血必凈注射液對缺血再灌注損傷保護機制的研究進展

沈　玨　柳開忠

血必凈注射液對缺血再灌注損傷保護機制的研究進展

沈玨柳開忠

缺血再灌注損傷（Ischemia reperfusion injury，IRI）是指在缺血的基礎上，恢復血流后組織損傷反而加重，甚至發生不可逆性損傷的現象。目前認為，IRI的重要發病環節與自由基損傷作用、細胞內鈣超載、白細胞與微血管功能障礙有關［1］。除了微循環障礙，肝臟枯否細胞（Kupffer cells，KC）和中性粒細胞的活化導致很多炎性因子的合成，進一步加劇缺血期造成的損傷，這些因子中最常見的有腫瘤壞死因子（TNF-α），白細胞介素-1（IL-1），白細胞介素-6（IL-6），前列腺素（PG）和活性氧簇（reactive oxygen species，ROS），尤其是超氧離子（O2-）和過氧化氫（H2O2）［2～4］。隨著臨床研究的不斷深入，血必凈注射液的應用范圍也有所拓寬。尤其是在對一些急重癥如急性腎衰竭、膿毒癥、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）和多臟器功能障礙綜合征（MODS）的病情的緩解和改善方面，有較確切的療效［5］。近年來研究表明，血必凈注射液對缺血再灌注損傷也具有保護作用，現就其作用機制綜述如下。

1　抗氧化應激

有氧代謝過程所產生的活性氧簇（ROS）在機體正常的微環境中是可以通過不同的抗氧化機制中和的，當組織受到缺血再灌注時，ROS在再灌注的早期大量產生，引起強烈的細胞氧化，從而對肝、腦、心、腎等產生嚴重的損傷［6］。馬巍等［7］對大鼠肝缺血再灌注后急性肺損傷的研究表明，肝臟缺血再灌注可引起急性肺損傷，通過血必凈預處理后，在相同時相點血必凈組大鼠肺組織中過氧化物酶（MPO）含量、肺組織濕/干比、PaO2、肺組織光鏡檢查較肝缺血再灌注組均明顯改善，說明血必凈通過抑制中性粒細胞在肺內集聚、過度活化、呼吸爆發，減少氧自由基，從而減輕對肺組織的損傷。其它研究相繼證實，肝缺血再灌注后肝、腎組織中脂質過氧化產物丙二醛（MDA）含量明顯升高，超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著下降，提示肝缺血再灌注后肝臟本身及腎臟發生了明顯的脂質過氧化損傷，導致肝、腎功能受損；血必凈預處理后，明顯降低肝、腎組織MDA含量，提高SOD活性，改善肝腎功能，降低血清天冬氨酸轉氨酶、丙氨酸轉氨酶及肌酐濃度，說明血必凈可通過減少氧自由基生成，提高SOD活性等對肝缺血再灌注后肝、腎損傷發揮保護作用［8，9］。李銳等［10］報道，血必凈注射液通過刺激熱休克蛋白70提前表達并顯著升高，引發了內源性腎臟保護機制，從而減輕腎缺血再灌注損傷。

2　調節免疫功能

當腸道發生缺血再灌注損傷時，可以引起細菌毒素移位進而發生全身炎癥反應綜合征（SIRS）甚至是MODS。正常的腸黏膜免疫屏障功能是有效阻止腸道細菌及毒素移位的重要保障之一，而腸道形態學的完整性是維持正常腸道屏障功能的基礎。張云杰等［11，12］發現，缺血再灌注后小腸黏膜破壞，黏膜變薄，絨毛明顯減少，隱窩變淺，出現明顯的形態學改變。隨著再灌注損傷的進行，腸壁免疫細胞中凋亡基因P53的表達逐漸增加；應用血必凈注射液能有效地保護腸黏膜，減輕腸道損傷，并可抑制腸壁免疫細胞P53基因的表達，其可能通過這些作用來調節腸黏膜免疫細胞，增加免疫屏障功能，從而保護腸道免疫屏障，減少腸道細菌移位和腸源性內毒素血癥的發生，進而防止MODS的發生。

3　調整炎癥反應

細胞因子連鎖反應是缺血再灌注損傷中的一個關鍵因素，再灌注損傷中最常涉及到的細胞因子有TNF-α、IL-1和IL-6，三者在機體炎癥反應的各個環節發揮作用［13］。肝臟的缺血能明顯誘導再灌注期間肝竇內皮細胞表達細胞間粘附分子-1（ICAM-1），增強肝竇內皮細胞的粘附力，促進再灌注血流中的白細胞在肝竇內滯留，進而引發一系列病理生理改變［14］。張云杰［15］研究顯示，小腸缺血再灌注大鼠血清水平TNF-α、IL-1、IL-6均較正常大鼠顯著升高，血必凈注射液能有效地降低小腸缺血再灌注大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-6水平，減輕機體的炎癥反應，減少SIRS、MODS的發生。此外，血必凈注射液還被證實可以通過下調小腸缺血再灌注大鼠TNF-α、IL-1、IL-6的表達，降低小腸缺血再灌注致大鼠急性肺損傷［16］；通過抑制肢體缺血再灌注大鼠ICAM-1、核因子-κB（NF-κB）表達上調，對骨骼肌缺血再灌注腎損傷有明顯保護作用［17，18］；通過抑制肝缺血再灌注大鼠TNF-α、IL-β、IL-6、IL-8、ICAM-1等炎性細胞因子的釋放，對肝缺血再灌注后全身性炎癥起到明顯的治療作用［19］。郭剛等［20］最近的研究表明，在肺血栓栓塞后肺動脈再通過程中TNF-α明顯升高，提示其與肺缺血再灌注損傷有直接聯系；而血必凈注射液可有效抑制TNF-α的表達，且具有劑量及時間依賴性，對肺缺血再灌注損傷具有一定的抑制作用。

4　保護內皮細胞/改善微循環

血必凈注射液主要成分中的丹參可改善微循環，有較強的抗脂質過氧化和抗氧自由基作用［21］。川芎中含川芎嗪、阿魏酸、川芎哚、川芎酚、大黃酚等，具有抗氧化、清除氧自由基，增加超氧化物岐化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性［22］，赤芍含赤芍總甙，對缺氧、一氧化氮和氧自由基損傷有保護作用，其機制可能針對細胞內鈣超載環節［23］。當歸多糖有較強的清除活性氧自由基的能力，紅花水溶液成分具有清除自由基，抑制小鼠肝勻漿脂質過氧化產生的作用。

在IRI中，一氧化氮（nitric oxide，NO）和內皮素（endothelin，ET）之間的平衡被打亂，誘發的血管收縮和肝血竇腔隙的狹窄，促進了白細胞的流出，使它們與毛細血管壁更加貼近［24］，進而導致血管內皮細胞損傷及微循環障礙。早在十余年前王今達通過研究發現，血必凈不僅有拮抗內毒素作用，還可通過防止血小板及白細胞的中毒性損害，部分抑制血栓素的爆發釋放，保護血管內皮正常合成釋放前列腺素，從而防治凝血機制的紊亂和微循環障礙的發生［25］。近年來，楊麗娜等［26］在對兔心肌缺血再灌注損傷的研究發現，血必凈注射液可以保護心肌細胞，減少酶的釋放；提高SOD活性，減少氧自由基造成的損傷；減輕炎癥反應；保護血管內皮細胞，改善局部血液循環，減輕心肌缺血，且術前連續給藥對于兔心肌缺血再灌注損傷有較強的保護作用。魏克華等［27］研究表明，血必凈注射液不僅可以下調IRI大鼠血清TNF-α、IL-6、MPO水平，而且還能降低血清ET含量，提高NO含量，從心肌梗死范圍百分比、光鏡結果、電鏡結果可直觀看出其對缺血再灌注損傷心肌的保護作用。衛來燕等［28］報道，血必凈注射液對肢體缺血再灌注損傷也具有一定的保護作用，其保護作用主要表現在穩定中性粒細胞，降低誘導型一氧化氮合酶（iNOS）活性，減少iNOS源性NO；增高結構型一氧化氮合酶（cNOS）活性，使內皮型一氧化氮合酶（eNOS）源性NO增加，減少對細胞的毒性作用，減輕細胞水腫，降低細胞膜通透性，恢復細胞的正常功能。

5　展望

綜上所述，雖然血必凈注射液相關的動物實驗已經大量開展，其對缺血再灌注損傷動物模型的保護作用得到了不少研究證實，但目前血必凈注射液應用于臨床患者的研究報道甚少。作者認為有必要對其應用范圍再行探索和考察，以便進一步拓寬其臨床應用范圍，為減輕和防治組織及臟器缺血再灌注損傷提供新的臨床依據。

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310022 浙江省腫瘤醫院重癥醫學科