蔬菜農(nóng)藥殘留速測結(jié)果異常的原因及對策

劉定喜，鄒征歐

(1 衡陽縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測站，湖南衡陽 421200；2 衡陽市糧油生產(chǎn)技術(shù)站，湖南衡陽 421001)

蔬菜農(nóng)藥殘留速測結(jié)果異常的原因及對策

劉定喜1，鄒征歐2

(1 衡陽縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測站，湖南衡陽 421200；2 衡陽市糧油生產(chǎn)技術(shù)站，湖南衡陽 421001)

介紹了蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)的原理，分析了檢測中出現(xiàn)結(jié)果異常的各種原因，并提出了減少檢測結(jié)果誤差，提高檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的對策。

蔬菜；農(nóng)藥殘留速測；結(jié)果異常；對策

農(nóng)藥是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)必不可少的生產(chǎn)資料，安全合理適量施用農(nóng)藥，對保障農(nóng)業(yè)生產(chǎn)安全、提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量、促進農(nóng)民增收都具有積極意義。農(nóng)藥的過度使用對農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全造成威脅[1～4]。農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全已經(jīng)引起了政府和廣大消費者的重視，在保障供給的同時如何保障質(zhì)量安全，加強農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的監(jiān)管已經(jīng)成為各級政府的一項重要工作，農(nóng)藥殘留檢測的重要性不言而喻。

目前，我國常用的蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法是酶抑制法。該方法應(yīng)用方便，操作簡單，成本較低，且檢測結(jié)果準(zhǔn)確，適合在蔬菜基地的市場準(zhǔn)入監(jiān)測及農(nóng)貿(mào)市場和超市等領(lǐng)域例行監(jiān)測工作，特別適合縣級以下基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢機構(gòu)在面廣、點多、量大、農(nóng)藥殘留風(fēng)險高的區(qū)域進行農(nóng)藥殘留監(jiān)測[5]。蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法可對上市前的蔬菜進行速測，將農(nóng)藥殘留超標(biāo)的蔬菜控制在市場之外，以保障廣大消費者的安全，杜絕因農(nóng)藥殘留超標(biāo)發(fā)生的中毒事件。但在實際檢測過程中，該方法還存在一些問題。筆者結(jié)合多年工作實踐，分析了問題出現(xiàn)的原因并提出解決對策，以期為保證檢測數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性，解決檢測數(shù)據(jù)結(jié)果異常的問題提供參考。

1 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)的原理

有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶活性，造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導(dǎo)。根據(jù)這一昆蟲毒理學(xué)原理，推測如果蔬菜中農(nóng)藥殘留量越多，酶的抑制率就越高，反之則越低。蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測實踐中，通過檢測酶被抑制程度，可以判斷蔬菜中農(nóng)藥殘留的情況[6]。

蔬菜農(nóng)藥殘留速測實踐中，樣品檢測結(jié)果異常問題主要集中在兩個方面：一是檢測結(jié)果出現(xiàn)負(fù)數(shù)；二是檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性。

2 檢測結(jié)果出現(xiàn)負(fù)數(shù)的原因及對策

(1)操作中儀器的校準(zhǔn)平衡，比色皿的清潔，試劑配置的一致性，試劑的平衡等因素都會導(dǎo)致較大負(fù)數(shù)出現(xiàn)。

解決此類問題的關(guān)鍵在于經(jīng)常校準(zhǔn)調(diào)試農(nóng)藥殘留速測儀，以確保儀器的測試準(zhǔn)確度。此外，在實驗室將農(nóng)藥殘留速測儀開機預(yù)熱半小時以上能保證儀器平衡穩(wěn)定。

針對試劑配置不一致的問題，用蒸餾水、純凈水或去離子水配置磷酸鹽緩沖液可以杜絕測量過程的干擾。在冬季氣溫較低時，可以使用玻璃棒邊攪邊超聲，讓其完全溶解，以保證磷酸鹽緩沖液的濃渡一致。

在配置顯色劑與底物時，為保證磷酸鹽緩沖液的整體一致性，應(yīng)選擇同批次蔬菜樣的磷酸鹽緩沖液進行配置；當(dāng)酶從冰箱中拿出時，應(yīng)放在裝有冰塊的器皿中與顯色劑及底物在常溫下平衡幾分鐘后再開始測試。

(2)不規(guī)范操作是檢測結(jié)果出現(xiàn)負(fù)數(shù)的另一誘因。操作員未按正確的操作規(guī)程使用移液槍，或操作手法不熟練，都會導(dǎo)致樣品中加入酶的量比空白組多，致使樣品3 min前后的吸光值之差比空白組3 min前后的吸光值之差大，從而出現(xiàn)較大的負(fù)數(shù)。

操作不規(guī)范的關(guān)鍵在于移液槍的不當(dāng)使用與維護。測試前檢查移液槍是否調(diào)準(zhǔn)，上槍嘴時要按正確的方法上緊，防止槍嘴底部在移取過程中出現(xiàn)松動，測試結(jié)束后將移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。此外，還要定時校準(zhǔn)驗證、清洗移液槍。測試中第一次移取酶液時可將移液槍嘴反復(fù)在酶液中進行潤洗，確保移液槍在移取酶液時的準(zhǔn)確度。

(3)加入底物時速度過慢，或因底物試劑已被污染也會導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)負(fù)數(shù)。底物加入速度太慢，先加入底物的比色皿中的酶在放入測定儀之前已開始水解底物，水解物再與顯色劑結(jié)合，致使樣品3 min前后的吸光值之差比空白3 min前后的吸光值之差還要大，從而產(chǎn)生了較大的負(fù)數(shù)。

快速加入底物能在很大程度上解決檢測結(jié)果出現(xiàn)負(fù)數(shù)的問題。將底物迅速、均勻地加入待測樣品中，其后搖勻并放入農(nóng)藥殘留速測儀進行測定。

3 檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性的原因及對策

(1)酶的活性降低或失去活性。因為酶不能水解底物，因此無法與顯色劑結(jié)合生成黃色，其結(jié)果與提取液中存在農(nóng)藥時酶的活性被農(nóng)藥抑制一樣，造成了假陽性的產(chǎn)生。

貯藏過程中要保證酶試劑在0～5℃溫度條件下保存，開封啟用后應(yīng)盡量在一周內(nèi)使用完。新開封的酶液為10 mL，理論上可以做200個樣品。如果當(dāng)次檢測樣品數(shù)量在100個以內(nèi)，可以將新開封的酶分成兩份，不用的一份酶繼續(xù)放在冰箱內(nèi)保存。為了保證酶的活性，在樣品檢測過程中到把酶放置在裝有冰塊的器皿中，夏天冰塊溶化快，要及時倒出溶化的水并添加新的冰塊。在加酶液時，為了避免人體溫度影響酶的活性，盡量用手握住酶液試劑瓶的上端而不是底部，且酶液試劑瓶不宜長時間拿在手中。加好試樣液及顯色劑后，將比色皿放在37～38℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)半個小時左右，提高酶的整體活性(檢測中空白樣3 min后與3 min前吸光值差要求在0.4～0.8)。

(2)某些本身含有辛辣物質(zhì)的蔬菜，如辣椒、蔥蒜類等可抑制酶的活性；某些有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子、番茄等，可影響吸光值，直接使樣本3 min后與3 min前吸光值的差變小，從而出現(xiàn)假陽性。

對于本身含有辛辣物質(zhì)的蔬菜，如辣椒，檢測時可以將辣椒切成長段，以降低辛辣物質(zhì)滲入提取液中造成不必要的干擾，盡量避免假陽性的產(chǎn)生；蔥蒜類蔬菜可以采用整株浸取法以降低假陽性的產(chǎn)生。對于本身有很高色素含量的蔬菜，如黑茄子，可以通過在樣品制備時減少表皮成分增加肉質(zhì)成分的方法來降低色素的干擾，盡量避免假陽性的產(chǎn)生；番茄則可以采取在樣品制備時增加表皮成分減少肉質(zhì)成分來降低色素的干擾。對于含有辛辣物質(zhì)或者色素含量很高的蔬菜樣品，在振蕩提取時不能時間過長、轉(zhuǎn)速過多，振蕩時間在2 min以內(nèi)、振蕩轉(zhuǎn)速在200 r/min左右為宜，從而避免提取液中辛辣物質(zhì)或者蔬菜色素過多的干擾，防止假陽性的產(chǎn)生。

(3)當(dāng)蔬菜切得太碎，蔬菜碎沫混進比色皿中后，碎沫的沉降影響吸光值，使樣本3 min后與3 min前吸光值的差變小，導(dǎo)致計算出的抑制率提高，產(chǎn)生假陽性。

解決這類問題的關(guān)鍵在于在樣品制備的尺寸，要求大小均勻合理，對于像花菜、白苦瓜等易碎蔬菜樣應(yīng)該切得大塊一點。在樣品振蕩提取時轉(zhuǎn)速不能過快、時間不宜過長，避免將樣品震碎，振蕩之后應(yīng)當(dāng)將試樣液中的碎沫沉淀3 min左右。在移取試樣時要把樣品瓶斜著慢吸為準(zhǔn)，防止碎沫吸進比色皿影響吸光值的變化。

[1] NY/T 448-2001.蔬菜上有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法[S].

[2] 朱國念.農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2008.

[3] 趙 研，趙洪江.談沈陽市蔬菜農(nóng)藥殘留檢測現(xiàn)狀[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2009(24)：330.

[4] 楊 慧，王富華.我國蔬菜農(nóng)藥殘留速測技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境與發(fā)展，2008(5)：67-72.

[5] 趙艷華.農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留速測中常見影響因素的探討[J].吉林農(nóng)業(yè)，2012(3)：14-15.

[6] 趙亞玲.蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測的影響因素及解決措施[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2010(12)：329.

2015-05-13

劉定喜(1980-)，男，湖南衡陽縣人，助理農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測工作。

S481+.8

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1001-5280(2015)04-0441-02

10.3969/j.issn.1001-5280.2015.04.29