近紅外光纖光譜法在清熱解毒口服液中黃芩苷含量快速檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值分析

何紅暉

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130021）

近紅外光纖光譜法在清熱解毒口服液中黃芩苷含量快速檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值分析

何紅暉

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130021）

目的 分析近紅外光纖光譜法在清熱解毒口服液黃芩苷含量快速檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法隨機(jī)抽取80份清熱解毒口服液，均采取近紅外光纖光譜法檢測(cè)，利用HPLC測(cè)量黃岑苷含量。結(jié)果 清熱解毒口服液中黃岑苷含量的R20.915，RMSEE為0.040，RPD為3.44，RMSEP為0.039。通過(guò)對(duì)樣品NIR預(yù)測(cè)值以及HPLC分析值的比值進(jìn)行驗(yàn)證，分析預(yù)測(cè)回收率，平均回收率為100.3%。結(jié)論 使用近紅外光纖光譜法快速檢測(cè)清熱解毒口服液中黃岑苷含量，可快速準(zhǔn)確分析黃岑苷含量，應(yīng)用價(jià)值確切，值得使用。

近紅外光纖光譜法；清熱解毒口服液；黃芩苷含量

清熱解毒口服液是臨床常用口服藥，具有清熱解毒的功效，由金銀花、黃岑等藥物加工而成，可治療發(fā)熱面赤、咽喉腫痛等癥狀，療效確切，值得肯定。為了消除假劣產(chǎn)品，臨床規(guī)定以HPLC定量分析黃岑苷含量［1］。傳統(tǒng)測(cè)量方法操作復(fù)雜，檢測(cè)速度慢，且無(wú)法實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)控生產(chǎn)質(zhì)量，且無(wú)法快速篩查基層現(xiàn)場(chǎng)假劣產(chǎn)品。近紅外光譜（NIRS）是借助化學(xué)計(jì)量學(xué)方法處理數(shù)據(jù)，提取所含的定性和定量，快速準(zhǔn)確，富含化學(xué)信息，在中藥檢測(cè)應(yīng)用中日益廣泛。現(xiàn)本文以清熱解毒口服液作為對(duì)象，分析NIRS對(duì)黃芩苷含量進(jìn)行快速檢測(cè)，總結(jié)如下。

1　材　料

1.1藥品和試劑：選取80份清熱解毒口服液（吉林市雙士藥業(yè)有限公司），黃岑苷對(duì)照品為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，色譜純?yōu)榧状迹‰p蒸水，剩下為分析純。

1.2方法：取HPLC測(cè)定黃岑苷含量，使用色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)相甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.3），流速為每分鐘1.0 mL，檢測(cè)波長(zhǎng)在276 nm，柱溫30 ℃。

NIRS采集。光譜儀分辨率為8 cm，掃描次數(shù)為32次，參比為水，使用液體光纖采集光譜，每個(gè)樣品實(shí)施3次平行實(shí)驗(yàn)，取平均值，使用光譜儀專用軟件，基線校正光譜信號(hào)，光譜范圍在4000～12000 cm。

將清熱解毒口服液樣品黃岑苷含量值及近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，使用化學(xué)計(jì)量學(xué)中的偏最小二乘法建立定量校正模型，選取60個(gè)樣品作為校正樣品集，剩下20個(gè)樣品作為驗(yàn)證集。使用相關(guān)系數(shù)（R2），估計(jì)誤差均方根（RMSEE）對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，模型結(jié)構(gòu)越合理，表現(xiàn)為R2越接近1，RMSEE越小。使用相對(duì)分析誤差（RPD）值詳細(xì)評(píng)價(jià)模型，若PRD誤差＞3，表明定標(biāo)具有良好效果，建立模型可以在實(shí)際檢測(cè)中使用，若2.5＜RPD＜3，表明NIRS定量分析該成分是可靠的；若RPD＜2.5，則表明建模型在實(shí)際中無(wú)法應(yīng)用。采用RMSEP作為衡量指標(biāo)，若RMSEP越小，說(shuō)明模型具有較強(qiáng)的預(yù)測(cè)性能和推廣能力。

2　結(jié)　果

2.1黃岑苷含量測(cè)定情況分析：80份樣品，黃岑苷含量最低的是1.805 g/L，最高的是2.534 g/L；與梯度分布和建模要求相符。

2.2選擇光譜預(yù)處理方法：選擇微分處理掃描得到原始吸收光譜，以免影響基線校準(zhǔn)，以此分辨重疊峰，使分辨率和靈敏度明顯提高。但在放大了導(dǎo)數(shù)光譜法，使相鄰波長(zhǎng)點(diǎn)差異放大，也會(huì)放大噪聲，降低了信噪比，因此，在選擇光譜預(yù)處理方法時(shí)，應(yīng)針對(duì)不同的檢測(cè)樣本優(yōu)先選擇針對(duì)性的光譜預(yù)處理方法，在本次研究中選擇介導(dǎo)數(shù)光譜法具有最好的預(yù)測(cè)效果。

2.3選擇光譜范圍：近紅外全波段光譜一般會(huì)存在冗余信息，選擇光譜波段時(shí)，使包含待測(cè)組分的信息量最大，避免干擾到背景，以此改善模型性能，增強(qiáng)最佳預(yù)測(cè)效果。在光譜范圍中，6100～7450 cm段內(nèi)，有較為不明顯的吸光度，噪音干擾大，會(huì)對(duì)模型的預(yù)測(cè)能力造成影響；11996～7498 cm和6100～5446 cn有較為豐富的信息量。為進(jìn)一步選取建模譜段，根據(jù)不同波段對(duì)比，通過(guò)R2、RPD及RMSEE進(jìn)行考察，說(shuō)明表明11996～7498 cm和6100～5446 cn區(qū)間能夠符合近紅外定量分析模型方法的常規(guī)要求。

2.4選擇的主成分?jǐn)?shù)：偏最小二乘法建立校正模型，選擇主成分?jǐn)?shù)會(huì)在很大程度上影響模型的預(yù)測(cè)能力，有較多主成分?jǐn)?shù)，使模型包含較多測(cè)量噪音，存在過(guò)多擬合現(xiàn)象；主成分?jǐn)?shù)太少，會(huì)使建模信息不全，降低了預(yù)測(cè)能力。因此，需選擇最佳的維數(shù)建模，對(duì)R2、RPD等值的影響。

2.5建立和驗(yàn)證校正模型：通過(guò)結(jié)一階導(dǎo)數(shù)處理NIR光譜后，于11996～7498，6100～5446建立最優(yōu)校正模型。此模型R2為0.915，RMSEE為0.040，RPD為3.44，RMSEP為0.039。通過(guò)對(duì)樣品NIR預(yù)測(cè)值以及HPLC分析值的比值進(jìn)行驗(yàn)證，分析預(yù)測(cè)回收率，平均回收率為100.3%。說(shuō)明，建立的模型性能良好。

3　討　論

清熱解毒口服液是臨床常用清熱解毒的藥劑口服液，由黃岑、連翹、金銀花、玄參、板藍(lán)根、梔子、知母等中藥制成，諸藥合奏清熱解毒功效；尤其是對(duì)赤躁口渴、發(fā)熱面赤、咽喉腫痛，具有顯著療效。但在目前藥品中，若缺乏有效檢測(cè)控制方法，極易出現(xiàn)偽冒假劣產(chǎn)品［2］，對(duì)患者的生命安全及身心健康造成嚴(yán)重影響。在2010年頒布的《中國(guó)藥典》［3］中，對(duì)清熱解毒口服液中指標(biāo)性成分黃岑苷以HPLC進(jìn)行定量分析。在測(cè)量黃岑苷時(shí)，采用傳統(tǒng)分析方法進(jìn)行處理分析，但需要前處理，具有較高成本，操作復(fù)雜，難以快速檢測(cè)，且保證藥品生產(chǎn)過(guò)程的在線質(zhì)量檢測(cè)，無(wú)法快速篩查基層現(xiàn)場(chǎng)的假劣產(chǎn)品，具有一定的局限性。近紅外光譜（NIRS）指分子的振動(dòng)頻譜，通過(guò)吸收分子中的CH、OH及NH基團(tuán)的倍頻及合頻［4］，具有較弱的吸收譜帶強(qiáng)度，譜帶復(fù)雜，重疊嚴(yán)重。在采用NIRS時(shí)，多利用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法處理數(shù)據(jù)，在提取定性、定量信息時(shí)，與經(jīng)典的定量方法相關(guān)分析，構(gòu)建數(shù)學(xué)模型，有效判斷待測(cè)組分的含量和相似度。NIRS具有快速、準(zhǔn)確性［5］，能夠?qū)崿F(xiàn)在線檢測(cè)要求。通過(guò)本次研究，清熱解毒口服液中黃岑苷含量的R20.915，RMSEE為0.040，RPD為3.44，RMSEP為0.039。通過(guò)對(duì)樣品NIR預(yù)測(cè)值以及HPLC分析值的比值進(jìn)行驗(yàn)證，分析預(yù)測(cè)回收率，平均回收率為100.3%。由研究結(jié)果可以看出，模型結(jié)構(gòu)具有較高合理性，具有較強(qiáng)的預(yù)測(cè)性能和推廣能力。通過(guò)NIRS和化學(xué)計(jì)量學(xué)技術(shù)結(jié)合，并使用偏最小二乘法，具有快速、準(zhǔn)確、無(wú)污染的特點(diǎn)，能夠快速分析清熱解毒口服液中黃岑苷的含量。但也需要進(jìn)一步優(yōu)化各種參數(shù)，以此在檢測(cè)工作中得到更為廣泛的應(yīng)用。

［1］聶翠翠，彭家鋼，楊瑞芬，等.高效液相色譜法測(cè)定清熱解毒口服液中綠原酸和黃芩苷的含量［J］.湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，13（6）:33-35.

［2］白雁，李珊，龔海燕.近紅外光纖光譜法快速檢測(cè)清熱解毒口服液中黃芩苷的含量［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（21）:109-112.

［3］董麗華，楊東華，高文吳.HPLC法測(cè)定清熱解毒口服液黃芩苷含量［J］.黑龍江醫(yī)藥，2005，18（4）:247-248.

［4］楊江豐，殷紅妹.清熱解毒口服液中黃芩苷和連翹苷及靛玉紅的含量測(cè)定［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2005，24（9）:819-820.

［5］王媛，范全民.HPLC測(cè)定清熱解毒口服液中綠原酸與黃芩苷含量［J］.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2011，12（1）:35-37.

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1671-8194（2015）16-0057-02