老年抑郁模型大鼠神經可塑性變化及溫膽湯的干預機制

張 彤

(南陽醫(yī)學高等專科學校,河南 南陽 473061)

抑郁癥是以“三低一少”，即情感低落、思維遲緩、言語動作減少、遲緩為主要癥狀的綜合征候群。近年來由于社會各方面壓力如空巢家庭、提早退休等因素的影響，其發(fā)病年齡多見于老年患者〔1〕。抑郁癥患者邊緣系統(tǒng)部分腦區(qū)出現包括結構改變、功能受損等神經可塑性變化，而已有的抗抑郁藥如氟西汀的抗抑郁效應可通過增加海馬新生神經元的存活和數量、提高神經再生而實現〔2〕。本研究探討老年抑郁癥大鼠神經可塑性變化以及溫膽湯對其影響效果。

1 材料與方法

1.1動物及分組 體質量160～220 g的清潔級SD雄性大鼠〔動物合格證號：SCXK(津)2010-0002〕90只，20月齡，由南陽市實驗動物中心提供。將大鼠隨機分成空白組、模型組、中藥組，每組30只。每日早晨8： 00開始，中藥組予胃飼溫膽湯1.8 mg/kg，模型組、空白組均胃飼生理鹽水2 ml/kg，連續(xù)灌胃21 d。

1.2實驗儀器及試劑

1.2.1實驗儀器 H-7650型透射電子顯微鏡(日本日立生產)；Q550CW圖形信號采集分析系統(tǒng)(德國Leica公司生產)。Image-Pro Plus多功能真彩色細胞圖像分析管理系統(tǒng)(美國Media Cybernetics 公司生產)。

1.2.2實驗試劑 BrdU、抗BrdU抗體、多聚賴氨酸均購自sigma公司；一抗：兔Anti-NeuN/Cy3(貨號：bs-1613R-Cy3)、鼠Anti-BrdU/FITC 熒光素(貨號：bs-0917M-FITC)均購自北京博奧森公司。2.5%戊二醛溶液、鋨酸、丙酮、二甲砷酸鈉緩沖液均由中國中醫(yī)研究院中藥研究所提供。

1.3孤養(yǎng)結合慢性應激抑郁模型 參照文獻〔3〕中的相關方法進行。

1.4檢測指標與處理方法 海馬區(qū)突觸相關指標檢測：采用常規(guī)透射電鏡進行標本制作，利用Q550CW圖形信號采集分析系統(tǒng)對突觸照片進行分析，測量活性區(qū)長度、突觸前后膜致密物質的厚度及突觸間隙寬度。熒光雙標細胞表達變化：取BrdU標記大鼠，根據操作步驟依次斷頭、取腦組織，依據試劑盒說明依次進行，而后用多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)進行數據分析，計數NeuN/BrdU、β-tubulinⅢ/BrdU陽性細胞。

1.5統(tǒng)計學分析 采用SPSS12.0軟件行t檢驗。

2 結 果

實驗第16天，模型組死亡1只大鼠，經解剖未發(fā)現，死亡原因不明。

2.1各組大鼠海馬突觸結構的體視學變化 21 d，各組出現較大差異，與空白組比較，模型組的突觸活性區(qū)長度、突觸后致密物質厚度均明顯減少(P<0.01)，突觸間隙寬度增加(P<0.01)；與模型組比較，中藥組突觸活性區(qū)長度、突觸后致密物質厚度均增加明顯，突觸間隙寬度明顯減少(P<0.01或P<0.05)。見表1～表3。

2.3各組大鼠海馬CA3區(qū)熒光雙標細胞表達變化 21 d時，各組之間出現較大差異：與空白組比較，模型組的NeuN/BrdU、β-tubulinⅢ/BrdU雙標陽性細胞數均明顯減少(P<0.01)；與模型組比較，中藥組增加明顯(P<0.05)。見表4，表5。

表1 抑郁形成不同時間段各組大鼠突觸活性區(qū)長度比較±s，nm)

表2 各組大鼠在抑郁形成不同時間段突觸后致密物質厚度比較±s，nm)

表3 各組大鼠在抑郁形成不同時間段突觸間隙寬度比較±s，nm)

表4 各組大鼠抑郁形成不同時間段NeuN/BrdU雙標陽性細胞數比較±s，n/mm2)

表5 各組大鼠抑郁形成不同時間段β-tubulinⅢ/BrdU雙標陽性細胞數比較±s，%)

3 討 論

近年來經調查發(fā)現25%的老年人有程度不同的精神障礙，其中65歲以上老年人情緒障礙發(fā)病率約占12%～25%〔4〕。可見，探索老年抑郁癥的發(fā)病機制，進而尋找有效治療藥物，是現今需要解決的問題。

海馬CA3區(qū)上的錐體神經元對應激和腎上腺糖皮質激素非常敏感〔3〕。作為與情緒、認知、行為密切相關的重要腦區(qū)，慢性應激均引起海馬CA3區(qū)神經元萎縮〔5〕，而突觸結構是保證神經元獲得、傳遞、加工和貯存信息，并使上述得以順利進行的重要基礎，這與突觸是神經元之間結構和功能的接觸點密切相關〔6〕。大多學者認為神經傳導和學習記憶過程的影響因素為：突觸活性帶較長，可增加突觸傳導過程中遞質數量，以及囊泡的接觸面積，進而提高神經信息傳遞和學習記憶的有效性〔2〕。本研究結果提示，老年抑郁癥患者中存在海馬神經突觸結構損傷、神經元再生減少等可塑性變化，溫膽湯可通過逆轉上述變化而發(fā)揮其抗抑郁效應。

4 參考文獻

1陳傳鋒，李湘蘭，胡珍玉.老年抑郁個體注意偏向的發(fā)生階段〔J〕. 心理科學， 2011;31(3)： 738-43.

2張麗萍，武 麗，張 曼. 解郁1號對抑郁模型大鼠海馬神經元細胞凋亡的影響〔J〕.遼寧中醫(yī)，2009;36(10)：1805-6.

3郭曉云.江開達慢性輕度應激抑郁癥動物模型研究進展〔J〕.國際精神病學雜志，2007;34(6)：216-7.

4廖 紅.老年抑郁的特征及對生活質量的影響〔J〕.中國老年保健醫(yī)學,2010;27(5)：33-5.

5趙久紅，崔 燕，唐源遠，等. 缺氧對新生大鼠海馬神經干細胞增殖和分化的影響〔J〕. 解剖科學進展，2009;15(2)：168-71.

6肖 鵬，何勝昔，許世彤，等.海馬CA3區(qū)突觸結構在記憶中的變化〔J〕.中國行為醫(yī)學科學，2005;14(6)： 26-8.