沙棘果實化學成分的分離與鑒定

【摘 要】目的：探討沙棘果實中的化學成分.方法：使用HPLC柱色譜分析和Sephadex LH20、硅膠柱等方法對沙棘果實提取物進行分離純化，通過核磁共振氫譜、碳譜和物質的理化性質等數據來確定所分離化合物的結構.結果：實驗共得到β谷甾醇、β豆甾醇、5羥基糠醛、胡蘿卜苷、4羥基苯甲酸、齊墩果酸、2羥基丁二酸4甲酯、3，4二羥基苯甲酸和γN（2呋喃基甲基）丁胺酸等9種化合物.結論：將沙棘萃取物進行化學和波譜法分離鑒定可有效分離鑒定沙棘有效成分.

【文獻標識碼】A

文章編號：20956894（2015）0412302

收稿日期：20150115；

接受日期：20150130

作者簡介：郭 震.Email：guozhen141＠sina.com

0　引言

沙棘（Hippophae rhamnoides Linn.）屬于薔薇目胡頹子科沙棘屬植物，由于其耐寒、耐酷熱、耐風沙及干旱的氣候，在我國西北部地區大面積生長 ［1］.在中醫中講沙棘性溫，味酸澀，主要有消食化滯、祛痰止咳、活血化瘀等功能，此外還能降低膽固醇、治愈心絞痛、防治冠狀動脈粥樣硬化性心臟病等作用，因此具有很高的藥用價值，被正式收入《中華人民共和國藥典》 ［2］.有研究 ［3］報道，沙棘中主要的成分有萜類、黃酮類和皂苷類，本研究將沙棘果實的萃取物進行分離，通過理化性質和廣譜數據分析進行鑒定，得到了一定的結果，現報道如下.

1　材料和方法

1.1 一般材料 選擇我國西北地區生產的中國沙棘（H.rhamnoides subsp.sinensis）的果實作為研究材料.

1.2 試驗儀器 MPS3顯微熔點測定儀；ARX300核磁共振儀；薄層色譜硅膠GF254；柱色譜硅膠；葡聚糖凝膠Sephadex LH20等.

1.3 試驗試劑 甲醇、乙醇、硫酸、石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇等.

1.4 方法 使用95%體積分數的乙醇將新鮮的中國沙棘果實5 kg進行3次提取回流，每次2 h，得到乙醇回收浸膏215 g.將上述得到的浸膏懸浮于水中，分別使用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等有機溶劑進行萃取，依次得到85 g、15 g、30 g、46 g的回收浸膏.使用石油醚丙酮在硅膠柱中對石油醚層萃取物進行洗脫，反復純化后經HPLC分離得到化合物A和化合物B.氯仿層萃取物反復純化后得到化合物C、D；乙酸乙酯層萃取物使用氯仿甲醇梯度洗脫后經硅膠柱反復純化，再經葡聚糖凝膠Sephadex LH20純化得到化合物1和5，正丁醇層萃取物分離使用氯仿甲醇梯度洗脫后經硅膠柱反復純化，使用葡聚糖凝膠Sephadex LH20純化后得到化合物2、H，經HPLC分離得到化合物I和A.

2　結果

化合物A：其在石油醚中呈白色針晶，在體積分數為10%的硫酸乙醇溶液中呈紫色，LiebermannBurchard反應呈陽性，和已知的標準品β谷甾醇的理化性質完全一致.

化合物B：在氯仿甲醇洗滌液中呈白色針晶，在體積分數為10%的硫酸乙醇溶液中呈紫色，LiebermannBurchard反應呈陽性，和已知的標準品β豆甾醇的理化性質完全一致.

化合物C：其甲醇溶液為無色油狀物，在體積分數為10%的硫酸乙醇溶液中為墨綠色，其理化性質和波普數據與報道的一致，初步鑒定為5羥基糠醛 ［4 ］.

化合物D：在甲醇氯仿溶液中為白色顆粒狀結晶，在體積分數為10%的硫酸乙醇溶液中呈紫色，LiebermannBurchard反應呈陽性，和已知的標準品胡蘿卜苷的理化性質完全一致.

化合物E：甲醇溶液中呈白色針狀結晶，溴甲酚綠、三氯化鐵鐵氰化鉀反應呈陽性，是一類含有酚羥基的羧酸類物質，其理化性質和波普數據與化合物4羥基苯甲酸一致.

化合物F：易溶于氯仿，其熔點為304～306℃，LiebermannBurchard反應呈陽性，其光譜分析結果為齊墩果烷性三萜的特征碳信號，理化性質和波譜數據和文獻報道齊墩果酸一致 ［5］.

化合物G：其溴甲酚綠反應呈陽性說明其含有COOH，根據其化學結構中存在甲氧基、亞甲基碳信號等譜學規律、碳譜、氫譜等相關數據可推測其為2羥基丁二酸4甲酯.

化合物H：為白色針晶，熔點198～200℃.溴甲酚綠、三氯化鐵鐵氰化鉀反應結果均為陽性，說明該物質中同時含有酚羥基的羧酸類物質，其波譜結果和理化性質與3，4二羥基苯甲酸完全一致.

化合物I：為物色結晶，其溴甲酚綠反應呈陽性，光譜分析結果顯示其含有亞甲基質子信號和芳香質子信號，其理化性質和γN（2呋喃基甲基）丁胺酸.

3　討論

沙棘中含有較高的生物活性成分，作為經濟樹種，其果實生物活性成分的提取工藝有很多種，其中沙棘黃酮、沙棘果膠、沙棘黃色素等提取的工藝各不相同 ［6］.本研究從沙棘果實原材料中分離得到九種化合物，通過化學、譜學方法對這九種化合物進行鑒定，有黃酮類化合物、芬酸類化合物、甾醇類化合物、脂類化合物等，分別為β谷甾醇、β豆甾醇、5羥基糠醛、胡蘿卜苷、4羥基苯甲酸、齊墩果酸、2羥基丁二酸4甲酯、3，4二羥基苯甲酸和γN（2呋喃基甲基）丁胺酸.

綜上所述，使用硅膠柱、色譜方法等可有效分離鑒定沙棘中的有效成分.