MicroRNA在肝膽細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)與相關(guān)性的研究進(jìn)展

張春平，李 立，陳亦明，李 旺，王海雷 (.昆明醫(yī)科大學(xué)，云南 昆明 65003;.昆明市第一人民醫(yī)院，云南 昆明65000)

近年來，miRNA以其特有的基因、生物學(xué)特性及潛在的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值，在治療各項(xiàng)難治性疾病中越來越引人注意，研究miRNA在膽管上皮細(xì)胞再生修復(fù)中的調(diào)控作用機(jī)制，從而解決膽道并發(fā)癥——“阿格硫斯之踵”醫(yī)學(xué)難題。1993年，LEE等在秀麗新小桿線蟲發(fā)育調(diào)控研究中發(fā)現(xiàn)了第一個miRNA［1］，7年后Pasquinelli在對線蟲發(fā)育調(diào)控中發(fā)現(xiàn)了let－7［2］。目前已有500余個miRNA在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)。miRNA在肝膽疾病中對細(xì)胞凋亡、增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞分化發(fā)育均發(fā)揮著調(diào)控作用，通過檢測膽道疾病組織中miRNA的表達(dá)水平情況，了解其調(diào)控的靶基因，進(jìn)而對膽道疾病進(jìn)行基因水平等進(jìn)一步治療。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 miRNA生成與作用機(jī)制

miRNA是一類真核生物內(nèi)源性的小分子單鏈RNA，可對基因轉(zhuǎn)錄后的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。miRNA合成產(chǎn)生，首先是在miRNA基因在RNA聚合酶Ⅱ的作用下轉(zhuǎn)錄成為一個具有莖－環(huán)結(jié)構(gòu)的miRNA復(fù)合體(pri－miRNA)，pri－miRNA通常有幾百上千個核苷酸構(gòu)成，含有帽子和polyA尾巴結(jié)構(gòu)，二級結(jié)構(gòu)呈特殊的發(fā)夾莖－環(huán)結(jié)構(gòu)［3］。然后miRNA復(fù)合體(primiRNA)再被RNA聚合酶III－Drosa－DGCR8復(fù)合體切割加工成為miRNA前體(pre－miRNA)，但是莖－環(huán)結(jié)構(gòu)仍被保留，pre－miRNA大小未60－75堿基。pre－miRNA被核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白exportin5轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞核進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，具有莖－環(huán)結(jié)構(gòu)pre－miRNA在Dicer酶、ATP和解旋酶的共同作用下，最終分裂成為21－25bp的成熟miRNA。成熟的miRNA通過與一種類似RISC的核糖蛋白結(jié)從而合成miRNP，識別靶基因從而發(fā)揮生物功能［4］。研究證明miRNA可調(diào)控基因表達(dá)的機(jī)制主要有兩個方面，一方面是當(dāng)……