慢性阻塞性肺疾病患者血清中IL-32、8-iso-PGF2α的變化及意義

閻紅娥，張 堯，鮑文華，孫云暉，柴明思

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院呼吸科，黑龍江佳木斯154003)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是以持續(xù)氣流受限為主要特征的一組呼吸系統(tǒng)疾病。其患病率及病死率均處于較高水平，且逐年增加，尤其在我國北方地區(qū)［1］。臨床上分為穩(wěn)定期及急性加重期。目前認為COPD是環(huán)境因素和(或)反復的呼吸道致病菌感染等多因子共同作用引發(fā)的，與各種炎性細胞介質(zhì)關系密切。本研究通過測定COPD患者AECOPD和穩(wěn)定期血清中IL-32水平變化，探討其在COPD發(fā)病過程中的作用，為判斷COPD的嚴重程度，評估治療效果提供參考，并為臨床尋求一種治療COPD新的藥物提供一定的理論基礎。

1 對象與方法

1.1 研究對象

1)AECOPD組：從佳木斯大學附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科2013-01～2013-05住院患者并根據(jù)中華醫(yī)學會呼吸病學分會制定的最新COPD診治指南確診AECOPD40例，男22例，女18例，平均年齡(50±20)歲。均于近期出現(xiàn)咳嗽，咳痰，呼吸困難等任何一項癥狀明顯加劇，伴發(fā)熱或血白細胞升高。

2)COPD穩(wěn)定期組：上訴患者經(jīng)抗感染，平喘，化痰治療兩周，咳嗽，咳痰，呼吸困難及喘息癥狀穩(wěn)定或消失，體溫和血白細胞正常。

以上研究對象均己排除支氣管哮喘、支氣管擴張、肺間質(zhì)纖維化等慢性呼吸系統(tǒng)疾病及嚴重的心、肝、腎等系統(tǒng)疾病；腫瘤、感染、重大外傷、手術等；糖尿病、高脂血癥等代謝系統(tǒng)疾病；腦血管疾病和嚴重的免疫缺陷及結(jié)締組織病、痛風等免疫系統(tǒng)疾病；精神和心理疾病從而會妨礙其他參與者完成研究者及治療過程中出現(xiàn)復發(fā)或再次感染者。

3)健康對照組40例，男20例，女20例，平均年齡(49±19)歲，均無呼吸道疾病、心肺疾病及其它系統(tǒng)的嚴重疾病。

1.2 實驗方法

1)標本的處理：對照組采集門診健康體檢者生化血清樣本；慢阻肺急性加重期及穩(wěn)定期患者分別于入院時及出院前1d采空腹肘靜脈血5mL，離心分離血清，置無菌試管保存于-80℃冰箱中待測；

2)應用ELISA法測定血清IL-32及異前列腺素，美國進口試劑盒購于上海高創(chuàng)化學科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差()表示，在方差齊性的基礎上，使用LDS-t檢驗。單因素相關分析采用Spearman相關分析。α=0.05，P＜0.05或 ＜0.01表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

研究中COPD患者血清中IL-32增高，與疾病活動程度呈正相關，急性期高于穩(wěn)定期高于正常對照，見表1。在COPD急性加重期，患者血清IL-32與8-iso-PGF2α呈現(xiàn)正相關r=0.84，見表2。

表1 三組一般資料及對比(x± s，n=40)

表2 COPD加重期組IL-32、8-iso-PGF2α與其他因素的Spearman相關分析

3 討論

迄今為止，COPD的發(fā)病機制尚未闡明，普遍認為與遺傳易感性、環(huán)境污染、免疫因素、營養(yǎng)及社會心理等因素有關，其主要的病理學改變表現(xiàn)為局部的慢性支氣管炎癥和小氣道的結(jié)構(gòu)損傷［2］。隨著病情的不斷進展，患者的肺功能進行性下降，嚴重影響其勞動能力。因此，緩解癥狀及延緩肺功能進行性惡化是治療COPD的關鍵［3］。已有研究證實，白三烯 B4(LTB4)、白細胞介素 8(interleukin-8，IL-8)、白細胞介素5(interleukin-5，IL-5)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα，TNF-α)等多種細胞炎癥因子均與COPD的發(fā)生、進展相關聯(lián)［4］。因此，白細胞介素已成為研究COPD新的切入點。

白細胞介素32(Interleukin-32，IL-32)是在應用基因芯片方法研究IL-18可誘導基因(IL-18-inducible genes)時被發(fā)現(xiàn)的一種分泌型蛋白質(zhì)，在先天性免疫和獲得性免疫應答中均發(fā)揮著重要作用，參與了慢性炎癥性、感染性、以及自身免疫性等疾病的病理過程［5］。研究表明［6］，IL-32參與體內(nèi)的細胞凋亡，具有前炎性細胞因子的功能，能夠通過活化p38 MAP和NF-K激酶進而誘導免疫細胞產(chǎn)生大量細胞因子，可以誘導TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8等介質(zhì)的產(chǎn)生，并通過促進前列腺素的釋放，激活外周血液中單核細胞花生四稀酸的代謝，發(fā)揮生物學效應。

較早的研究表明［7］，在慢性阻塞性肺病患者中有吸煙史者，其IL-32-mRNA和蛋白質(zhì)水平較肺功能正常的無癥狀吸煙者和不吸煙者均明顯升高，且證實這種升高與TNFCD81細胞和p38MAP的存在密切相關，并與肺阻塞程度相關。在關于感染甲型流感病毒的人血清IL-32水平變化的研究中證實流感病毒是通過COX-2途徑來刺激 IL-32的生成。流感病毒感染過后高表達的前列腺素E2(PGE2)可被IL-32所抑制。體外細胞實驗研究結(jié)果顯示［8，9］，PBMC和A549細胞可以通過NF-B和CREB信號途徑上調(diào)IL-32的表達，作用在于反饋性地抑制病毒的復制。

8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)是前列腺素的同分異構(gòu)體，是自由基損害脂質(zhì)細胞膜多不飽和脂肪酸等脂類后的特異性產(chǎn)物。它能夠選擇性地收縮腎臟、冠狀動脈、視網(wǎng)膜和肺臟等臟器的血管，并且可放大炎癥細胞及炎癥介質(zhì)的作用。Fulktmaga的研究證明8-iso-PGF2α通過血栓素/前列腺TP受體引起大鼠氣道高反應性［10，11］。目前，它已成為一種評價氧化應激狀態(tài)的較為穩(wěn)定的生物學指標。

本研究的結(jié)果顯示，COPD患者急性加重期血清中IL-32、8-iso-PGF2α水平較癥狀緩解期及正常對照組均明顯升高；差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。提示COPD患者體內(nèi)氧化應激水平增強發(fā)生在疾病的全過程，并與病情緩急所相關，這同前期研究結(jié)果一致，在一定程度上表明IL-32在COPD的病程始終發(fā)揮著相應的作用。AECOPD入組患者均表現(xiàn)出較重的肺內(nèi)感染，通過對其IL-32與8-iso-PGF2α進行相關性分析，兩者存在著顯著的正相關(r=0.839，P＜0.01)；這表明了在COPD急性加重期時，IL-32的水平上調(diào)可能與患者氣道病原微生物侵襲所造成的黏膜損傷，進而引發(fā)的氣道過度氧化應激有關；此種前提下IL-32的高水平表達可能發(fā)揮著防御性作用，但具體機制尚待明確。

［1］劉永翠，馬雪梅.特布他林聯(lián)合布地奈德霧化吸入治療COPD急性加重期的臨床效果與護理［J］.黑龍江醫(yī)藥科學，2010，33(1)：52 53

［2］Global strategy for the diagnosis，management，and Prevention of chronic obstruetive pulmonary disease.NHLBI/WHO workshop report.Update，2003

［3］武焱 旻 .舒利迭粉吸入劑對Ⅲ-Ⅳ級慢性阻塞性肺病患者肺功能的影響［J］.黑龍江醫(yī)藥科學，2006，29(6)：32 33

［4］Baraldo S，Turato G.Neutrophilic infiltration within theairway smooth muscle in Patientswith COPD［J］.Thorax，2004，59(4)：308 312

［5］Kim SH，Han SY，Azam T，et al.Interleukin-32：a cytokine and inducer of TNFalpha［J］.Immunity，2005，22(1)：131 142

［6］Kim SH，Han SY.Interleukin-32：a cytokine and inducer of TNF alpha［J］.Immunity，2005，22(1)：131 142

［7］Calabrese F，Baraldo S，Bazzan E，et al.IL-32，a novelpro-inflammatory cytokine in chronic obstructive pulmonary disease［J］.Am JRespir Crit Care Med，2008，178(9)：894 901

［8］Joosten Leo AB，Netea MG，Kim SH，etal.IL-32，a pro-inflammatory cytokine in rheumatoid arthritis［J］.USA Proc Natl Acad Sci，2006，103(9)：3298 3303

［9］Wei L，Yan L，Muhammad MM，etal.Activation of Interleukin-32 Pro-Inflammatory Pathway in Response to Influenza A Virus Infection［J］.PLOSONE，2008，3(4)：1 9

［10］FukunagaM，YuraT，Grygorczyk R，et al.Evidence for the distinct nature of F2-isoProstane receptors from those of thromboxane A2［J］.Am JPhysiol，1997，272：477 483

［11］Held HD，Uhlig S.Mechanisms of endotoxin-induced airway and pul-monary vascular hypperreactivity in mice［J］.Am J Respir Crit Care Med，2000，162：1547 1552