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電鏡技術在病理診斷中的應用

2015-02-20 20:12:37李詩恒
長春中醫藥大學學報 2015年1期

李詩恒

(吉林大學臨床醫學院,長春130021)

臨床病理診斷往往被稱為診斷的金標準,目前電鏡診斷技術以其可以觀察到亞細胞結構的變化,廣泛應用于現代臨床病理診斷中,成為病理診斷中一項重要依據[1]。在對一些疑難雜癥的診斷中,電鏡技術在病理診斷中所發揮的作用更加明顯,許多病理改變發生在亞細胞水平上,可以使許多疾病早期即被發現,控制病情惡化。

1 電鏡技術在病理診斷中的應用

1.1 心肌活檢 心內膜心肌活檢(EMB)是診斷心臟移植術后排斥反應的金標準,現在已成為診斷心臟移植術后排斥反應的標準檢查方法[2]。而對于心肌淀粉樣變的患者心肌活檢也是確診的最直接且高度敏感的診斷方法。由于心肌活檢取材的局限性,常會被誤診為肥厚型心肌病、冠心病等。此時,應用電鏡技術可以避免因淀粉纖維在組織上沉積不均且較少時,剛果紅染色為陰性。對心肌淀粉樣變患者心肌超微結構觀察發現,沉積嚴重區域心肌細胞完全被淀粉樣纖維包繞,心肌細胞膜中斷不連續,心肌肌原纖維肌絲減少,排列紊亂,嚴重病變的心肌細胞心肌肌絲斷裂、崩解,肌節分離,結構模糊、消失,心肌細胞損傷嚴重。線粒體除出現形態改變、腫脹、形成空泡外,分布則出現兩種情況:部分患者線粒體積聚成堆,灶狀分布,心肌細胞結構往往較完整且周圍淀粉樣纖維少或無沉積;部分患者線粒體數量減少,患者往往心肌細胞結構不完整,損傷較嚴重,細胞周圍往往存在大量淀粉樣纖維沉積,提示可能病變較重、疾病晚期的表現,早期則可能出現積聚成堆[3]。在心肌活檢中,應用電鏡技術可以檢測出微小的病變,提高了病理診斷的準確性。

1.2 腎活檢 近年來,隨著科學技術的發展,影像學設備的更新及操作技能的提高,經皮腎活檢技術開展的較為廣泛,可以直接觀察腎臟病的腎臟形態學的改變,并能進行系列的觀察。經皮腎臟穿刺活檢技術是目前診斷腎臟疾病的重要手段之一,由于檢測的成功率高、病理結果分析確切,能夠為臨床采用準確的治療方案提供重要依據。因此,經皮腎臟穿刺活檢在臨床診斷和治療腎臟疾病中發揮了極其重要的作用[4]。腎臟疾病種類眾多,變化復雜,所以單一的檢查方法無法對其進行確診,必須是光學顯微鏡技術、免疫化學技術及電子顯微鏡技術聯合檢測。其中,電鏡技術在腎病病理診斷上起著決定性作用[5]。近年來電鏡技術不斷發展,推陳出新,在腎活檢的領域,加入了新的動力——冷凍超薄切片免疫電鏡技術。該技術可以較好的保持抗原活性,而且在觀察腎組織超微結構的同時可以進行免疫組織染色,檢測出是何種免疫復合物沉積所導致的腎臟疾病。朱小東等[6]發現該技術不但可以提高免疫反應的敏感性,還能較好地保存超微結構。活檢病理診斷不光應用于心臟、腎臟方面的疾病診斷,對于某些罕見遺傳性疾病的診斷亦有幫助[7]。

1.3 肺癌的診斷 在分化程度較低的肺癌中,利用常規方法進行病理診斷往往很困難,故需要利用免疫組織化學和電鏡技術聯合診斷,才能更準確地確定肺癌的組織分型。有關研究表明,鱗癌超微結構中可見張力原纖維;腺癌的超微病理學結構中100%可見緊密連接,卻沒有看到張力原纖維;腺鱗癌中既有張力原纖維又有緊密連接;肺小細胞癌中沒有張力原纖維和緊密連接,但存在神經內分泌顆粒[8-10]。電鏡下的超微結構不僅可以進行腫瘤來源的分析,還可以對同一種肺癌在亞細胞水平上進行分型,據此了解其肺癌的發展。如肺腺癌中電鏡下可以觀察到3種分泌顆粒:黏液顆粒、板層小體和管狀髓鞘脂以及Clara顆粒。根據3種分泌顆粒的種類及存在的不同,可以將肺腺癌進一步分為4個超微類型:Ⅰ型黏液細胞型、Ⅱ型肺泡細胞型、Ⅲ型Clara細胞型和混合型[11]。除此之外,肺黏膜相關淋巴組織型淋巴瘤也是一種需要通過超微結構診斷的罕見疾病。其在肺泡上皮和支氣管黏膜上皮周圍及肺泡腔內有大量的淋巴源性瘤細胞的浸潤,這種瘤細胞顯示淋巴細胞的形態特征。此外,還可見到個別細胞的細胞核不規則、扭曲、分葉或腦回樣,具有T淋巴細胞的形態特點[12]。

2 結語

電鏡技術豐富了對生物大分子、細胞、組織等形態學上的認識,同時在病理學的發展上,利用電子顯微鏡技術觀察到微小的病變,有利于臨床的早期診斷和疾病的分期分型,極大拓展了臨床視野。電鏡技術作為一種診斷上的輔助手段,還可以做到觀其形態知其功能,推測其基因改變、代謝紊亂等。單一的電鏡技術在病理學上的應用存在著較大的局限性,對于疑難病癥的診斷還要多種診斷技術的支持,以縮小診斷誤差。

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