水產品中泰樂菌素殘留量的液質聯用檢測方法

秦振發

摘 要 通過水產品中泰樂菌素殘留量檢測方法入手，探索水產品中泰樂菌素殘留量的藥物殘留液相色譜串聯質譜的檢測技術。

關鍵詞 水產品；泰樂菌素；殘留量；液相色譜串聯質譜

中圖分類號：TS254.7 文獻標志碼：A 文章編號：

水產品藥物殘留對人們健康的危害已經成為當今食品安全的重要因素之一。由此，主要論述水產品中泰樂菌素殘留量的檢測方法，泰樂菌素屬于16元大環內酯類抗生素，近年來，泰樂菌素被廣泛應用于水產養殖業，但是，泰樂菌素等大環內酯類抗生素對人體有著潛在危害性。

1 試驗設計及材料

1.1 泰樂菌素的作用

泰樂菌素是一種促進生物生長的化學藥品，呈白色或暗黃色粉末狀，易溶于水，常被用于治療藥物使用。另外，它有很好的吸收和排泄作用，能快速促進各類微生物的生長。現在，有很多水產品養殖戶用泰樂菌素來防治魚病、促進魚體生長。

泰樂菌素用于水產品中，的確有很好的防病害及促生長作用，但如果在水產品中大量使用泰樂菌素，會有大量的藥物殘留在水產品中，對人體有一定的危害。近年來，食品安全問題突出，對水產品中泰樂菌素殘留量檢測方法的研究也在不斷加強。

1.2 使用的主要儀器設備

色譜柱：Hypersil GOLD 100mm*2.1mm粒徑3um；液相色譜儀：Themo scientific 1250高壓液相色譜。質譜儀：Themo scientific TSQ Quantum Access MAX

2 水產品中泰樂菌素的預處理

預處理的具體方式是：稱取5 g水產品樣品放在50 mL的塑料離心管里，向離心管中加入20 mL的酸化乙腈；震蕩混勻，再用超聲波超聲提取5 min；4 000轉/min離心5 min，取上清液轉移至另一個離心管中，把樣品殘渣再加入15 mL的酸化乙腈重復提取1次，合并上清液。

將上述提取液過預先用5 mL乙腈活化的中性氧化鋁柱，收集過柱后的提取液，提取液過柱后再用5 mL乙腈淋洗柱體，合并于梨形瓶中，加入20 mL異丙醇。在40℃水浴中旋轉蒸發至干，加入1 mL流動相，再加入2 mL的乙腈飽和正己烷，震蕩洗脫，再把洗脫液轉移到10 mL的離心管中，漩渦震蕩30 s，4 000 r/min離心5 min，取下層液過0.22 μm濾膜，供上機測定用。

3 液相色譜質譜聯用檢測泰樂菌素殘留量

3.1 提取劑及提取方式

為提高水產品中泰樂菌素的藥物殘留提出效果，這里采用酸化乙腈、乙腈與甲醇進行實驗研究，實驗具體方法是，把泰樂菌素添加到不含泰樂菌素的樣品中，在實驗過程中，通過外標回收率大小來評價提取劑的提取效率。經過試驗發現酸化乙腈回收率均大于80%，所以，最終確定酸化乙腈為次檢測方法的最佳提取劑。

3.2 內標物的確定

液相色譜質譜聯用檢測法利用內標物對泰樂菌素做相關的定量判斷，以便達到更加準確的檢測效果。因為羅紅霉素具有與泰樂菌素相近的性質，所以，在此次檢測實驗中主要采用羅紅霉素為內標物，這樣會使泰樂菌素在水產品中的殘留量測量更加準確。

3.3 色譜分離條件的研究

經過對色譜柱和流動相優化設計的試驗研究，選用合適的色柱分離羅紅霉素與泰樂菌素樣品，最佳的色譜分析條件為：色譜柱選用Hypersil GOLD 100 mm*2.1 mm粒徑

3 um；流動相選用乙腈與乙酸銨（5 mmol/L加0.1%甲酸）梯度洗脫，流速為0.20 mL/min，柱溫在35℃。

3.4 質譜條件的優化

在質譜中對質譜條件進行優化，確定質譜條件為：鞘氣30 psi，輔助氣壓力為5 psi、正離子噴霧電壓為3 500 V、碰撞氣壓為1.5 mTorr等。然后采用多反應檢測模式，然后選擇好定性與定向離子。

3.5 標準曲線和線性范圍

用50%乙腈、水配制成質量濃度分別為1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0ng/mL、100.0 ng/mL、250.0 ng/mL、 500.0ng/mL泰樂菌素標準系列，此標準系列中內標濃度為50 ng/mL。以峰面積為縱坐標，以泰樂菌素的質量濃度為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明泰樂菌素在1.0～500 ng/mL范圍內呈良好的線性關系，相關系數大于0.997，回歸方程為Y=0.574 214x+0.0 158 579。

3.6 檢出限和限量值

此方法檢出限為0.5 μg/kg。加標水平下回收率均大于70%，相對標準偏差小于15%，此定量限的精密度和準確度均滿足藥殘檢測的要求。

3.7 不同濃度的回收率

在鯽、對蝦和草魚3種樣品中的加標試驗中，回收率在78.40%～110.20%的范圍，相對標準偏差為1.56%～8.78%的范圍，準確度能滿足有關檢測標準

要求。

液相色譜條件的開發需要按照專屬性高、準確度高和低成本為目標，盡量在最短的時間內得到最佳的峰型、與合適的分離度，是檢測效果達到最佳水平。目前，該研究方法的檢出限、準確性及精密度都滿足各國對水產品中藥物殘留檢測的技術要求。

4 結語

總之，用液相色譜質譜聯用檢測水產品中泰樂菌素殘留量的檢測方法，是目前較為常見的檢測方式之一。它操作簡單、靈敏度高、應用性好，是水產品中大環內酯類抗生素殘留量檢測比較好的方法。

（責任編輯：劉昀）