèn)題，而適當(dāng)加入植物提取物可以增加藥效，在生產(chǎn)實(shí)踐中具有應(yīng)用前景。榆紫葉甲為中國(guó)北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲，對(duì)其進(jìn)行生物源殺蟲劑研究，旨在尋找城市綠化中對(duì)害蟲安全有效的防治思路和方法。

試驗(yàn)采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 安麗萍，許鐵軍，王威，等．榆紫葉甲不同發(fā)育歷期藥劑防治［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２００６（４）：３５－３８．

［２］ 趙福祥，劉玉琴，張坤，等．榆紫葉甲對(duì)榆樹的危害與防治［Ｊ］．中國(guó)西部科技，２０１０（２８）：４８－４９．

［３］ 鄧淑華．大慶地區(qū)榆紫葉甲的綜合防治方法［Ｊ］．中國(guó)新技術(shù)新產(chǎn)品，２０１０（５）：２２６．

［４］ 胡春祥，劉輝，張碩．７種藥劑對(duì)榆紫葉甲和黃褐天幕毛蟲的毒力測(cè)定及防治［Ｊ］．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００９，３８（４）：１８－２０．

［５］ 王志明，鮑豐軍，單立忠，等．榆紫葉甲防治技術(shù)的初步研究［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２０１０（２）：６７－６９．

［６］ 江蘇新醫(yī)學(xué)院．中草藥大辭典（上）［Ｍ］．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，１９８６．

［７］ 毛寧，丁珊珊，余宗鐘．裸蓋菇Ｌ－００１菌株液體培養(yǎng)及其產(chǎn)毒素初探［Ｊ］．福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），２００９，２５（６）：７７－８１．

［８］ 郭亞紅．蒼耳子中揮發(fā)油的研究［Ｊ］．中國(guó)中藥雜志，１９９４，１９（４）：２３５－２４１．

橙黃鵝膏菌提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭；艾蒿提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭；復(fù)合混劑處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。

從表１可見，同種提取物同一濃度處理隨時(shí)間延長(zhǎng)試蟲死亡率提高，同種提取物處理相同時(shí)間，隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率，橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物，說(shuō)明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１混合，所得復(fù)合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。

分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復(fù)合混劑對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ毒力（表２-表4）可知，所有試驗(yàn)的Ｒ２均大于０．９０，說(shuō)明試驗(yàn)準(zhǔn)確性高，誤差小；3種藥劑處理的毒力方程都能實(shí)現(xiàn)直線回歸，說(shuō)明在同一處理時(shí)間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關(guān)。

橙黃鵝膏菌提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別是１７．８８９、１６．５２１、１４．６８８、１３．５８８ ｍｇ／ｍＬ。艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是３．５５５、２．７６４、１．７８４、１．４３６ ｇ／ｍＬ。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是１６．３１７、１５．１９３、１４．０２８、１３．５０３ ｍｇ／ｍＬ。同種藥劑對(duì)試蟲的半致死濃度隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低，而在相同時(shí)間內(nèi)，艾蒿提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最小，橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最大，橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)試蟲的半致死濃度介于二者之間，接近于橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度，說(shuō)明艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲的毒性最高，提取物復(fù)合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌。混劑中橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質(zhì)量比為１００∶１，橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠(yuǎn)大于艾蒿提取物，這可能是復(fù)合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。

計(jì)算和分析共毒系數(shù)得知，橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１復(fù)合混劑的共毒系數(shù)１２、２４、４８、７２ ｈ分別為１０５．４３、１０３．６４、９７．７０、９２．８４，表現(xiàn)出隨時(shí)間延長(zhǎng)而呈遞減的趨勢(shì)。

當(dāng)共毒系數(shù)大于１００時(shí)復(fù)合成分為增效作用，當(dāng)共毒系數(shù)小于８０時(shí)為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進(jìn)行混合的共毒系數(shù)來(lái)看，二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用，后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢(shì)。

３小結(jié)與討論

本試驗(yàn)研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性，明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復(fù)合物對(duì)榆紫葉甲不同時(shí)間內(nèi)的毒力情況，可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。

試驗(yàn)所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物（質(zhì)量比）１００∶１復(fù)合液，橙黃鵝膏菌提取物比例大，可能是其毒力較低，與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗(yàn)結(jié)果看，艾蒿提取物殺蟲效果較好，可以通過(guò)采用增加復(fù)合提取物中艾蒿提取物的比例來(lái)提高殺蟲效果；復(fù)合混劑在試驗(yàn)前期表現(xiàn)出一定的增效作用，加大混劑用量，在短時(shí)間內(nèi)可達(dá)到更好的殺蟲效果。

研究提取物復(fù)合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過(guò)大規(guī)模擴(kuò)繁微生物得到，一定程度上可解決殺蟲劑成本問(wèn)題，而適當(dāng)加入植物提取物可以增加藥效，在生產(chǎn)實(shí)踐中具有應(yīng)用前景。榆紫葉甲為中國(guó)北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲，對(duì)其進(jìn)行生物源殺蟲劑研究，旨在尋找城市綠化中對(duì)害蟲安全有效的防治思路和方法。

試驗(yàn)采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 安麗萍，許鐵軍，王威，等．榆紫葉甲不同發(fā)育歷期藥劑防治［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２００６（４）：３５－３８．

［２］ 趙福祥，劉玉琴，張坤，等．榆紫葉甲對(duì)榆樹的危害與防治［Ｊ］．中國(guó)西部科技，２０１０（２８）：４８－４９．

［３］ 鄧淑華．大慶地區(qū)榆紫葉甲的綜合防治方法［Ｊ］．中國(guó)新技術(shù)新產(chǎn)品，２０１０（５）：２２６．

［４］ 胡春祥，劉輝，張碩．７種藥劑對(duì)榆紫葉甲和黃褐天幕毛蟲的毒力測(cè)定及防治［Ｊ］．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００９，３８（４）：１８－２０．

［５］ 王志明，鮑豐軍，單立忠，等．榆紫葉甲防治技術(shù)的初步研究［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２０１０（２）：６７－６９．

［６］ 江蘇新醫(yī)學(xué)院．中草藥大辭典（上）［Ｍ］．上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，１９８６．

［７］ 毛寧，丁珊珊，余宗鐘．裸蓋菇Ｌ－００１菌株液體培養(yǎng)及其產(chǎn)毒素初探［Ｊ］．福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），２００９，２５（６）：７７－８１．

［８］ 郭亞紅．蒼耳子中揮發(fā)油的研究［Ｊ］．中國(guó)中藥雜志，１９９４，１９（４）：２３５－２４１．

橙黃鵝膏菌提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0.33、1.33、2.67頭；艾蒿提取物處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0、0、1.67、2.33頭；復(fù)合混劑處理組對(duì)照榆紫葉甲12、24、48、72 h平均死亡數(shù)為0.33、0.33、1.33、2.67頭。

從表１可見，同種提取物同一濃度處理隨時(shí)間延長(zhǎng)試蟲死亡率提高，同種提取物處理相同時(shí)間，隨著提取物濃度增大試蟲的死亡率增高。要得到相近的死亡率，橙黃鵝膏菌提取物的處理濃度要大于艾蒿提取物，說(shuō)明橙黃鵝膏菌提取物的毒性比艾蒿提取物的毒性小。黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１混合，所得復(fù)合混劑在橙黃鵝膏菌提取物相近濃度水平上的殺蟲效果優(yōu)于單一的橙黃鵝膏菌提取物。

分析橙黃鵝膏菌提取物、艾蒿提取物和二者復(fù)合混劑對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ毒力（表２-表4）可知，所有試驗(yàn)的Ｒ２均大于０．９０，說(shuō)明試驗(yàn)準(zhǔn)確性高，誤差??；3種藥劑處理的毒力方程都能實(shí)現(xiàn)直線回歸，說(shuō)明在同一處理時(shí)間試蟲死亡率和藥劑濃度存在正相關(guān)。

橙黃鵝膏菌提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８和７２ ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別是１７．８８９、１６．５２１、１４．６８８、１３．５８８ ｍｇ／ｍＬ。艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是３．５５５、２．７６４、１．７８４、１．４３６ ｇ／ｍＬ。橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)榆紫葉甲１２、２４、４８、７２ ｈ的半致死濃度分別是１６．３１７、１５．１９３、１４．０２８、１３．５０３ ｍｇ／ｍＬ。同種藥劑對(duì)試蟲的半致死濃度隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低，而在相同時(shí)間內(nèi)，艾蒿提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最小，橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度最大，橙黃鵝膏菌和艾蒿的復(fù)合提取物對(duì)試蟲的半致死濃度介于二者之間，接近于橙黃鵝膏菌提取物對(duì)試蟲的半致死濃度，說(shuō)明艾蒿提取物對(duì)榆紫葉甲的毒性最高，提取物復(fù)合混劑的毒性高于橙黃鵝膏菌?；靹┲谐赛S鵝膏菌提取物與艾蒿提取物的質(zhì)量比為１００∶１，橙黃鵝膏菌提取物所占比例遠(yuǎn)大于艾蒿提取物，這可能是復(fù)合提取物的毒力與橙黃鵝膏菌毒力更接近的原因。

計(jì)算和分析共毒系數(shù)得知，橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物１００∶１復(fù)合混劑的共毒系數(shù)１２、２４、４８、７２ ｈ分別為１０５．４３、１０３．６４、９７．７０、９２．８４，表現(xiàn)出隨時(shí)間延長(zhǎng)而呈遞減的趨勢(shì)。

當(dāng)共毒系數(shù)大于１００時(shí)復(fù)合成分為增效作用，當(dāng)共毒系數(shù)小于８０時(shí)為拮抗作用。從橙黃鵝膏菌提取物與艾蒿提取物二者進(jìn)行混合的共毒系數(shù)來(lái)看，二者在前期表現(xiàn)出輕微增效作用，后期表現(xiàn)出輕微的拮抗作用趨勢(shì)。

３小結(jié)與討論

本試驗(yàn)研究了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物的殺蟲活性，明確了橙黃鵝膏菌提取物和艾蒿提取物及二者復(fù)合物對(duì)榆紫葉甲不同時(shí)間內(nèi)的毒力情況，可以為生物源農(nóng)藥的開發(fā)研制提供參考。

試驗(yàn)所用混劑為橙黃鵝膏菌提取物∶艾蒿提取物（質(zhì)量比）１００∶１復(fù)合液，橙黃鵝膏菌提取物比例大，可能是其毒力較低，與橙黃鵝膏菌提取物相接近的原因。而從試驗(yàn)結(jié)果看，艾蒿提取物殺蟲效果較好，可以通過(guò)采用增加復(fù)合提取物中艾蒿提取物的比例來(lái)提高殺蟲效果；復(fù)合混劑在試驗(yàn)前期表現(xiàn)出一定的增效作用，加大混劑用量，在短時(shí)間內(nèi)可達(dá)到更好的殺蟲效果。

研究提取物復(fù)合混劑是為了尋找更好的生物源殺蟲劑配方。由于微生物源殺蟲劑可以通過(guò)大規(guī)模擴(kuò)繁微生物得到，一定程度上可解決殺蟲劑成本問(wèn)題，而適當(dāng)加入植物提取物可以增加藥效，在生產(chǎn)實(shí)踐中具有應(yīng)用前景。榆紫葉甲為中國(guó)北方發(fā)生普遍且危害較大的園林綠化有害昆蟲，對(duì)其進(jìn)行生物源殺蟲劑研究，旨在尋找城市綠化中對(duì)害蟲安全有效的防治思路和方法。

試驗(yàn)采用的大型真菌和植物提取物的安全性和殺蟲有效成分有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 安麗萍，許鐵軍，王威，等．榆紫葉甲不同發(fā)育歷期藥劑防治［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２００６（４）：３５－３８．

［２］ 趙福祥，劉玉琴，張坤，等．榆紫葉甲對(duì)榆樹的危害與防治［Ｊ］．中國(guó)西部科技，２０１０（２８）：４８－４９．

［３］ 鄧淑華．大慶地區(qū)榆紫葉甲的綜合防治方法［Ｊ］．中國(guó)新技術(shù)新產(chǎn)品，２０１０（５）：２２６．

［４］ 胡春祥，劉輝，張碩．７種藥劑對(duì)榆紫葉甲和黃褐天幕毛蟲的毒力測(cè)定及防治［Ｊ］．東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，２００９，３８（４）：１８－２０．

［５］ 王志明，鮑豐軍，單立忠，等．榆紫葉甲防治技術(shù)的初步研究［Ｊ］．林業(yè)勘察設(shè)計(jì)，２０１０（２）：６７－６９．

［６］ 江蘇新醫(yī)學(xué)院．中草藥大辭典（上）［Ｍ］．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，１９８６．

［７］ 毛寧，丁珊珊，余宗鐘．裸蓋菇Ｌ－００１菌株液體培養(yǎng)及其產(chǎn)毒素初探［Ｊ］．福建師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），２００９，２５（６）：７７－８１．

［８］ 郭亞紅．蒼耳子中揮發(fā)油的研究［Ｊ］．中國(guó)中藥雜志，１９９４，１９（４）：２３５－２４１．