仲崇艷
(滁州市水產研究所,安徽 滁州 239074)
隨著水產養殖業的不斷發展,養殖密度增大、水質環境惡化和其它多種原因導致細菌性疾病日益增多。由于養殖戶缺乏對魚病的正確認識而濫用藥物,增加了細菌的耐藥性,使得抗菌藥對細菌性疾病的防治效果不理想,不但造成藥物浪費,而且延誤病情。對疾病做出正確診斷,對癥下藥,對致病菌做藥敏試驗是最科學的方法。按照傳統方法進行細菌鑒定和藥敏試驗,至少需1周~2周時間。對養殖戶來說,一旦魚發生病害,應及時防治,減少損失。
測定抗菌藥物在體外對微生物有無抵制作用的方法稱為藥物敏感性試驗,簡稱藥敏試驗。KB法,即通常所說的紙片擴散藥敏試驗,是目前臨床上最常用的藥敏試驗方法。其技術上簡單易行,重復性好;試驗成本相對較低,不需要特殊設備;抗菌藥物的選擇有很大的靈活性;藥敏結果解釋性分類(S、I、R)易理解[1]。經典的藥敏試驗選擇的是M-H培養基[1],也有選擇肉膏-胰胨培養基[2],而關于LB培養基應用于藥敏試驗鮮有報告。以鳊為例就LB培養基應用于藥敏試驗(K-B法)進行探討。
1.1.1 培養基
LB液體培養基[2]:蛋白胨1%,酵母膏1%,氯化鈉0.5%,pH值7.2;121℃20min。LB固體培養基是在LB液體培養基的基礎上加入1.5%~2.0%的瓊脂,121℃20min。
1.1.2 藥敏試紙
購自杭州微生物試劑有限公司(執行標準:WS/T125-1999)
1.1.3 0.5 麥氏標準濁度[1]
將0.5mL0.048moL/L的BaCl2(1.175%W/VBaCl2·2H2O)加入到 99.5mL0.18moL/L的H2SO4(1%W/V)中并不斷攪動,以維持混懸狀態。
1.1.4 病魚
取自安徽滁州市某水庫急性發病的鳊(非缺氧、機械損傷,中毒與藥害導致的死亡)。……