苓桂術甘湯對急性心梗后心室重構模型大鼠心功能及血清BNP的影響*

龔曉燕，王 靚，黃金玲，施 慧，王桐生，洪星輝，華明柳

（安徽中醫藥大學，安徽合肥 230038）

苓桂術甘湯（linggui zhu-gan decoction，LGZGD）為仲景名方，是溫陽益氣、健脾化飲的代表方。在前期的研究中我們發現該方能夠有效地干預心梗后6周模型大鼠的心臟舒縮性[1-2]。為進一步探明苓桂術甘湯干預心梗后心室重構（ventricular remodeling，VR）的作用和機制，本實驗擬通過觀察苓桂術甘湯對急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）后心室重構2周模型大鼠心功能的影響及各組大鼠血清B型鈉尿肽（B-type natriuretic peptide，BNP）含量的變化，進一步為苓桂術甘湯早期預防心衰的臨床應用提供實驗依據。

1 實驗材料

1.1 動物

清潔級SD大鼠80只，雄性（♂），體質量（200±20）g，由安徽醫科大學實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（皖）2011-002。實驗前適應性喂養5d。

1.2 藥品與試劑

苓桂術甘湯參考文獻[3]方法，由安徽省亳州市興和藥業有限公司制成干浸膏粉末，含生藥量4.8g/g（其中桂皮醛含量9.945mg/g，甘草酸含量：14.71mg/g），4℃冰箱密封保存備用；卡托普利：中美上海施貴寶制藥有限公司，批號009031；BNP試劑盒：上海森雄科技實業有限公司。

1.3 主要儀器

Power Lab數據采集分析系統：澳大利亞埃德公司；HX-300S型小型動物呼吸機：成都泰盟科技有限公司；Multiskan MK2型酶標儀：芬蘭Labsystem公司。

2 方法

2.1 動物模型復制、分組及給藥

取SD大鼠70只，參照參考文獻[1-2]用冠狀動脈結扎法復制急性心肌梗死模型。以心電圖S-T段抬高伴肢體導聯R波高尖，作為結扎成功的標準。另取10只SD大鼠只穿線但不結扎冠狀動脈作為假手術組。手術過程按照無菌操作要求進行。造模2周后除假手術組（蒸餾水10mL/kg灌胃）外，其余存活模型大鼠隨機分為5組（每組12只）：模型組，苓桂術甘湯小、中、大劑量組（2.1g/kg，4.2g/kg，8.4g/kg，按體表面積法換算，相當于成人日常用量的1、2、4倍），卡托普利組（4.375mg/kg）。灌胃（ig）給藥（容積為10mL/kg體質量），模型組與假手術組灌胃等容積蒸餾水，連續處理4周。

2.2 血流動力學指標測定

于最后第二次藥后禁食12h，2%戊巴比妥鈉25mg/kg腹腔麻醉后進行血流動力學檢測。參考文獻[1]方法分離右頸總動脈，用Power Lab數據采集分析記錄儀測定左心室收縮末壓力（LVSP）、左心室舒張期末壓（LVEDP）、左室內壓最大收縮率（+dp/dtmax）、左室內壓最大舒張率（-dp/dtmax）。

2.3 采用ELISA法檢測血清BNP含量

末次給藥后30min，采用腹腔注射20%烏拉坦（5mL/kg）的方法麻醉各組大鼠，腹主動脈采血。血液常溫下靜置30min后，離心分離血清，用酶標儀檢測BNP含量。

3 統計方法

采用統計分析軟件SPSS 17.0進行統計學處理。連續型變量用（±s）表示，多樣本均數比較用one-way ANOVA法，多個均數比較采用LSD法。

4 結果

4.1 對心室重構模型大鼠血流動力學的影響

由表1可見，行冠狀動脈結扎術后模型組大鼠與假手術組相比，LVSP與+dp/dtmax、-dp/dtmax均明顯下降（P＜0.01），LVEDP 明顯升高（P＜0.01）；造模2周后連續給予苓桂術甘湯和卡托普利干預4周后，各組大鼠血流動力學指標均有顯著改善：苓桂術甘湯小、中、大劑量組大鼠LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax均顯著上升，LVEDP顯著下降，與模型組比較差異均具有統計學意義（P＜0.01）。

表1 苓桂術甘湯急性心梗后2周干預對心室重構模型大鼠血流動力學的影響（x±s）

4.2 苓桂術甘湯對心室重構模型大鼠血清BNP含量的影響

由表2可見，行冠狀動脈結扎術后模型大鼠與假手術組比血清BNP含量明顯升高（P＜0.01）；而分別在造模2周后，連續給予苓桂術甘湯干預4周后的各組大鼠血清BNP含量明顯降低，與模型組比較差異有統計學意義（P＜0.05，或P＜0.01）。

表2 苓桂術甘湯對急性心梗2周后模型大鼠血清BNP 的影響（±s）

表2 苓桂術甘湯對急性心梗2周后模型大鼠血清BNP 的影響（±s）

注：與假手術組比，△P＜0.05，△△P＜0.01；與模型組比，*P＜0.05，**P＜0.01；與卡托普利組比，#P＜0.05，##P＜0.01

組別 劑量/g·kg-1 動物數/n BNP/ng·L-1假手術組 - 10 183.416±14.081模型組 - 8 295.822±24.856△△卡托普利組 0.004 10 238.708±12.467**小量組 2.100 9 245.028±20.347**中量組 4.200 10 221.858±13.908**#大量組 8.400 10 217.356±18.155**##

5 討論

急性心肌梗死可激活神經內分泌調節機制和細胞內相關信號轉導機制，導致左心室的進行性擴張和外形的改變，即為心室重構。目前認為心室重構是AMI后發生慢性心衰的重要病理基礎。

BNP是一種心血管肽類激素，主要由心室分泌，能敏感而特異地反映左心室功能變化。引起BNP分泌增加的主要因素是心室擴張或心室壓力增高，當心臟容量負荷或壓力負荷增加時，心臟合成和分泌BNP并釋放入血，使血中BNP濃度增高[4-5]。韓玲等[6]對慢性心力衰竭（CHF）患者BNP與中醫辨證分型的關系進行了臨床研究，發現陽虛病人的BNP含量明顯高于其他證型的病人，他們認為心陽是心臟泵血功能的決定因素，與本課題組“心陽氣虛是心衰之本、貫穿心衰病機始終”的觀點具有一致性。

苓桂術甘湯方出自張仲景《傷寒雜病論》，是溫陽化飲的代表方，方中茯苓養心益脾，淡滲利水；桂枝辛溫通陽，兩藥相配通陽化氣、利水滲濕。本實驗在既往研究基礎上[1-2]，觀察苓桂術甘湯對急性心肌梗死后早期干預的作用。本研究結果顯示，對急性心肌梗死后2周模型大鼠用苓桂術甘湯連續干預4周，與模型組相比，血流動力學各項指標顯著改善，同時我們發現血漿BNP水平與LVEDP呈正相關性。苓桂術甘湯小、中、大劑量組大鼠LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax均顯著上升，LVEDP顯著下降，大鼠血清BNP含量明顯降低，均與模型組比有顯著性差異（P＜0.01或P＜0.05）。實驗表明苓桂術甘湯對AMI大鼠心臟舒縮性能具有顯著的改善作用，其作用與降低大鼠血清BNP含量密切相關。

綜上所述，我們認為苓桂術甘湯可以顯著改善AMI后心室重構模型大鼠心功能，降低大鼠血清BNP含量，有效發揮阻抑心室重構的作用。結合本課題組前期研究基礎，我們認為苓桂術甘湯可以有效阻抑心室重構，防治CHF，下一步課題組將進一步就其干預心室重構的機制做深入探討。

[1]黃金玲，桑方方，王桐生，等.苓桂術甘湯對充血性心衰竭大鼠心臟指數與血流動力學的影響 [J].安徽中醫學院學報，2009，28（5）：58-60.

[2]方海雁，黃金玲，桑方方，等.苓桂術甘湯對慢性心衰大鼠AngⅡ、ET-1、TNF-α 和IL-β 的影響[J].安徽中醫學院學報，2010，29（2）：53-55.

[3]黃金玲，王慧慧，陳慧芳，等.正交試驗法優選苓桂術甘湯的提取工藝[J].安徽中醫學院學報，2011，30（6）：65-67.

[4]劉恩華.急性心肌梗死患者心肌損傷標志物動態監測價值的比較[J].標記免疫分析與臨床，2010（2）：65-67.

[5]龔厚文.BNP，NT-proBNP檢測在心力衰竭中的應用進展[J].西南軍醫，2010（1）：99-101.

[6]韓玲.心力衰竭患者腦鈉肽、左室射血分數與中醫辨證分型關系的臨床研究[J].新疆中醫藥，2009（2）：18-20.