針刺對慢性前列腺炎大鼠組織學(xué)及血清中TNF-α和IL-6的影響

葉 剛 池建平 李英倫

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，四川 雅安 625014)

慢性前列腺炎(CP)以其治愈率低、復(fù)發(fā)率高而成為非常棘手的疾病〔1～3〕。目前針對CP多以抗生素治療為主〔4,5〕，長時(shí)間、大劑量的抗生素治療會對機(jī)體產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用，并容易誘導(dǎo)耐藥菌株的產(chǎn)生，且在抗生素治療后6～12個(gè)月CP復(fù)發(fā)率較高〔6〕。中醫(yī)治療前列腺疾病的報(bào)道越來越多，其中針刺以其作用機(jī)制獨(dú)特，沒有或極少有毒副作用，并對慢性疾病有其獨(dú)特療效而越來越受到重視。目前已有160余個(gè)國家和地區(qū)使用針刺療法，接受針刺治療的人數(shù)也不斷增加〔7～11〕。本實(shí)驗(yàn)以中醫(yī)針刺理論為指導(dǎo)，旨在探討針刺對CP大鼠血清中腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細(xì)胞介素(IL)-6的影響，為針刺治療CP提供理論參考。

1 材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物與試劑 健康雄性Wistar大鼠75只，體重(300±20)g，購自四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。大鼠購進(jìn)后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察1 w無異常后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。大鼠IL-6 ELISA試劑盒96T、大鼠TNF-α ELISA 試劑盒96T，均購自成都欣博盛生物科技有限公司。

1.2大鼠病理造模 將禁食12 h的大鼠用10%水合氯醛(300 mg/kg)腹腔麻醉后，用手術(shù)膠布將其固定在手術(shù)臺上，4%硫化鈉溶液脫毛、備皮、消毒，在無菌條件下，利用微創(chuàng)技術(shù)在大鼠下腹正中切開一個(gè)1.0～1.5 cm左右的切口，打開腹壁和腹膜，直達(dá)腹腔，暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，模型組于前列腺左、右背側(cè)葉包膜下分別注入25 %消痔靈注射液各0.2 ml，假手術(shù)組則注入生理鹽水0.2 ml。0.5%碘伏棉球輕輕按壓針眼后，縫合腹壁肌肉、皮膚，碘酊消毒創(chuàng)口，放回鼠籠。術(shù)后注意大鼠的保暖，12 h后可以自由飲水，2次/d碘伏消毒創(chuàng)口，防止感染。

1.3實(shí)驗(yàn)處理 空白對照組于實(shí)驗(yàn)開始后與針刺組以同樣的時(shí)間和方法固定，但不做任何治療；模型組在造模后的其他操作同對照組一樣；藥物組每天灌胃“前列通”藥液2 ml；針刺組以0.28 mm×25 mm毫針按順序針刺關(guān)元→腎腧→三陰交→脾俞→太沖，1次/d，10 d為1個(gè)療程；針刺藥物組以0.28 mm×25 mm毫針按順序針刺關(guān)元→腎腧→三陰交→脾俞→太沖，1 d/次，10 d為1個(gè)療程，同時(shí)每只大鼠每天灌胃“前列通”藥液2 ml。

1.4組織切片觀察 各組分別于3個(gè)療程結(jié)束后對試驗(yàn)大鼠處死，取前列腺組織進(jìn)行切片觀察。

1.5TNF-α和IL-6測定 各組分別于3個(gè)療程結(jié)束后對試驗(yàn)大鼠采血，分離血清進(jìn)行TNF-α和IL-6的測定。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS13.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1蘇木素-伊紅(HE)染色光鏡觀察結(jié)果 3個(gè)療程結(jié)束后，正常組大鼠前列腺組織經(jīng) HE染色后，光鏡下可見腺上皮細(xì)胞多為單層柱狀或立方狀，呈柱狀排列，腺腔形態(tài)不一，腺組織呈較規(guī)則的圓形或橢圓形，無炎性細(xì)胞浸潤或水腫；模型組可見大量成纖維細(xì)胞及炎性細(xì)胞；藥物組前列腺組織趨于正常，部分腺上皮細(xì)胞仍可見增生，但僅見少量炎性細(xì)胞，無明顯水腫；針刺組偶見上皮細(xì)胞增生，偶見炎性細(xì)胞，腺上皮細(xì)胞排列整齊，腺泡結(jié)構(gòu)完整；針刺組藥物腺上皮細(xì)胞排列整齊，腺泡結(jié)構(gòu)完整，偶見炎性細(xì)胞，間質(zhì)無明顯水腫、增生。見圖1。

2.2TNF-α和IL-6檢測結(jié)果 模型組IL-6、TNF-α水平均明顯高于正常組(均P<0.01)；藥物組、針刺組、針刺藥物組IL-6、TNF-α水平均明顯低于模型組(均P<0.01)；針刺藥物組IL-6水平明顯低于藥物組(P<0.01)。針刺組與針刺藥物組TNF-α水平明顯低于藥物組(P<0.01)。 見表1。

正常組

模型組

藥物組

針刺組

針刺藥物組

表1 3個(gè)療程后不同組大鼠TNF-α和IL-6水平比較

3 討 論

CP的病因?qū)W研究顯示，免疫現(xiàn)象在CP的發(fā)病過程中扮演著重要角色，而這一過程均是以細(xì)胞因子為介導(dǎo)發(fā)生，它們通過自分泌或旁分泌方式完成細(xì)胞自身的功能，參加復(fù)雜的細(xì)胞-細(xì)胞調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)。機(jī)體在病原或其他抗原刺激下，巨噬細(xì)胞被激活，一方面巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的促炎性細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-6等，另一方面巨噬細(xì)胞將抗原呈遞給T細(xì)胞，激活T細(xì)胞，產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，進(jìn)一步使免疫反應(yīng)擴(kuò)大。TNF-α、IL-6等作為促炎因子，可以促進(jìn)趨化因子和環(huán)氧合酶(COX)-2以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)和細(xì)胞間黏附分子(ICAM)的表達(dá)，而這些表達(dá)產(chǎn)物通過各自的機(jī)制對機(jī)體組織造成損傷并導(dǎo)致疼痛，從而產(chǎn)生前列腺炎的各種臨床癥狀。

目前對于針刺免疫的調(diào)節(jié)國內(nèi)研究較多。劉婷婷等〔12〕通過對造模為非細(xì)菌性前列腺炎的大鼠進(jìn)行電針和普通針刺治療的研究，發(fā)現(xiàn)電針和普通針刺治療均能顯著升高大鼠血清中IL-2水平，降低TNF-α水平。王鳳艷等〔13〕將84例診斷為CP的患者隨機(jī)分為治療組(電針+藥物)和對照組(藥物治療)進(jìn)行臨床研究，同時(shí)對治療前后的前列腺液內(nèi)白細(xì)胞(EPS-WBC)及前列腺液內(nèi)的卵磷脂(EPS-SPI)進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，治療組的總有效率為93.2%，明顯優(yōu)于對照組的82.5%，差異非常顯著；治療組及對照組均能引起EPS-WBC減少和EPS-SPL增加，但兩組比較無顯著意義。朱愛茹等〔14〕研究發(fā)現(xiàn)針刺中極、陰陵泉等穴能顯著提高CP患者前列腺液中IL-1β的含量。

綜上，單用針刺方法對CP有一定治療作用，而針刺聯(lián)合藥物治療，效果優(yōu)于單用針刺和單用藥物治療。有關(guān)針刺對CP治療作用機(jī)制還需做進(jìn)一步深入研究。

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