不同生長調節劑對康乃馨組織培養的影響

張婷　代容春

摘 要 [目的]利用3種植物生長調節劑6-BA、NAA、2，4-D探究其對植物組織培養的促進作用。[方法]配置不同濃度不同功能的培養基，利用無菌技術接種康乃馨外植體并定期觀察植物組織生長情況。[結果]6-BA與NAA對康乃馨叢生芽的生長具有顯著促進作用。[結論]植物生長調節劑對康乃馨植物組織培養的生長具有不可或缺的重要作用，可以在生產實踐中運用不同植物生長調節劑配比以提高康乃馨花卉產率。

關鍵詞 康乃馨；組織培養；愈傷組織；生長調節劑

中圖分類號：S682.19 文獻標志碼：A 文章編號：

康乃馨別名麝香石竹，香石竹（Dianthuscaryophyllus L），石竹科，多年生草本植物[1]。分為露地栽培種和溫室栽培種2大類，為世界5大切花之一。溫室栽培可四季開花，切花保存時間長，花直徑5～10 cm，花色鮮艷，有白、紅、桃紅、桔黃、紫及雜色[2]。花瓣如絹，鑲邊疊褶，勻稱地包卷在筒狀的花萼之內，香味宜人，在世界各地被人們廣泛栽培。但目前，用常規扦插方法繁殖，繁殖系數低，速度慢，難以滿足市場需求。同時，因為花長期經過無性繁殖，病毒侵染嚴重，造成切花的商品品質下降。近年來，人們逐漸開始重視康乃馨的快速繁殖，并有多篇報道現世。為解決康乃馨生產上的問題，采用植物生長調節劑誘導植物組織培養康乃馨優良新品種。最常使用的生長調節劑是生長素和細胞分裂素，這2類生長調節劑在植物生長過程中起到重要作用。生長素包括：1-萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）等；細胞分裂素包括6-芐基腺嘌呤（6-BA）及玉米素等。本次實驗使用NAA、6-BA、2，4-D 3種植物生長調節劑對康乃馨進行組織培養，以期為康乃馨組織培養生產提供理論指導。

1 材料與方法

1.1 材料

生長旺盛無病害的康乃馨小型盆栽。

1.2 方法

1.2.1 培養基配制方法

1.2.1.1 植物組織培養培養基的配制

按照比例配置好培養基原液，并將原液均分，往液體中滴加植物生長調節劑，本次實驗共配制3種不同濃度的叢生芽誘導培養基3種，分別為：①6-BA 2.0；②6-BA 2.0+NAA 0.5；③6-BA 2.0+NAA 1.0；。均勻攪拌后將各種培養基分裝至培養瓶，并貼上對應標簽進行滅菌。

1.2.2 無菌操作

1.2.2.1 操作準備

將培養基、無菌水、及各種接種用具放入超凈工作臺，打開紫外燈，照射消毒20～30 min后，打開無菌風開關，關紫外燈，打開照明日光燈。清洗雙手，用棉花吸取75%酒精擦手，自內向外擦拭超凈臺，點燃酒精燈。

1.2.2.2 外植體消毒

選取康乃馨健康新鮮莖段或葉片為外殖體，用剪刀切取所需組織，將植物組織在70%～75%酒精中浸泡消毒30 s，之后移入0.1%升汞溶液浸泡10 min，在超凈臺內用無菌水沖洗5～6次后即完成外植體消毒過程。

1.2.2.3 外植體的接種

叢生芽誘導接種：在無菌超凈臺內將消毒好的康乃馨接種材料在培養皿內用無菌濾紙吸去多余水份，借助剪刀剪取長度約1 cm左右帶有莖節莖段，用鑷子將莖段一半斜插入培養基中，蓋好瓶蓋。以上無菌操作均需在酒精燈火焰旁進行。

1.2.3 培養及記錄

將接種后培養瓶放入恒溫光照箱中培養，溫度（28±1）℃ 、光強2 000～2 500 Ix、每天光照14 h，愈傷組織需遮光培養。每周固定時間取出培養瓶查看植物組織生長情況清除染菌培養瓶并記錄數據并制成表格。

2 結果與分析

2.1 6-BA和NAA質量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導的影響

從生長狀態來看，單獨添加6-BA時，叢生芽生長狀況不佳，芽小而疏松。當培養基中添加的6-BA和NAA質量濃度配比為2：1或4：1時，叢生芽生長狀況良好，芽強壯而密集，且接種莖段成活率較高，生長旺盛。從出芽率來看，單獨添加6-BA時出芽率為75%，出芽率介于添加6-BA和NAA質量濃度配比為4的培養基與6-BA和NAA質量濃度配比為2的培養基之間；添加6-BA和NAA質量濃度配比為4的培養基出芽率最高，為90%；添加6-BA和NAA質量濃度配比為4的培養基出芽率最低，約為57.1%。因此本實驗證明，合適的6-BA和NAA質量濃度配比有助于康乃馨叢生芽的誘導，但添加NAA的培養基不一定有助于康乃馨叢生芽的誘導。

2.2 分析

本次實驗結果與孫駿威等和沈寧東等的實驗結果有較大出入。他們實驗結果表明，6-BA和NAA質量濃度配比為2：1和4：1都有助于康乃馨叢生芽的誘導，從生長狀況與出芽率方面考慮，2種實驗方案都相差不大。經反思，認為所得結果與他人不同的原因可能為實驗材料的限制，如培養瓶數量少要平均分配給11種不同濃度溶液配制叢生芽誘導培養基、生根培養基、愈傷組織誘導培養基和分化培養基，且接種中部分培養基染菌，故培養數量不夠大，且只配置了3種不同生長調節劑質量濃度配比的叢生芽誘導培養基，造成結果不夠準確，下次實驗時需要改進。

3 討論

本實驗分別研究了6-BA和NAA質量濃度配比、NAA質量濃度搭配、6-BA和2，4-D質量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導的影響。從結果得知，6-BA和NAA質量濃度配比對康乃馨叢生芽誘導具有明顯促進效果，且6-BA和NAA質量濃度配比為4：1的時候具有最佳出芽效果，出芽率約為90%；但因為實驗時間以及實驗環境限制等問題，對康乃馨出芽率造成了較大的影響，這也提醒在日常的生產生活中，康乃馨需要大量時間以及適宜的環境進行組織培養，并且培養量較大時出芽率應會稍微提高，偏差較小。本次實驗成功證明了植物生長調節劑對康乃馨植物組織培養具有顯著促進作用，2種植物生長調節劑共同作用能有效提高叢生芽出芽率，可運用在生產變異新種康乃馨植株中，本實驗也將繼續培養觀察康乃馨，能為今后大批利用植物組織培養技術培養觀賞康乃馨提供理論及技術上的支持。

參考文獻

[1]王蓮英，朱秀珍，虞佩珍.中國名貴花卉鑒賞與栽培[M].合肥：安徽科學技術出版社，1997：77-79.

[2]聶慶娟，王進茂，梁海勇，等.康乃馨的繁殖[J].河北林果研究，1997，（1）：50-52.

（責任編輯：趙中正）