徐 明 朱文燁
犬精液動態參數分析與研究
徐 明 朱文燁
就犬繁育而言,在公母比例為1∶6的生產群中,公犬精液品質出現問題對受胎率的影響是母犬的6倍。因母犬發情周期較長,一次空胎便使育種的世代間隔增加半年,給警犬繁育工作帶來巨大的影響。而通過產仔數量來判斷公犬生育能力缺乏準確性和存在滯后性。因而強化對犬精液質量檢測,不僅能使犬繁育工作順利開展,也能減少繁育工作的成本和時間,更是向各級一線公安機關提供量足質優受訓犬的保障。
本文旨在通過對種公犬精液動態參數的分析與研究,對精液動態參數中的9項動態參數值(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR)的正態分布范圍進行觀察,用精液動態參數分析法為診斷公犬不育提供參考依據。
本實驗對警犬的精液中的動態參數進行檢測,計算確定各項數值的正態分布范圍。通過與生育障礙組以及不育組的對比分析,找到影響公犬生育的各項因素。從而總結出一套較為科學,實踐操作性強,能應用于臨床判斷公犬生育能力的檢測標準,提高公犬的繁殖水平及產仔量。
(一)生育正常組的檢驗
1.實驗材料
實驗用公犬:選取年齡均為2周歲以上,體成熟、性成熟,平均窩產6頭以上的公犬。飼養地點設在某警犬基地。
飼養條件:采取分舍飼養。犬舍為半開放式。采取自由飲水,限量采食的方式。日糧按每頭犬每日0.45千克某成犬糧飼喂,并喂少量牛肉稀飯,每日進食兩次,采取“對時制”方式飼喂。每日由基地繁育員定點散放,時間為半小時。所有犬的飲食及活動量基本一致。
實驗儀器及軟件:本實驗所使用的儀器為W LJ Y-9000精子質量檢測系統及相關的恒溫設備(北京偉力技貿公司提供),所使用的數理統計材料軟件為SAS數理統計軟件。
2.實驗方法
選取符合實驗條件的種公犬15頭,使用人工手握法對其分別進行采樣、保存。利用W LJ Y-9000型精子質量檢測系統對公犬的精液動態參數以及精子活力、精子活率進行檢測。所獲得的數據通過SAS數理統計軟件進行計算,并且各參數檢測正常范圍均以x±s表示,從而確定生育正常組各項動態參數的正態分布范圍。
(二)生育障礙組的檢驗
1.實驗材料
實驗用公犬:分別選取少精液(精液量<2m l)、精液密度低(密度<0.8億每毫升)、精子畸形(畸形率>15%)、精子活力低(A級精子<30%)的2周歲以上,體成熟、性成熟的公犬進行分組比較檢測。
飼養條件及實驗軟件同前。
2.實驗方法
使用人工手握法對實驗犬分別進行采樣、保存。利用W LJ Y-9000精子質量檢測系統對公犬的精液動態參數以及精子活力、精子活率進行檢測。所獲得的數據通過SAS數理統計軟件進行計算,與生育正常組進行比較分析,從而獲得各種參數對于犬生育能力的影響程度。
(三)不育組的檢驗
1.實驗材料
實驗用公犬:選取年齡均為2周歲以上,體成熟、性成熟,無生育能力的公犬。飼養地點設在某警犬基地。
飼養條件及實驗軟件同前。
2.實驗方法
使用人工手握法對實驗犬進行分別采樣、保存。利用W LJ Y-9000精子質量檢測系統對公犬的精液動態參數(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR 9項參數)以及精子活力、精子活率進行檢測。所獲得的數據通過SAS數理統計軟件進行計算,并與生育正常組進行比較分析,確定造成犬不育的主要動態參數有哪些?
(一)實驗過程
1.采精
對于首次采精和主動防御性強的公犬而言,犬主人必須在場,采精前先讓公犬排尿,清理公犬腹部及包皮,剪掉包皮周圍的毛,用0.1%高錳酸鉀溶液將公犬包皮附近洗凈消毒,并用生理鹽水沖洗干凈。
2.鏡檢
采集后的精液,在17℃環境下經過20m in的液化。打開W LJ Y-9000精子質量檢測系統的動態分析功能,輸入犬相關信息。點擊“活動顯示”按鈕,點擊“計算分析”按鈕,再點擊視野中任意位置開始分析,在數據選用對話框中點擊選擇“采用此組數據”,提示是否結束分析下一場次時選“是”,此時進入下一場次的分析,移動檢測板使視野發生變化,再點擊視野中任意位置開始分析,如此反復,取6~8個視野。此時結束分析,檢測系統自動生成該精液樣本的各項動態參數數據。
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(二)實驗結果
本實驗是對利用W LJ Y-9000精子質量檢測系統所檢測出的各項動態參數(VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、M AD、LIN、W O B、STR、活力、活率)數值,采用數理統計方法中根據數據的分布范圍及數量,選取數據中95%置信區間進行計算,從而獲得的正常生育組各項精液動態參數的正態分布范圍。
正態分布范圍的計算公式:
X±1.96S (注: S表示標準差)
(注: x表示平均值,n表示樣標本數量)
1.生育正常組檢驗結果(見表1、表2)

正常組犬動態參數數據(表1)

正常組犬動態參數數據(表2)

4

生育障礙組犬動態參數數據(表3)
3.不育組檢驗結果(見表5、表6)
(三)實驗分析
由于實驗所獲得的樣本數據數量十分有限,為了能獲取較有參考依據的種公犬精液動態參數總體情況,僅靠這些數據是遠遠不夠的。所以需要使用生物統計學中關于利用樣本均數和樣本標準差求總體均數的方法對所獲得的數據進行計算、驗證,以確定所獲得的數據是否具有參考價值,能否做為衡量精液質量的具體標準,故需要對所求數據中各項動態參數的T進行檢驗,檢驗結果是總體均數相等,故承認其存在研究的價值。

生育障礙組犬動態參數數據(表4)

不育組犬動態參數數據(表5)

不育組犬動態參數數據(表6)
1.正常組與生育障礙組的比較(見表7)

精液動態參數的t值表(表8)

精液動態參數的各t值表(表9)
由此可以得到各數據的t值,具體見表8。
2.正常組與不育組的比較(見表9)
3.相關性檢測
為了獲曉實驗數據間是否具有相關性。故取9項動態參數中的VSL作為統計計算中的自變量,其余參數為因變量(LIN、W O B、STR為參數比值,故不列入分析范圍),來求取各數據間的關系。利用公式:

(注:r表示相關性)
可求得:

VSL與各動態參數的相關性(表10)
由此可見:VSL在變化過程中與VAP、BCF、VCL存在著顯著的相關性,而于MAD、ALH的相關性不顯著。為了檢測其與VAP、BCF、VCL所存在的關系,則進一步利用公式對其進行一元線性回歸求解。結果:隨著精子直線速度(VSL)的上升,其曲線速度(VCL)、平均路徑速度(VAP)上升明顯,而鞭打頻率(BCF)呈下降趨勢。
(一)經實驗檢測的30例樣本經過t檢驗證實:具有生物統計參考價值,能夠做為衡量精液質量總體情況的具體標準。
(二)正常精液組和異常精液組各項精子動態參數比較,均存在統計學差異; 隨著精子活動的下降,曲線速度(VCL)、直線速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)、平均移動角度(MAD)、側擺幅度(ALH)、前向性(STR)下降明顯,鞭打頻率(BCF)呈上升趨勢,而直線性(LIN)、擺動性(W OB)差異無顯著性。
(三)單個動態參數間無顯著性差異,即無法直接作為判斷公犬生育能力的標準。由此而得出的結論是:警犬精子動態參數不一定能提供直接判斷公犬生育能力的診斷依據,但是能在評估精液質量時,提供重要的參考價值,可以對公犬繁殖能力的診斷、治療和研究提供充分的依據。
(作者單位:公安部南昌警犬基地,330100)
(編輯:李 冰)