出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的陽性率調查分析

周佳子 董萍5006江蘇省蘇州大學附屬第一醫院4300江蘇省鹽城市射陽縣中醫院

出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的陽性率調查分析

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目的：探討造血干細胞移植術后并發出血性膀胱炎患者中BK病毒的陽性率。方法：造血干細胞移植術后并發出血性膀胱炎患者30例作為觀察組，30例健康成人為對照組，運用PCR檢測技術檢測尿中的BK病毒DNA。結果：觀察組26例檢測出BK病毒DNA，病毒尿持續陽性中位時間7周（2～14周），對照組均未檢出BK病毒。結論：造血干細胞移植術后出血性膀胱炎是常見的并發癥之一，在這些患者中病毒尿的發生率明顯增高，BK病毒可能參與出血性膀胱炎的發病過程。

BK病毒；出血性膀胱炎；造血干細胞移植

BK病毒是多瘤病毒家族亞成員之一，系DNA病毒，BK病毒廣泛感染人群，最新統計發病率7％～68％［1］。出現臨床癥狀的患者常限于免疫功能缺陷的個體，當機體免疫功能受抑制時復活，大量復制而致病［2］。出血性膀胱炎是造血干細胞移植后常見的并發癥之一［3］，嚴重影響移植后的生存率，導致多臟器的衰竭。除藥物和排異因素外，病毒感染尤其是BK病毒所引起的作用也越來越引起人們的重視。

資料與方法

2011-2012年收治接受造血干細胞移植后合并出血性膀胱炎患者30例，作為觀察組，同時選擇正常健康人30例作為對照組。收集兩組的尿液進行檢測。出血性膀胱炎按臨床檢驗結果分四個等級［4］：①Ⅰ級：鏡下血尿；②Ⅱ級：肉眼血尿；③Ⅲ級：肉眼血尿伴隨血凝塊；④Ⅲ-Ⅳ級伴有尿道梗塞導致腎功能損傷的表現。30例出血性膀胱炎患者中鏡下血尿9例、肉眼血尿18例、肉眼血尿伴隨血凝塊3例。

尿液DNA的PCR檢測：高速離心（8 000r/min，3min）取尿液上清200μL，用病毒基因組DNA提取試劑盒（北京康為世紀產品）提取病毒DNA。PCR檢測：正向引物：5'AGTCTTTAGGGTCTTCTACC3'，反向引物：5'GGTGCCAACCTATGCAACAG3'［5］；反應體系：總體積25μL，其中PCR-mixture 12.5μL（含0.1 U Taq酶，500μmol/L dNTP，3mmol/LMgCl2等），正向、反向引物各0.5μL，DNA模板5μL，滅菌雙蒸水6.5μL。反應條件：94℃5min，94℃45 s，57℃30 s，72℃30 s，共40個循環，72℃10min。BK病毒PCR產物176bp大小，用2％瓊脂糖凝膠電泳觀察。每次擴增均以雙蒸水為模板作為為陰性參照，BK病毒DNA為模板作為陽性參照。

統計學分析：應用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，采用χ2檢驗，t檢驗及方差分析等方法分析。P＜0.05為差異具有統計學意義。

結果

觀察組26例檢測出BK病毒DNA，病毒尿持續陽性中位時間7周（2～14周），對照組均未檢出BK病毒。

討論

雖然造血干細胞移植后BK病毒在患者尿中的檢出率顯著增高，但經統計學分析，病毒濃度與病毒尿的出現可能與年齡、供/受者CMV感染血清學狀態、性別、基礎疾病、預處理方案、供者來源、干細胞來源（骨髓/外周血）、移植后血液學重建速度、GVHD嚴重程度、GVHD預處理方案等臨床因素不存在顯著相關［6］。免疫功能低下的患者體內人類多瘤病毒被激活，近年來引發的相關疾病逐漸受到關注，如艾滋病合并JCV相關的進行性多灶性白質腦病（PML）。腎移植后患者并發BKV相關性腎病，導致暫時甚至永久性腎功能不全，是腎移植失敗的原因之一［7-8］。BK病毒感染、巨細胞病毒感染等因素可共同促進出血性膀胱炎的發生。

本研究結果顯示，觀察組26例檢測出BK病毒DNA，病毒尿持續陽性中位時間7周（2～14周），對照組均未檢出BK病毒。因此，造血干細胞移植術后出血性膀胱炎是常見的并發癥之一，在這些患者中病毒尿的發生率明顯增高，BK病毒可能參與出血性膀胱炎的發病過程。

［1］Miodosky M，Abdul-Hai A，Tsirigotis P，et al.Treatment of post-hem atopoietic stem cell transplantation hemorrhagic cystitiswith intravesicular sodium hyaluronate［J］.Bone Marrow Transplant，2006，38（7）：507-511.

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［5］Gorczynnska E，Turkiewicz D，Rybka k，et al.Incidence，clinical outcome，and management of virus-induced hemorrhagic cystitis in children and adolescents after allogeneic hematopoietic cell transplantation［J］.Biol Blood Marrow Transplant，2005，11：797-804.

［6］盧育洪，朱康兒，李揚秋，等.造血干細胞移植后檢出人類多瘤病毒尿的臨床分析［J］.腫瘤防治研究，2007，34：681-683.

［7］Hirsch HH.Polyomavirus BK nephropathy：a（re-）emerging complication in renal transplantation［J］.Am J Transplant，2002，2（1）：25-30.

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Investigation and analysis of BK virus positive in the urine of patients with hem orrhagic cystitis

Zhou Jiazi1，Dong Ping2
The First Hospital Affiliated to Suzhou University，Jiangsu Province 2150061
The Traditional Chinese Medicine Hospital of Sheyang County in Yancheng City，Jiangsu Province 2243002

Objective：To explore the BK virus positive in the urine of patientswith hemorrhagic cystitis after hematopoietic stem cell transplantation.Methods：30 cases of hemorrhagic cystitis patients after hematopoietic stem cell transplantation were as the observation group，and 30 cases of healthy adults were as the controlgroup.The BK virus DNA in urinewere detected using PCR detection technology.Results：26 cases of the observation group had BK virus DNA detected.Themedian duration of positive virus urine was 7（2～14）weeks.The control group had no BK virus detected.Conclusion：Hemorrhagic cystitis is one of common complications after hematopoietic stem cell transplantation，in which the virus in the urine has significantly higher incidence，and BK virusmaybe involved in the pathogenesis of hemorrhagic cystitisprocess.

BK virus；Hemorrhagic cystitis；Hematopoietic stem cell transplantation

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.1.82