綠色養殖儀（臭氧發生儀）在犢牛圈舍空氣的消毒試驗研究

（新疆兵團第八師133團機關，石河子市，832064） 劉東軍

高新技術產品--“畜禽綠色養殖儀”，對養殖環境、飲用水采取高科技等離子體活氧技術處理，可以有效殺滅空氣中的病原微生物，減少疾病的發生。為實現禽畜高效養殖、有效防治疾病、消除藥物殘留，為養殖戶節約成本，增產增收提供了一整套切實可行的先進技術方案，開創了國內禽畜綠色養殖之先河。

臭氧的作用是降低空氣和飲水中的有害的病原菌；提高水中不溶性氧氣含量；限制有害消毒劑的副產物：DBPS的產生。使用后圈舍空氣感到清新，臭氧可以降解圈舍的氨氣和硫化氫等氣體，減少有害氣體的濃度。

1 材料

1.1 主要設備

臭氧發生儀，風冷臭氧發生儀；XKH-OZ15G型

DHG-9076A型電熱恒溫培養箱（上海精宏試驗設備有限公司）、Sw-cj-2F無菌操作臺（蘇凈集團安泰公司）、CX21光學顯微鏡（OLMPUS）、PHSF-4A型酸度儀（上海）。CTH1000澳洲新儀器AIKE氨氣檢測儀。JD-60便攜型泵吸式臭氧檢測報警儀。

1.2 主要試劑

普通營養瓊脂培養基、亞硒酸鈉增菌培養基、革蘭氏染液（草酸銨結晶紫溶液，95%酒精溶液，沙黃溶液，魯格氏碘溶液）。

2 方法

2.1 培養基制備

2.1.1 普通營養瓊脂培養基

取普通營養瓊脂培養基45g，加入1 000mL蒸餾水中，加熱溶解。用氫氧化鈉調節PH值為7.2～7.6。121℃15min高壓滅菌，高壓滅菌后的培養基置于超凈工作臺內分裝培養皿，靜止凝固后，短期放置在4℃冰箱中備用。

2.1.2 亞硒酸鈉增菌培養基

取亞硒酸鈉增菌培養基36g，加入1 000ml蒸餾水中，加熱溶解。用氫氧化鈉調節PH值為7.2～7.6。121℃15min高壓滅菌，高壓滅菌后的培養基置于超凈工作臺內分裝培養皿，靜止凝固后，短期放置在4℃冰箱中備用。

2.1.3 普通羊血瓊脂平板

牛肉膏0.30g，蛋白胨1.00g，氯化鈉0.50g，磷酸二氫鉀0.10g，瓊脂1.5g蒸餾水100mL，將上述成分混勻，加熱溶解，調PH7.2～7.6左右。121℃高壓滅菌15min，冷卻至45℃后加入10%的無菌脫纖維綿羊血，置于超凈工作臺內分裝培養皿，靜止凝固后，短期放置在4℃冰箱中備用。

2.2 犢牛圈舍消毒前后微生物檢測

2012年12月，試驗地點選擇在石河子133團紅光牧業奶牛場2號犢牛舍。2號犢牛舍空間400m3，室溫20℃時空氣密度1.205kg/m2。安裝一臺XKH-OZ15G型風冷臭氧發生儀，臭氧發生儀每小時生產15g臭氧，每次消毒時間2h，總共產生30g臭氧，理論上圈舍中臭氧濃度62.24PPM，實際檢測中，用JD-60便攜型泵吸式臭氧檢測報警儀檢測，臭氧濃度為3～6PPM。這與圈舍空氣流動有關和臭氧分子的穩定性差有關。

選擇圈舍四周和中央總共6個點，分別在消毒前和消毒后各放置上述3種培養基（培養基選擇普通營養瓊脂、亞硒酸鈉增菌培養基和普通羊血瓊脂平板）培養皿各6個，平皿直徑13cm。培養皿開蓋10s后，蓋上培養皿的上蓋，放置在培養箱中37℃培養24s后，觀察結果，計算菌落總數。

2.3 菌落計數

培養箱中37℃培養24小時后的培養皿菌落計數，分別計數個培養基上的菌落總數，并計算出消毒前后每平方米圈舍中微生物的總數。

2.4 涂片鏡檢

無菌操作選擇培養皿中典型的菌落，涂片、火焰固定、染色、干燥后用顯微鏡觀察。

3 結果

上述試驗在早晨和傍晚各進行一次，共進行3天，將6次的試驗結果計算平均數值。

3.1 普通營養培養基試驗結果

早晨消毒前每個培養皿中有菌落429.4個，消毒后215.6個，消毒后每個平皿菌落減少了213.8個，減少率為49.79%。傍晚消毒前每個培養皿中有菌落446.7個，消毒后231.4個，消毒后每個平皿菌落減少了215.3個，減少率為48.19%。每個平皿面積：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落總數分別為：33 019.3個/m2，16 846.9個/m2，消毒后圈舍菌落減少16 172.4個/m2。詳見表1。

表1 普通營養瓊脂培養基試驗結果（臭氧發生儀使用前后圈舍菌落計數結果）

表2 亞硒酸鈉增菌培養基試驗結果

3.2 亞硒酸鈉增菌培養基試驗結果

早晨消毒前每個培養皿中有菌落342.1個，消毒后219.4個，消毒后每個平皿菌落減少122.7個，減少率為35.87%。傍晚消毒前每個培養皿中有菌落446.5個，消毒后227.3個，消毒后每個平皿菌落減少219.2個，減少率為49.09%。每個平皿面積：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落總數分別為：29 721.5個/m2，16 835.6個/m2。詳見表2.

3.3 普通羊血培養基試驗結果

早晨消毒前每個培養皿中有菌落461.3個，消毒后206.4個，消毒后每個平皿菌落減少254.9個，減少率為55.26%。傍晚消毒前每個培養皿中有菌落489.1個，消毒后197.3個，消毒后每個平皿菌落減少291.8個，減少率為59.66%。每個平皿面積：0.0 132 665m2。圈舍消毒前后的菌落總數分別為：35 819.5個/m2，15 215個/m2。詳見表3。

表3 普通羊血培養基試驗結果

3.4 犢牛圈舍臭氧消毒試驗前后呼吸道病發病率和死亡率的變化

2012年12月到2013年1月，石河子133團紅光牧業奶牛場犢牛2號舍中主要的呼吸道病原體有支原體、巴氏桿菌、肺炎雙球菌。呼吸道發病的犢牛日齡集中在20～30日齡的犢牛，發病急，病程長，癥狀明顯，死亡率高。治療不及時或治療不當死亡率較高。2012年12月間犢牛舍有呼吸道病癥狀的犢牛117頭，通過治療治愈74頭，死亡26頭，治療后失去飼養價值的17頭。2012年12月到2013年1月通過使用臭氧消毒機凈化空氣，使用粘膜病疫苗和肺炎支原體、肺炎雙球菌和巴氏桿菌三聯滅活疫苗等措施有效控制犢牛呼吸道病的發病，發病率和死亡率明顯下降。2013年1月呼吸道病的發病38頭，經治療后死亡9頭，淘汰2頭，有效控制犢牛呼吸道病的發生。

4 討論

4.1 臭氧凈化空氣的作用

臭氧在凈化空氣方面主要作用為空氣消毒滅菌，并有效降解由糞便中所產生的氨氣和硫化氫等氣體。凈化空氣創建一個清新的飼養環境。減少飼養環境中的病原濃度，阻斷空氣中的病原微生物的傳播，使畜禽健康的生長。試驗中由于條件的限制沒有檢測空氣中支原體的濃度，但通過檢測空氣中菌落總數的變化可以間接說明，臭氧在空氣消毒方面的作用。消毒后空氣中菌落總數明顯減少，病原菌減少，可以有效降低病原傳播的風險，降低發病率。

臭氧充注到養殖圈舍內，首先與糞便所散發的異臭進行分解反應去除異臭，當異臭去除到一定程度稍聞到活氧味時，圈舍內空間的細菌、病毒、真菌等病原微生物基本隨之殺滅。應用臭氧技術之后，有效地達到凈化空氣作用，進入應用臭氧技術的養殖圈舍內很直觀地讓人感覺到空氣明顯清新。

4.2 臭氧在疾病預防控制方面作用

“畜禽綠色養殖儀”采用低溫等離子體高新技術，突破常規飼養模式，在畜禽的飼養過程中可以有效地遏制畜禽疫病的發生，促進飼料轉化率，保證畜禽的成活率并促進健康生長。使用“畜禽綠色養殖儀”后，臭氧可以有效殺滅圈舍中的微生物，減少細菌性疾病的發生，畜禽發病率、死亡率降低，用藥量減少。畜禽生長、生產性能大為改善。用藥減少，藥殘必然達標，這樣就提高了畜禽產品的質量。提供大量優質、無藥殘、安全的畜禽產品，具有重大的社會效益。

4.3 用臭氧凈化消毒水質

臭氧凈化消毒飲水比傳統使用化學消毒的方法來得快速度與有效率。臭氧具有摧毀所有已知的細菌、病毒，它不但能摧毀水中的微生物，同時亦可使水中的金屬與礦物質沉淀，金屬與礦物質沉淀后則可經簡單過濾而從水中清除掉。

隨著畜牧業的發展，畜禽養殖向著集約化發展，養殖密度不斷增加，畜禽生產中產生大量的氨氣、硫化氫的有害氣體嚴重威脅畜禽健康。“畜禽綠色養殖儀”，對養殖環境、飲用水采取高科技等離子體活氧技術處理，實現了禽畜高效養殖、有效防治疾病、消除藥物殘留，為養殖戶節約成本。