艾司西酞普蘭對首發抑郁患者血清bFGF和VEGF及MMP-9的影響*

仲照希，楊鴿，呂路線

(新鄉醫學院第二附屬醫院早期干預二科，新鄉 453002)

艾司西酞普蘭對首發抑郁患者血清bFGF和VEGF及MMP-9的影響*

仲照希，楊鴿，呂路線

(新鄉醫學院第二附屬醫院早期干預二科，新鄉 453002)

目的 探討艾司西酞普蘭對首發抑郁患者血清堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、血管內皮細胞生長因子(VEGF)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平的影響及其與臨床特征間的關系。方法 43例首發抑郁患者設為治療組，口吸取艾司西酞普蘭，開始劑量為5 mg·d-1，劑量范圍10～20 mg·d-1，治療6周。采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)方法檢測43例抑郁患者艾司西酞普蘭治療前及治療4周后bFGF、VEGF、MMP-9水平。37例健康人設為對照組；采用漢密爾頓抑郁量表24項(HAMD-24)、漢密爾頓焦慮量表(HMMA)評定治療前及治療4周后的抑郁、焦慮癥狀。結果 治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前分別為(13.59±3.75)，(258.80±63.34)，(218.32±56.90) pg·mL-1，治療后分別為(14.23±4.35)，(259.76±66.45)，(209.71±55.26) pg·mL-1，對照組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平為(10.53±3.38)，(235.49±54.72)，(159.13±52.78) pg·mL-1，治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前及治療4周后差異無統計學意義(P>0.05)，但均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。治療組不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平對比差異無統計學意義(P>0.05)。治療組HAMD-24及HAMA治療前分別為(34.65±7.97)及(14.61±5.54)分，治療后分別為(19.88±3.85)及(8.34±2.79)分。血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁患者的病情輕重無明顯的相關性(P>0.05)。結論 bFGF、VEGF、MMP-9可能參與抑郁發作的病理生理機制。

艾司西酞普蘭；抑郁癥；堿性成纖維細胞生長因子；血管內皮細胞生長因子；基質金屬蛋白酶-9

抑郁癥是一種高患病率、高自殺率、高疾病負擔的嚴重精神疾病，其病因研究涉及遺傳、神經生化、病理生理、影像學等多個領域，但其確切病因及病理機制目前仍不明確。血管形成發生于機體的多種重要的生理病理過程，如胚胎形成、損傷愈合、腫瘤及炎癥等。血管形成過程與多種細胞因子協同作用有關，如堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial-growth factor，VEGF)、血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)等，這種相互作用的結果促進血管的形成[1]。這些因子與中樞神經系統疾病的關系目前已成為臨床研究的熱點之一。初步研究表bFGF、VEGF、MMP可能被作為研究癲、血管性認知障礙、阿爾茨海默病、帕金森綜合征等中樞神經系統病情狀態、程度和預后的指標，有重要的臨床價值[2-6]。這些因子與抑郁癥的發病有何關系，藥物治療對其有何影響？此類研究國內外尚少，且結論不一致。本研究探討首發抑郁患者艾司西酞普蘭治療前、后血清bFGF、VEGF、MMP-9水平變化及與臨床特征間的關系，為抑郁癥的病理生理機制提供線索。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 治療組為新鄉醫學院第二附屬醫院住院的患者，入組時間為 2013年5月—2014年2月。入組標準：①符合《疾病和有關健康問題的國際統計分類》第10次修訂本(ICD-10)抑郁癥的診斷標準，患者首次發病，漢密爾頓抑郁量表(Hamilton depression scale，HAMD)17項版本評分≥18分；②年齡 16～45歲；③總病程≤5年；④入組前14 d未服用過抗抑郁藥，且既往連續服用抗抑郁藥時間≤14 d；⑤患者或家屬簽署知情同意書。排除標準：①并發腦器質性疾病及腦外傷；②合并嚴重軀體疾病；③并發其他類型精神疾患；④尿妊娠試驗陽性和哺乳期女性；⑤服用抗氧化藥或神經營養類藥物；⑥入組前2周未用過其他抗抑郁藥，如用過則需2周清洗期，清洗期末進行HAMD評定。共入組患者43例，男21 例，女22 例；年齡16～45歲，(26.33±8.19)歲；發病年齡16～44 歲，平均(25.21±8.05)歲，總病程1～30個月，平均(9.06±7.12)個月； HAMD-24總分(34.65±7.97)分，漢密爾頓焦慮量表 (Hamilton anxiety scale，HAMA)癥狀(14.61±5.54)分；患者體重指數(body mass index， BMI)為(22.06±3.19) kg·(m2)-1。對照組來自新鄉醫學院第二附屬醫院的身體健康職工及新鄉市的身體健康居民，無精神疾病和其他遺傳性疾病家族史，非妊娠或哺乳期女性，年齡與性別比與患者組匹配。共 37例，男20 例，女17例，年齡16～45 歲，(27.77±7.34)歲；對照組BMI(22.91±3.88)kg·(m2)-1。兩組在性別比(χ2=0.49 )、年齡(t=0.95)、BMI(t=1.62)均差異無統計學意義(P>0.05)。本試驗研究通過新鄉醫學院第二附屬醫院醫學倫理委員會審查，所有患者家屬及對照組簽署知情同意書。

1.2 治療方法 治療組口服艾司西酞普蘭 (商品名：來士普，西安楊森制藥公司， 批準文號：國藥準字J20100165)，開始劑量為5 mg·d-1， 劑量范圍10～20 mg·d-1。治療 6周。研究期間若出現失眠，可于晚間口服少量苯二氮類藥物改善睡眠，但禁用其他抗抑郁藥物和抗精神藥物或電休克治療。

1.3 量表評定 HAMD-24可歸納為焦慮/軀體化、體質量、認知障礙、情緒節律(日夜)變化、阻滯、睡眠障礙、絕望感等7個因子。總共24項，總分96分，<8分視為患者沒有抑郁癥狀，8～<20分，可能有抑郁，20～<35分，肯定有輕或中等度的抑郁，≥35分，為嚴重抑郁。HAMA分為軀體性和精神性焦慮兩個因子。總共14項，總分56分，10～<14分，可能有焦慮，14～<21分，肯定有焦慮，21～<29分，肯定有明顯焦慮，≥29分，為嚴重焦慮。量表由2名經過訓練的精神科高年資醫師評定，一致性測定Kappa>0.89。

1.4 收集標本 所有入組者均在早晨6：30—7：30經肘靜脈取血5 mL，后立即分離血清，-20 ℃冰箱保存，測定前置于室溫或冷水中復融，混勻，4 ℃，3 000 r·min-1(有效離心半徑10 cm)離心 5 min，取血清待測定。

1.5 觀察指標

1.5.1 bFGF測定 采用R&GSystems公司生產的人重組bFGF Sandwich酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immuno-sorbent assay,ELISA)藥盒靈敏度為1 pg·mL-1。抗人bFGF單克隆抗體包被的酶標板孔加入稀釋液后加入bFGF標準品及待檢血清孵育，洗滌后加入辣根過氧化物酶標記的抗人bFGF單克隆抗體加底物顯色液。用Bio -Rad3550型酶標儀測定波長450 nm的吸光度(A)值，繪制標準曲線，計算出血清bFGF含量。

1.5.2 VEGF測定 采用ELISA法，將純化的VEGF抗體包被微孔板，制定固相抗體，將血清標本原加入包被單抗的微孔中，然后與辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)標記的 VEGF 抗體結合，加底物顯色，用酶標儀測定吸光度(A值)，經計算得出實際濃度。

1.5.3 MMP-9測定 采用雙抗體一步夾心法ELISA試驗。往預先包被MMP-9抗體的包被微孔中依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，溫育60 min并徹底洗滌。 用底物TMB顯色，TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的MMP-9呈正相關。 用酶標儀在波長450 nm下測定A值，計算樣品濃度。

2 結果

2.1 血清bFGF、VEGF、MMP-9水平 治療組血清bFGF、VEGF、MMP-9水平治療前后比較均差異無統計學意義(均P>0.05)，但均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

與對照組比較，t為2.05～2.46，*1P<0.05

2.2 不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平 治療組男性血清bFGF、VEGF、MMP-9水平分別為(13.78±1.32)，(258.67±63.12)，(218.98±16.37) pg·mL-1，女性為(13.16±1.97)，(259.86±66.52)，(10.38±2.56) pg·mL-1，對照組男性血清bFGF、VEGF、MMP-9水平分別為(10.38±2.56)，(235.98±20.20)，(158.98±14.45) pg·mL-1，女性為(10.68±3.21)，(235.09±20.98)，(159.31±14.08) pg·mL-1，兩組不同性別對比均差異無統計學意義 (P>0.05)。

2.3 治療組治療前、后HAMD-24、HAMA評分 治療組HAMD-24及HAMA治療前分別為(34.65±7.97)，(14.61±5.54)分，治療后分別為(19.88±3.85)，(8.34±2.79)分， 治療組治療前后差異有統計學意義(t=4.09，4.62，P<0.05)。

2.4 治療組HAMD-24、HAMA評分與血清bFGF、VEGF、MMP-9的相關分析 通過Pearson相關分析顯示，治療組治療前后HAMD-24、HAMA評分與血清bFGF、VEGF、MMP-9水平無明顯的相關性(P>0.05)。

3 討論

抑郁癥的病因至今未明，最被廣泛接受的包括遺傳、中樞神經遞質假說和應激理論等。當前有部分研究著重于抑郁癥的細胞及分子生物學機制，腦神經元再生障礙及應激所造成的海馬等區域的神經元損傷是其中熱點，尤其是神經營養的假說，該假說認為腦部的腦源性神經營養因子水平降低會導致抑郁，而抗抑郁治療通過提高海馬水平發揮抗抑郁作用，包括血管內皮生長因子、成纖維細胞生長因子等其他神經營養因子或生長因子可能也參與抑郁癥的病理生理過程及治療機制[7-8]。

bFGF具有促進中胚層及神經外胚層細胞增殖的堿性多肽，它作為重要的創傷愈合因子，參與體內多種組織創傷修復過程，它還與一些細胞的趨化性相關，通過改變細胞的趨化性，誘導或抑制細胞特殊蛋白的合成或分泌，從而調節內分泌或神經功能。bFGF在腦內的分布隨發育而變，刺激神經元祖細胞和神經膠質細胞的有絲分裂和分化，在中樞神經系統形成中扮演重要角色[9]。

VEGF是血管發生和神經營養因子，在神經科學領域具有重要的作用。在另外的小樣本研究中發現，無論是未經藥物治療的抑郁癥患者與正常對照組比較，或是藥物治療前后無明顯癥狀變化的患者，其血清水平均未發現顯著相關性[10-11]。

MMPs是蛋白酶超家族，可由正常組織細胞、炎癥細胞或腫瘤細胞等多種細胞合成分泌，其主要功能為降解細胞外基質成分，對基質重構有重要意義，是重要的炎癥因子，參與血管重構和再生過程。MMP-9(明膠酶B)與中樞神經系統的關系密切，成為神經系統疾病研究的熱點[12]。MMP-9可以直接引起神經元損傷，基質金屬蛋白酶抑制劑有神經保護作用。近年尚未出現有關MMP與抑郁癥的相關性研究。因此本試驗選取MMP-9作為基質金屬蛋白酶的代表進行研究。

艾司西酞普蘭是一種高度選擇性5-羥色胺再攝取抑制藥，它對其他受體親和力低下或無作用，因此不良反應發生率很低，耐受性良好，具有良好的抗焦慮、抗抑郁的作用[11]。

本研究結果顯示，首發抑郁患者與健康對照者的血清bFGF、VEGF、MMP-9水平，經統計學分析差異有統計學意義，首發抑郁患者血清bFGF、VEGF、MMP-9水平高于健康對照者，這提示血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁發病有一定的關系。本研究結果顯示血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與治療組HAMD-24、HAMA評分之間無相關關系。這提示血清bFGF、VEGF水平變化可能是抑郁發病的保護因素，MMP-9可能是抑郁發病的促進因素，但其程度尚不是抑郁患者病情輕重的指標，艾司西酞普蘭治療4周尚不能明顯影響其水平。治療組與對照組男女不同性別血清bFGF、VEGF、MMP-9水平未發現有明顯差異，表明抑郁癥在形成和進展過程中是多種因素作用的結果。

目前為止，關于血清bFGF、VEGF、MMP-9水平與抑郁癥的關系研究比較少，且結果亦不完全一致，考慮原因在于性別、年齡/檢測方法、病例組成及樣本含量等的差異所致。本研究首次在首發的抑郁患者中進行血清bFGF、VEGF、MMP-9水平的研究，并分析了抗抑郁藥物的影響。本研究仍存在一些局限和困惑：外周狀況只是間接證據，然而由于中樞樣本獲得困難，研究開展受限；作為血管形成過程中的重要細胞因子——bFGF、VEGF、MMP-9對于長發育和損傷修復均有積極作用，但為何在本研究中首發抑郁患者中血清bFGF、VEGF、MMP-9水平均高于正常人，三者之間有何聯系，抗抑郁藥物對其有何影響。由于本研究樣本量較小，且僅觀察治療前、后短期的水平，bFGF、VEGF、MMP-9水平異常到底是一種素質因素還是狀態指標，其水平變化與抗抑郁藥物是否相關，均需要進一步研究。盡管如此，本研究結果仍提示bFGF、VEGF、MMP-9可能對抑郁癥的發生有一定影響，尚需要更多的實驗來探討bFGF、VEGF、MMP-9在抑郁癥中的作用。

[1] 孫秀梅，孫新華.整合素αVβ3與多種血管形成細胞因子的相互作用[J].國際口腔醫學雜志，2006， 33(5)：340-342.

[2] 董雪媛，邢雪松.堿性成纖維細胞因子在血管性癡呆大鼠中的研究進展[J].沈陽醫學院學報， 2012， 14(4)：239-240.

[3] 何建明.血管內皮生長因子與缺血性腦卒中的研究進展[J].浙江臨床醫學， 2010， 12(7)：767-769.

[4] 余琴，余巨明.基質金屬蛋白酶-9與癲[J].川北醫學院學報， 2012， 27(2)：190-194.

[5] 郭曉紅，盧宏，牛瑞娜，等.阿爾茨海默病患者血清基質金屬蛋白酶2和9水平的測定[J].鄭州大學學報(醫學版)， 2014， 49(1)：137-139.

[6] 朱彥，王冬青，李月峰，等.炎癥因子對首發抑郁患者雙側海馬區細胞代謝影響的磁共振波譜研究[J].中華行為醫學與腦科學雜志，2013，22(4)：163-164.

[7] PISER T M.Linking the cytokine and neurocircuitty hypo-theses of depression：a translational framework for discovery and development of novel anti-depressants[J].Brain Behav Immun，2010，24(4)：515-524.

[8] YAMAMORI H， HASHIMOTO R， ISHIMA T， et al.Plas-ma levels of mature brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in treatment-resistant schizophrenia treated with clozapine[J].Neurosci Lett，2013，556：37-41.

[9] 張明園.精神科評定量表手冊[M].長沙： 湖南科學技術出版社， 1998：205-211.

[10] HASHIMOTO K，SHIMIZU E，KOMATSU N.Increased levels of serum basic fibroblast growth factor in schizophrenia[J].Psychiatry Res，2003，120(3)：211-218.

[11] HOFFINANN A， BREDNO J， WENDLAND M， et al.High and low molecular weight fluorescein isothiocyanate(FITC)-dextrans to assess blood brain barrier disruption： technical considerations[J].Transl Stroke Res，2011，2(1)：106-111.

[12] FULZELE S， PILLAI A.Decreased VEGF mRNA expre-ssion in the dorsolateral prefrontal cortex of schizophrenia subjects[J].Schizophr Res，2009，115(2-3)：372-373.

2014-11-17

2014-12-29

*河南省科技廳項目(132300413216)

仲照希(1978-)，男，河南駐馬店人，主治醫師，博士，研究方向：精神疾病免疫學研究。電話：(0)13849372081，E-mail：1252714532@qq.com。

呂路線(1958-)，男，河南滑縣人，主任醫師，博士，從事精神科診治工作。電話：(0)18537339275，E-mail：llxllx1223@163.com。

R97143；R749.41

B

1004-0781(2015)10-1308-04

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.10.012