恒河猴嬰猴離乳階段行為觀察及分析

李艷艷，陳麗雄，乞素冬，王俊斌，楊鳳梅，趙 遠，魯帥堯，禹文海，和占龍

(中國醫學科學院 北京協和醫學院 醫學生物學研究所，云南省重大傳染病疫苗研發重點實驗室，昆明 650118)

恒河猴屬非人靈長類動物，其在親緣關系上和人類非常接近，與人類的遺傳物質同源性高達75%～98.5%，由于其在遺傳學、生理學、解剖學和代謝等方面與人類高度相似，因而為人類心腦血管、神經系統、生殖系統、傳染性疾病等的研究提供了理想的模型動物。另外，非人靈長類動物是開展實驗心理研究的良好素材，通過對獼猴、猩猩等的情緒與個性特征研究，有助于理解人類情緒[1]。近年來國內外有關于大鼠、小鼠斷奶期間行為變化及抑郁癥方面的研究和報道較多[2-3]，對恒河猴，金絲猴行為學及情緒方面的研究也有相關報道[4-5]。本文通過對離乳后的人工飼養期嬰猴的行為進行觀察及分析，旨在了解嬰猴離乳期的行為特點，探討嬰猴早期斷奶后心理和行為的變化及可能的機制，指導和提高嬰猴斷奶期間的飼養管理水平，同時為研究人類嬰幼兒早期斷奶后心理和行為的變化，開展心理學、行為學等方面的評估實驗提供研究思路和模型。

1 材料和方法

1.1 研究對象

動物來源： 2012年出生的嬰猴共290只，其中雄性147只，雌性143只，實驗動物生產許可證號: SCXK(滇)2010-0006；實驗動物使用許可證號: SYXK(滇)2010-0009。在出生后4～5個月離乳，隨機分籠，每籠2只。一日五餐，自由飲水，另外添加水果及牛奶。溫度在18℃～25℃之間，濕度控制在40%～70%之間，滿足基本的動物福利要求。

1.2 研究方法

采用隨意取樣和時間記錄法[6]，于每天上午9:00～10:00，下午2:00～3:00，晚上8：00～9：00之間，由2名實驗人員分別觀察和記錄出現的全部行為，將記錄的結果進行分析和匯總，試驗期為6個月。

1.3 數據統計學分析

應用 SPSS 17.0統計軟件進行方差分析，P< 0.05為差異顯著，具有統計學意義。

2 結果

2.1 嬰猴的行為分類

在整個觀察期間共出現7種行為，分別為團抱、吸手指、吸同伴身體、踱步、吸生殖器、爬跨動作、吸腳趾。離乳后1個月，出現團抱(團抱個體占嬰猴總數的比例為17.24%)、吸手指(2.76%)、吸同伴身體(0.69%)3種行為。團抱及吸手指行為在第2、3個月均顯著增加(P< 0.05)，在隨后的4～6月增加較平穩，無顯著性差異；吸同伴身體的行為于2月顯著上升(P< 0.05)，3～6月雖有增加趨勢，但差異不顯著。第2個月，新增踱步(0.34%)、吸生殖器(1.37%)、爬跨動作(3.45%)行為。踱步、吸生殖器的行為于第3個月顯著上升(P< 0.05)，3～6月無顯著差異；爬跨行為隨時間的延長稍有增加，但無明顯變化。吸腳趾行為(0.69%)出現在離乳后第3個月，其比例未隨時間的變化而發生改變。至第6個月，各行為的比例分別為59.31%、11.03%、5.86%、1.38%、3.45%、4.14%、0.69%(圖1)。

注：同種行為各月間比較，標記中不含相同字母表示差異顯著(P < 0.05)。

2.2 團抱行為

Wada等[7]將團抱行為定義為非人靈長類動物在休息或睡眠過程中，個體間通過相互擁抱、擠坐及其它肢體接觸而形成組合單位的一類行為。本研究中隨機分組為雌-雄同籠(53籠)、雌-雌同籠(49籠)、雄-雄同籠(43籠)3種情況，整個觀察階段出現雌-雄團抱、雌-雌團抱、雄-雄團抱3種模式，雄-雄同籠的嬰猴團抱行為發生率顯著低于另外兩種模式，雌-雌同籠團抱發生率與雌-雄同籠比較，1月差異不顯著，2～6顯著高于雌-雄同籠(P< 0.05)。雌-雌團抱第1個月發生率為19.44%，且2、3月顯著升高(P< 0.05)，3～6無顯著變化，第6個月發生率為83.33%；離乳后1個月，雌-雄團抱發生率為18.75%，于2、3月顯著增加(P< 0.05)，3～6月呈上升趨勢，但差異不顯著，6月增加至53.75%；雄-雄團抱發生率在第2月顯著增加，且3～6月顯著高于1、2月(P< 0.05)，3～6月變化不顯著(圖2)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.3 吸手指行為

雌性，雄性嬰猴均于離乳第1個月出現吸手指行為，其發生率分別為2.80%，2.72%，差異不顯著；雌、雄性嬰猴該行為發生率均隨時間的變化而增加，2月雌性嬰猴顯著低于雄性，3～6月雌性嬰猴均顯著高于雄性(P< 0.05)。雌性嬰猴發生率于2、3月顯著增加(P< 0.05)，3～6月有增加趨勢，但無顯著差異，第6個月雌性嬰猴的發生率為13.29 %；第2、3個月雄性嬰猴吸手指行為的發生率較1月顯著增加(P< 0.05)，3～6月改變不明顯(圖3)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.4 吸同伴身體部位的行為

吸同伴身體部位的行為包括吸食同伴的耳朵、頰囊、手臂、肚皮，生殖器等。離乳后第1個月即觀察到該種行為，且1至6個月雌性嬰猴出現該行為的比率均顯著高于雄性(P< 0.05)。雌性該行為發生率在1月(1.41%)至6月(9.09%)逐月顯著增加(P< 0.05)；雄性嬰猴于第2個月發生該行為(2.04%)，隨時間改變發生率稍有上升，無顯著差異(圖4)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.5 爬跨行為

在離乳后第2個月出現爬跨行為并伴有臀部沖刺動作，分為雌-雄異性爬跨，雄-雄同性爬跨兩種情況，異性爬跨發生率(10.03%)顯著高于同性爬跨(6.79%)(P< 0.05)；在3月同性爬跨發生率顯著增加至13.79%，3～6月的觀察階段各發生率未發生明顯改變，同性爬跨顯著高于異性爬跨(P< 0.05)(圖5)。

2.6 踱步行為

雄性、雌性嬰猴分別于第2、3個月出現踱步行為，整個觀察階段雄性嬰猴的發生率均顯著高于雌性嬰猴(P< 0.05)，如圖6所示。雄性嬰猴該行為的發生率于3月顯著上升至2.04%，且顯著高于雌性嬰猴的發生率(P< 0.05)。

2.7 吸腳趾行為

雌性、雄性嬰猴均在第3個月出現吸腳趾行為，其發生率(0.70%，0.68%)無顯著性差異，且未隨時間的延長而發生明顯改變(圖7)。

3 討論

行為對一個物種個體的生存、交流、建立社會關系以及維持種群發展都具有重要的作用[8]。嬰幼兒階段是個體發育的最初階段，這一時期，嬰幼兒的行為經歷了從無到有、從簡單到復雜的過程，神經系統和心理也得到不斷的發育。研究嬰幼兒行為發生對研究成年個體行為和群體行為有重要意義[9]。母嬰分離是人 類生命早期應激事件，發生于生命早期的負性應激事件與個體成年期抑郁癥的發生密切相關，國內外大多研究認為母嬰分離能夠對新生兒的神經系統發育產生重大影響[10]，動物研究也證實，早期不良應激如母愛剝奪可誘發個體焦慮，精神分裂，抑郁樣行為[11]等。本研究中，對離乳后的嬰猴行為進行為期6個月的觀察記錄，觀察到團抱、踱步、吸腳趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身體，爬跨等7種行為。

團抱行為在非人靈長類中廣泛存在，在環境和社會因素的影響下，會呈現出多種模式。經觀察發現，離乳后第1月即出現團抱行為，在7種行為中發生率最高，可能是嬰猴通過團抱來緩解因對新環境存在恐懼而產生脅迫感。嬰猴團抱時會用手輕輕地拍同伴的背部，并伴有上半身前后搖擺，類似于人類安撫情緒的擁抱。推測，團抱行為除了具有保持體溫、預防天敵等作用外，可能也是一種傳遞感情的方式。馮曉麗[12]等將這種下肢不動，上半身前后運動的行為定義為刻板行為。前3個月，出現團抱行為的嬰猴個體顯著增加，4～6月趨于平穩。雌性同籠的個體團抱行為發生率顯著高于異性同籠，異性同籠顯著高于雄性同籠。提示恒河猴嬰猴發生團抱行為可能受到性別的影響，本結果與齊曉光[13]的報道一致。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

吸腳趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身體可歸類為吮吸行為。嬰幼兒階段吮吸需求非常強烈。當吮吸需求得不到滿足，家庭破裂等造成的心理緊張，抑郁癥等都會引起嬰幼兒異常的吮吸行為。本文中嬰猴出現了多種吮吸行為，這可能與生活環境改變，同時母愛被剝奪兩種因素對嬰猴的情緒及心理造成嚴重的沖擊，嬰猴以吮吸這種異常的行為作為心理防衛機制，來緩解內心的焦慮。每種行為在整個觀察階段都呈逐漸增加的趨勢，雌性嬰猴吸同伴身體及吸手指的行為顯著高于雄性嬰猴，得出雌性嬰猴更易發生吮吸行為，可能是雌性更易受到負性應激的影響。

有報道稱，川金絲猴嬰猴在4月齡時就出現了爬跨行為。本文中發現恒河猴嬰猴在離乳后第2個月，即約7月齡時出現爬跨行為，表現為雌雄異性、雄雄同性爬跨。雄性嬰猴采取雙手放在被爬跨者的腰部，雙腳扣住被爬跨者的腳踝的姿勢，伴有臀部沖刺動作，這與任寶平的觀察結果相一致[14]。這種發生在嬰幼年動物之間的爬跨行為，是無目的、不具有繁殖意義的行為。

離乳后第2個月觀察到部分雄性嬰猴來回沿著相同的路線踱步，無目的的不斷重復，雄性嬰猴較雌性嬰猴更易發生踱步。可能與離乳對嬰猴的情緒造成負面影響有關[15-16]。

母愛剝奪可導致恒河猴行為異常[17]，主要表現為自傷行為，刻板行為等抑郁樣行為。刻板行為包括來回踱步，吮吸手指或腳趾，緊緊抓住自己身體的某一部位，身體來回搖晃等[12]。這與本研究觀察到的結果基本一致。出現此種行為可能與以下幾種機制有關。Kraemer[18]發現，幼兒時期的獼猴在不良生長環境飼養，會改變其內分泌，從而影響了其成年后的性格和行為。大量研究表明生命早期的母嬰分離可引起幼兒出現抑郁樣行為，而抑郁癥神經內分泌的改變表現為下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸)功能亢進，從而改變垂體促腎上腺皮質激素和血漿皮質醇的合成與釋放，引起一系列的神經生化改變，同時對大腦邊緣系統造成器質性損害，尤其是損害海馬結構，增加行為的異常[19]。其次，生命早期豐富環境能促進腦發育與腦功能，對神經和內分泌系統產生持久的影響，而早期應激將影響關鍵時期腦發育，持續改變大腦結構和內分泌等指標，限制海馬神經的發生。腦源性神經營養因子(BDNF) 減少，5-羥色胺(5-HT)及5-羥色胺受體在大腦海馬中的表達減少，引起海馬抑制HPA軸活性的功能失效[20]，使HPA軸活性長期改變是導致經歷母嬰分離動物出現行為異常的主要原因。本研究中發現雌性嬰猴更易發生刻板行為，這與臨床報道的女性更容易抑郁相符。可能是因為在負性應激情況下雌激素影響下丘腦-垂體-腎上腺軸的平衡，使女性HPA軸活性增強，腎上腺過度增生，腎上腺皮質激素濃度上升[21]。另有研究發現血小板內5-羥色胺濃度有性別差異，女性低于男性，這是否是引起是雌性嬰猴更易發生刻板行為的另一個原因，還需進一步的研究證實[22]。

動物行為及行為的機制是了解生物學組成部分、生理學、組織形態學、生態學、遺傳學和進化論等學科所必不可少的知識。通過對人工飼育恒河猴嬰猴離乳階段的行為觀察和分析，初步獲得和了解其一些常見的行為特點及規律。報道稱生命早期應激可能影響成年后抑郁癥的發生，關于嬰猴成年后其行為是否會發生變化還有待進一步研究。本研究初步探討了嬰猴離乳后出現異常行為的可能機制，不僅可以指導和提高嬰猴斷奶期間的飼養管理技術，同時也為研究人類嬰幼兒早期斷奶后心理和行為的變化，開展心理學、行為學等方面的評估實驗提供較好的研究思路和模型。

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