淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)在兒科疾病診療中的應(yīng)用進(jìn)展

程玉萍

淋巴細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中起核心作用的主要細(xì)胞，在人體不斷生長(zhǎng)、發(fā)育、成熟的過程中，淋巴細(xì)胞的功能和特性也在發(fā)生變化。 機(jī)體的免疫功能與免疫表型密切相關(guān)，檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群可了解不同情況下機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，對(duì)監(jiān)控疾病的發(fā)生，探索其發(fā)病機(jī)制，指導(dǎo)臨床治療有重要的價(jià)值。近年來(lái)，越來(lái)越多的資料顯示，兒科多種疾病的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫功能異常有關(guān)[1-2]。 本文就淋巴細(xì)胞亞群與兒科多種疾病的關(guān)系以及在臨床診療中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 淋巴細(xì)胞亞群結(jié)構(gòu)及其功能

淋巴細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要細(xì)胞成分，按其功能和性質(zhì)分為T 細(xì)胞、B 細(xì)胞和NK 細(xì)胞。T 細(xì)胞是在胸腺中成熟的淋巴細(xì)胞，CD3+是其表面標(biāo)記。 按免疫表型和功能T細(xì)胞分為：輔助/誘導(dǎo)T 細(xì)胞(Th)、細(xì)胞毒性T 細(xì)胞(Tc）/抑制性T 細(xì)胞(Ts)和調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞(Treg),其表面標(biāo)記分別是CD4+、CD8+、CD4+CD25+。 Th 主要又分為Th1 和Th2 細(xì)胞，Th1 分泌γ 干擾素、白細(xì)胞介素2(IL-2)；Th2 分泌IL-4、5、6、10 等。Th 主要功能是輔助誘導(dǎo)其他免疫細(xì)胞，介導(dǎo)和增強(qiáng)免疫應(yīng)答，促使其他T 細(xì)胞分化成熟。 CD4+降低，反映機(jī)體免疫功能低下；CD4+增高， 反映機(jī)體免疫功能亢進(jìn)。Tc 能夠特異性殺傷靶細(xì)胞，具有抗病毒、抗腫瘤等調(diào)節(jié)作用；Ts 有重要的免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能；Treg 在抑制免疫應(yīng)答、維持機(jī)體免疫耐受及腫瘤免疫中起重要作用[3]。

兒童淋巴細(xì)胞免疫表型的表達(dá)與胸腺發(fā)育密切相關(guān)，特別是在嬰幼兒時(shí)期變化很大，多種免疫分子和細(xì)胞從無(wú)到有、從少到多、從幼稚到成熟[4]。嬰兒剛出生時(shí)，由于胸腺運(yùn)送大量T 細(xì)胞至外周組織，故淋巴細(xì)胞處于較高水平，但隨年齡增長(zhǎng)而減低。 嬰幼兒期CD4+較多， 且以Th2 為主，CD8+較少，CD4+/CD8+比值較高。 約2 歲后，CD4+、CD8+及其比值逐步接近成人水平[5]。B 細(xì)胞是產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，主要合成和分泌免疫球蛋白，發(fā)揮體液免疫調(diào)節(jié)作用。 其表面標(biāo)記是CD19+。 NK 細(xì)胞又稱為自然殺傷細(xì)胞，其表面標(biāo)記為CD16+/CD56+。 該細(xì)胞通過非特異性殺傷等途徑殺傷感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞等。 6 個(gè)月以下嬰兒體內(nèi)抗體大多是通過胎盤或初乳從母體獲得，對(duì)傳染病的預(yù)防具有一定作用。 隨著外界抗原物質(zhì)接觸增多、年齡增加及骨髓功能不斷完善,使兒童B 和NK 細(xì)胞數(shù)量由少變多，3 歲時(shí)已與青春期相近。 正常情況下，兒童機(jī)體內(nèi)淋巴細(xì)胞亞群保持著一定數(shù)量和比例，當(dāng)各成分?jǐn)?shù)量或比例失調(diào)時(shí)，機(jī)體免疫功能將發(fā)生紊亂， 從而導(dǎo)致多種疾病甚至腫瘤的發(fā)生。

2 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)在兒科疾病診療中的應(yīng)用

2.1 感染性疾病

2.1.1 肺炎 肺炎多是緣于病毒、細(xì)菌等病原體感染所致的肺部炎癥，是兒科的常見病、多發(fā)病，也是嬰幼兒死亡的主要原因[6]。許多研究顯示，各型肺炎患兒均有免疫功能紊亂。鄭曉莉等[7]對(duì)92 例細(xì)菌性肺炎、支原體肺炎、病毒性肺炎患兒研究結(jié)果顯示，3 組患兒的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值均顯著降低，細(xì)菌性肺炎、支原體肺炎時(shí)CD8+水平升高。 說(shuō)明肺炎患兒機(jī)體免疫功能降低，對(duì)病原體的清除能力減弱，是肺炎發(fā)生的危險(xiǎn)因素之一。該研究還發(fā)現(xiàn)，3 組患兒Treg 均明顯增高， 過高的Treg 抑制了機(jī)體免疫應(yīng)答，使大量病原體復(fù)制與存活，導(dǎo)致了機(jī)體慢性感染狀態(tài)的持續(xù)。

2.1.2 傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis，IM) IM 是由EB 病毒（EBV）感染所致的感染性疾病，兒童較常見。 人體B 細(xì)胞上具有EBV 受體，故B 細(xì)胞先受累。 受累的B 細(xì)胞增殖激發(fā)T 細(xì)胞及NK 細(xì)胞，隨之發(fā)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，使患兒出現(xiàn)高熱、咽頰炎及淋巴細(xì)胞增生等一系列癥狀[8]。在病程進(jìn)展中，由于免疫功能不足，可導(dǎo)致機(jī)會(huì)性感染，甚至有發(fā)生腫瘤的危險(xiǎn)[9]。 陸巧英等[10]對(duì)40 例IM 患兒研究顯示，IM 患兒的CD3+、CD8+明顯升高，CD4+、CD4+/CD8+比值明顯降低， 表明IM 患兒細(xì)胞免疫功能、 調(diào)節(jié)功能都存在異常， 致使機(jī)體抗病毒能力減弱，產(chǎn)生IM 相關(guān)癥狀。 因此，掌握IM 患兒淋巴細(xì)胞亞群變化規(guī)律，對(duì)有效治療尤其是防范EBV 相關(guān)疾病的發(fā)生至關(guān)重要。

2.2 血液病

2.2.1 再生障礙性貧血(aplastic anemia，AA) AA 多數(shù)病因不詳，近年來(lái)隨著免疫學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，其免疫發(fā)病機(jī)制日益受到重視。Jian 等[11]研究發(fā)現(xiàn)，AA 患者外周血Th1/Th2 和Tc1/Tc2 比例明顯升高， 表明AA 患者的Th 和Tc比例失調(diào)，出現(xiàn)了細(xì)胞免疫功能紊亂。也有研究報(bào)道，與對(duì)照組兒童比較，AA 患兒CD4+/CD8+比值明顯倒置，CD4+、CD4+/CD8+比值與Hb、WBC 呈一定程度的負(fù)相關(guān)， 表明CD4+細(xì)胞中產(chǎn)生造血負(fù)調(diào)控因子的細(xì)胞即Th1 較高，導(dǎo)致細(xì)胞毒性作用增強(qiáng)，造血抑制作用明顯；而CD8+與Hb、WBC 呈一定程度的正相關(guān)，機(jī)體出現(xiàn)了Th 格局向Th1 偏移的狀況。這對(duì)AA 患兒的臨床診斷及免疫治療有指導(dǎo)意義[12]。

2.2.2 白血病 王艷榮等[13]觀察了71 例急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)患兒治療前后T 細(xì)胞亞群變化。 發(fā)現(xiàn)ALL 患兒化療前CD3+、CD4+、CD8+與正常兒童比較明顯減低，化療緩解組其指標(biāo)恢復(fù)正常， 而未緩解組其指標(biāo)無(wú)明顯改變，復(fù)發(fā)組其指標(biāo)再次出現(xiàn)異常，提示ALL 患兒存在細(xì)胞免疫功能低下，T 細(xì)胞的異常程度與疾病進(jìn)展、緩解、預(yù)后有相關(guān)性。 隨后人們發(fā)現(xiàn)，ALL 患兒Treg 數(shù)量明顯增多，常與NK 細(xì)胞數(shù)量減少相伴隨。Treg 在體內(nèi)外能有效抑制NK 細(xì)胞，致使NK 細(xì)胞數(shù)量減少，從而影響了其對(duì)腫瘤細(xì)胞的廣譜殺傷作用[14]。

2.3 自身免疫病

2.3.1 自身免疫性血小板減少癥(autoimmune thrombocytopenic purpura，AITP) AITP 是以血小板減少、黏膜、皮膚出血為特點(diǎn)好發(fā)于兒童的出血性疾病。 早期研究認(rèn)為，AITP 是由于血小板被自身抗體致敏再被單核巨噬細(xì)胞吞噬破壞所致。 但最新研究顯示，AITP 患者也存在著細(xì)胞免疫功能紊亂，并且在AITP 的發(fā)病中起關(guān)鍵性的作用[15]。 張紅等[16]報(bào)告，與正常對(duì)照組比較，AITP 組CD4+、CD4+/CD8+比值明顯減低，CD8+、CD19+明顯增高,表明AITP患兒機(jī)體的T、B 淋巴細(xì)胞都出現(xiàn)了異常。 進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn), 急性組CD19+高于慢性組，CD3+低于慢性組，提示急性AITP 是以體液免疫功能亢進(jìn)為主, 使用糖皮質(zhì)激素治療最有效；慢性AITP 則以細(xì)胞免疫功能亢進(jìn)為主，應(yīng)用免疫抑制藥物會(huì)收到較好的效果。

2.3.2 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 （systemic lupus erythematosus，SLE） SLE 是累及多系統(tǒng)、 多器官臨床表現(xiàn)復(fù)雜的自身免疫性疾病。 兒童SLE 較成人臨床癥狀嚴(yán)重，預(yù)后更差。高姍等[17]報(bào)告顯示，SLE 患兒NK 和Treg 明顯降低，表明SLE 患兒存在免疫系統(tǒng)紊亂， 機(jī)體不能產(chǎn)生抑制CD4+的作用，在CD4+活化作用下，B 細(xì)胞持續(xù)增殖產(chǎn)生多種自身抗體導(dǎo)致組織器官的損傷。 成傳芳等[18]經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，SLE腎炎患兒T 細(xì)胞和Tc 均明顯增高；而Th、Th/Tc 比值、NK細(xì)胞明顯低于無(wú)腎炎患兒，SLE 患兒的SLEDAI 評(píng)分與B細(xì)胞呈正相關(guān)，與NK 細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，表明SLE 患兒體內(nèi)B 細(xì)胞的大量增殖與疾病活動(dòng)性有著密切關(guān)系。

2.4 其他 近年來(lái)Treg 的免疫抑制作用在臨床得到很好運(yùn)用。 Kwon 等[19]證實(shí)，益生菌能誘導(dǎo)CD4+CD25-T 細(xì)胞向Treg 轉(zhuǎn)化，提高Treg 數(shù)量，從而糾正Th1/Th2 平衡紊亂，是治療兒童哮喘的有效方式。 多項(xiàng)研究顯示，Th17 數(shù)量和功能改變、促炎因子的釋放與自身免疫性葡萄膜炎、膽道閉鎖等疾病有關(guān)[20-21]。 腫瘤患兒化療后T 細(xì)胞免疫重建監(jiān)測(cè)，對(duì)于防治機(jī)會(huì)性感染及改善腫瘤預(yù)后有重要意義[22]。

綜上所述， 檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群評(píng)估機(jī)體免疫功能，探討它們?cè)诩膊“l(fā)生、發(fā)展中的作用，已成為兒科多種疾病診療監(jiān)測(cè)的一項(xiàng)重要手段，它能幫助醫(yī)師增強(qiáng)對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)和提高治愈率，但仍有許多問題尚待解決。 進(jìn)一步研究和探討淋巴細(xì)胞亞群與兒科多種疾病的相互關(guān)系，對(duì)于兒童疾病的診治、預(yù)防必將具有更大的理論意義和更為廣闊的臨床應(yīng)用前景。

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