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海港區某羊場常見寄生蟲病調查

2014-10-09 05:45:56董春玲
今日畜牧獸醫 2014年1期

董春玲

(秦皇島市海港區動物衛生監督所,河北秦皇島066000)

羊在整個生長發育過程中都不斷受到寄生蟲病的侵襲。寄生蟲不僅消耗羊的營養,降低羊對飼料的利用,提高養殖成本,降低飼料報酬等,引起的經濟損失是其他任何疾病不能相比的,而且還會降低其產品的品質,影響羊的體質為其他的疾病打開門戶,嚴重時甚至引起羊只死亡,給養殖戶造成重大的經濟損失,極大的制約了養羊業的發展和農戶養羊的積極性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物

海港區某羊場波爾山羊100只。

1.1.2 試驗儀器

載玻片、蓋玻片、小木棒、燒杯、銅篩或多層紗布、膠頭滴管、顯微鏡、鐵絲環、網兜、蟲卵計數器、培養皿、測微器、300毫升容量瓶、離心機、離心管、塑料袋。

1.1.3 試劑

50%甘油水、飽和硫酸鋅溶液(100毫升水中加入硫酸鋅33克)、飽和食鹽水(100毫升沸水中加入38克食鹽,使其溶解,以紗布過濾冷卻后,如有結晶析出即成飽和溶液)、盧戈氏碘液、明礬蘇木素(有甲乙二液合成:甲液以蘇木素1.0克,無水乙醇12毫升配成;乙液以明礬1.0溶于240毫升蒸餾水內,使用前以甲液2~3滴加入乙液數毫升中即可)、石炭酸復紅染色液(堿性復紅4克、95%酒精20毫升、苯酚8毫升、蒸餾水100毫升)、甲醛、木炭末、1.6%氫氧化鈉溶液。

1.2 方法

1.2.1 糞便檢查法

1.2.1.1 糞便的采集

清晨采集新鮮羊糞便,1份/羊,放于塑料袋中,編號后帶回實驗室檢查。

1.2.1.2 直接涂片法

首先在載玻片上加50%甘油水數滴,再以小木棒取新鮮糞便少許,與玻片上的甘油水混合均勻,去掉大塊粉渣,將糞便涂成薄膜,其厚度以能透視書報上的字跡為度,然后加蓋玻片,置顯微鏡下檢查,檢查時應順序地查遍蓋玻片下所有部分。檢查中發現有蟲卵數量不多的,因此每份糞樣作了3~5片進行檢查。

1.2.1.3 漂浮法

利用比重大于蟲卵的飽和硫酸鋅溶液與糞混勻,銅篩過濾,用吸管吸取濾液于兩個離心管中,平衡后離心,1500轉/分鐘,離心5分鐘。然后用鐵絲環沾取上層液面鏡檢。

1.2.1.4 沉淀法

利用蟲卵比重大于水的特性,取10克糞便置于燒杯中,先加少量水,充分攪拌將糞搗成糊狀,再加常水適量繼續攪拌,通過糞篩濾到另一容器內然后加滿常水,靜置15分鐘,再傾去上清液。如此反復用水洗沉淀數次,直到上層液體透明為止。最后傾去上清液,用膠頭滴管吸取沉淀于載玻片上,加蓋玻片鏡檢。檢出比重較大的肝片吸蟲卵。

1.2.1.5 蟲卵計數法一

麥克馬斯特氏法,此法先要用載玻片和一個蓋玻片做成蟲卵計數器,即在蓋玻片上刻長寬各1厘米的方格,再在大方格內刻100個小方格,載玻片與蓋玻片間填上1.5毫米厚的玻條,并以粘合劑粘合。計數時取糞便2克置研缽中,先加入10毫升水,攪勻,再加飽和食鹽水50毫升,混勻后立即吸取糞液充滿計數室,靜置2分鐘,鏡檢記錄計數室的蟲卵數。蟲卵數乘以200即為每克糞便中蟲卵數。該法適用于線蟲。

1.2.1.6 蟲卵計數法二

片形吸蟲蟲卵計數法,稱取羊糞10克,置于300毫升的容量瓶中。加入少量1.6%氫氧化鈉溶液,靜置過夜,次日,將糞塊攪碎,再加入1.6%氫氧化鈉至300毫升刻度處。再搖勻,立即吸取7.5毫升糞液注入到離心管內,在離心機內以每分鐘1000轉離心2分鐘,傾去上層液體,換加飽和鹽水,再次離心后,再傾去上層液體,再換加飽和鹽水,如此反復操作,直到上層液體完全清澈為止。傾去上層液體,即將沉渣全部分別滴于數張載玻片上,檢查全部的載玻片上的蟲卵并計數,以總數乘以4,即為每克糞便中的肝片吸蟲蟲卵數。

1.2.2 血液檢查法

1.2.2.1 血液的采集

采集頸靜脈血液,1份/羊,放于裝有抗凝劑的試管中,編號后帶回實驗室檢查。

1.2.2.2 血液中蠕蟲檢查

取新鮮血液一滴于玻片上,覆以蓋片在低倍鏡下檢查。血中幼蟲較多時可做推片經明礬蘇木素染色后檢查。血中幼蟲較少可采一大滴,在載玻片上略加涂布,待其自然干燥,使結成一層厚血膜,而后將此玻片反轉,血膜面向下,斜浸入一小杯蒸餾水中,待其完全溶血,取出晾干,在浸入甲醛中固定10分鐘,晾干后以明礬蘇木素染色,待白細胞的核染成深紫色,取出以蒸餾水沖洗2分鐘,顯微鏡下檢查。血中幼蟲很少時,可采血于離心機中,加入5%醋酸溶液以溶血,待溶血完成后離心,取沉淀渣檢查。

1.2.2.3 血液內原蟲的檢查-鮮血壓滴標本檢查

將采出的血液滴于載玻片上,加等量生理鹽水,混合均勻后,加蓋片,立即放低倍顯微鏡下檢查。用于伊氏錐蟲和附紅細胞體的檢查。

1.2.2.4 血液內原蟲的檢查-涂片染色標本檢查

采血,滴于載玻片一端,按常規推制成血片,并使其晾干。滴甲醛2滴于血膜上,使其固定,染色(姬氏染色法取姬氏染色粉0.5克,中性純甘油25.0毫升,無水中性甲醛25.0毫升。先將姬氏染色粉置研缽中,加少量甘油充分研磨,再加再磨,直到甘油全部加完為止。將其倒入100毫升容量的棕色小口試劑瓶中;在研缽中加少量的甲醛以沖洗甘油染液,沖洗液仍傾入上述瓶中,再加再洗再傾入,直至25毫升甲醛全部用完為止。塞緊瓶口,充分搖勻,而后將瓶置于65℃溫箱中24小時,并不斷搖動,此即為原液。染色時將原液2.0毫升加到中性蒸餾水100毫升中,即為染液。染液加與血膜上染色30分鐘后,用水洗5分鐘,晾干,鏡檢。)用油鏡檢查。用于泰勒蟲等多種寄生蟲的檢查。

2 結果與分析

2.1 糞便檢查

2.1.1 直接涂片法

在顯微鏡下發現蟲卵種類有消化道圓線蟲卵,鞭蟲卵,感染率分別為82%、18%。

2.1.2 漂浮法

在顯微鏡下發現蟲卵種類有消化道圓線蟲卵,鞭蟲卵。感染率分別為100%、38%。

消化道圓線蟲卵:顯微鏡下觀察三種圓線蟲卵兩端都無“塞”且在蟲卵內都未形成幼蟲,蟲卵長度大于60微米小于85微米的是捻轉胃蟲卵,蟲卵長度大于90微米且有16~32卵胚細胞,其中略大的是馬歇爾線蟲蟲卵,而略小的是奧斯特線蟲卵。

鞭蟲卵:顯微鏡下觀察蟲卵呈紡錘形黃褐色,大小為50~54×22~23微米,卵殼厚,蟲卵兩端各有一個“塞”,即為鞭蟲卵。

2.1.3 沉淀法

在顯微鏡下發現蟲卵種類有消化道圓線蟲卵,鞭蟲卵,肝片吸蟲卵。感染率分別為100%、38%、25%。

肝片吸蟲卵:長橢圓形,大小為130~150微米×63~90微米,黃褐色,有小蓋,卵內充滿卵黃細胞,卵細胞不易看清。

2.1.4 蟲卵計數法(一)-麥克馬斯特氏法

在每克糞便中查到有10052個消化道圓線蟲卵,感染程度是重度感染。

2.1.5 蟲卵計數法(二)-片形吸蟲蟲卵計數法

在每克糞便中查到有386個肝片吸蟲卵,感染程度是輕度感染。

2.2 血液檢查

2.2.1 血液中蠕蟲檢查

在血液中沒有查到蠕蟲感染。

2.2.2 鮮血壓滴標本檢查

沒有查到伊氏錐蟲、查到附紅細胞體感染。

2.2.3 血液內原蟲的檢查-涂片染色標本檢查

僅查到有泰勒蟲感染,感染率為35%。

以上各種方法的檢查,結果匯總見下表。

抽檢一百只波爾山羊的寄生蟲感染情況

3 討論

本次調查中證明了該羊場中的波爾山羊體內寄生蟲主要為圓線蟲,其次為肝片吸蟲和鞭蟲,其中圓線蟲在每克糞便中查到10052個圓線蟲卵,屬于重度感染,應該給予驅蟲,但并沒有引起發病,造成羊的死亡,因此還沒有造成宏觀上的經濟損失,但由于寄生蟲病是一種慢性、消耗性的疾病,不會在短時間內造成大面積的發病、死亡,只是在消耗體內營養,尤其是影響生長發育、生長緩慢、消瘦、抵抗力下降、降低飼料報酬,造成重大的微觀上的經濟損失,也是對牧場的羊造成損失比較嚴重的一個根源。

3.1 在各種檢查方法中,各自的優點

3.1.1 在糞便檢查法中,直接涂片法的優點就是操作簡單、迅速,在短時間內就可以出現結果,缺點是結果不完全且檢出率低,通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵和鞭蟲卵,感染率分別是82%、18%。

3.1.2 沉淀法的優點是檢查出來的結果檢出率高,缺點是操作復雜,需要很長的時間,通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵,鞭蟲卵,肝片吸蟲卵。感染率分別為100%、38%、25%。

3.1.3 漂浮法只能檢查出比重小于所使用的漂浮液,該法的優缺點介于直接涂片法和沉淀法兩者之間,要比直接涂片法檢出率高,但又沒有沉淀法檢出的結果完全,通過此法檢查到的蟲卵有消化道圓線蟲卵,鞭蟲卵。感染率分別為100%、38%。

3.1.4 蟲卵計數法一-麥克馬斯特氏法可粗略的推斷動物寄生蟲感染程度,但有局限性,僅適用于線蟲卵的計數。

3.1.5 蟲卵計數法二-片形吸蟲蟲卵計數法用于比重較大的片形吸蟲卵,操作時間相對于麥克馬斯特氏法要稍長。

3.1.6 血液檢查法中,血液中蠕蟲檢查要根據幼蟲的多少運用不同的方法,首先要考慮幼蟲較多,其次在考慮較少,最后考慮很少。

3.1.7 血液內原蟲的檢查-鮮血壓滴標本檢查操作簡單,節省時間,但檢查出的結果僅限于伊氏錐蟲和附紅體細胞,具有局限性。

3.1.8 血液內原蟲的檢查-涂片染色標本檢查,此法中使用的試劑材料較多,時間要長,但檢查出來的結果完善。

通過此次調查,大致總結出該地區秋季羊體肥大,糞中蟲卵占優勢,這預示著羊體內的幼蟲變成成蟲的數量在陸續增加。主要危害較大的消化道寄生蟲:圓線蟲和附紅細胞體還在威脅著養羊業的發展,仍然未得到有效的控制。

寄生蟲病的傳播和流行,必須具備傳染來源、傳播途徑和易感動物三個基本環節,切斷或控制其中任一個環節,就可以有效地防制某種寄生蟲病的發生與流行。此外,寄生蟲病的傳播和流行,還受到自然因素和社會因素的影響和制約。

3.2 加強寄生蟲病防治工作

3.2.1 制訂寄生蟲病防治的長期規劃

根據本次調查的結果和不同寄生蟲病的流行程度及其分布特點,應對該地區制訂重點寄生蟲病防治的長期規劃,將把對其前后盤吸蟲、華支睪吸蟲防治作為重點領域,把對人類健康危害較大的肝吸蟲病作為重點防治的寄生蟲病,從而保證該地區寄生蟲病防治工作有計劃、有重點地開展。

3.2.2 大力開展寄生蟲病防治知識的宣傳

寄生蟲病的傳播和流行與人們的行為密切相關。有必要通過各種宣傳途徑和方式,引導和教育群眾逐步改變不利于健康的生產、生活習慣和飲食、衛生習慣,特別要加強對中小學生、婦女和農牧民群眾的宣傳教育工作,提高群眾的防病意識和自我保護能力,減輕寄生蟲病的危害。

3.2.3 逐步加大該地區寄生蟲病防治力度

針對對人類危害較大的,感染率較高的多種寄生蟲病的現狀,采取有效的干預措施,把寄生蟲病防治工作與農業、農村和農民問題緊密聯系起來,實施重點寄生蟲病綜合防治。通過開展重點寄生蟲病綜合防治項目,逐步壓縮流行范圍,防止因人員流動和物質交流的頻繁而造成寄生蟲病的傳播。

3.2.4 進一步降低線蟲感染率

國內外寄生蟲病防治經驗證明,采取以藥物驅蟲為主,結合開展健康教育、改水改廁等綜合防治措施,對于消除傳染源,降低寄生蟲感染率有顯著成效。按照“因地制宜、分類指導、科學防治”的原則,在寄生蟲感染率較大的重度流行區,每年有計劃地開展集體驅蟲治療;在中度感染率的流行區,可采取對重點人群每年進行驅蟲治療的防治策略,進一步降低人群感染率,保障人民群眾身體健康。

3.2.5 加強重點寄生蟲病防治的應用性科研

建立和完善寄生蟲病的監測體系,研究制訂重點寄生蟲病的防治標準、技術規范和工作方案,使寄生蟲病防治工作科學、系統、規范地進行,保證我國寄生蟲病防治工作的可持續發展。

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