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大孔吸附樹脂AB- 8分離肉桂原花青素的研究

2015-02-24 06:36:22張加研雷福厚劉祖廣
生物質化學工程 2015年1期
關鍵詞:標準

姜 倩,張加研,雷福厚,劉祖廣

·研究報告——生物質活性成分·

大孔吸附樹脂AB- 8分離肉桂原花青素的研究

姜 倩1,張加研,雷福厚2,劉祖廣2

(1.西南林業大學 材料工程學院,云南 昆明 650224;2.廣西民族大學 廣西林產化學與工程重點實驗室,廣西 南寧 530006)

采用AB- 8大孔吸附樹脂分離肉桂原花青素, 將1 000 mg肉桂原花青素初提物溶解在少量60%乙醇中,制得的濃溶液勻速加入吸附柱中,分別用10%、50%、70%、100%體積分數的乙醇對吸附在樹脂上的原花青素進行梯度洗脫。從10%乙醇的洗脫液中可以得到F10290 mg,從50%乙醇的洗脫液中可以得到F50150 mg,從70%乙醇的洗脫液中可以得到F70410 mg,從100%乙醇的洗脫液中可以得到F10080 mg。4部分中,純度最高的為F10,為90.03%,純度最低的為F100,為42.11%。洗脫過程中原花青素回收率達到93%。分析不同體積分數的乙醇洗脫液中原花青素平均聚合度和抗氧化性,結果顯示10%~50%乙醇洗脫液中主要為低聚體,而70%~100%乙醇洗脫液中主要為高聚體,10%乙醇洗脫液中原花青素的抗氧化性最高,對DPPH ·清除的IC50為0.91 g/L。

原花青素;分級處理;抗氧化性

通常所稱的肉桂為樟科喬木植物肉桂(CinnamomumcassiaPresl)的干皮和粗枝皮[1],肉桂樹的嫩葉(桂枝)、幼嫩果實(桂丁)、葉都可以入藥[2]。在我國肉桂主要分布于廣西、廣東,其次是海南、云南、福建,而四川、江西、貴州、湖南、浙江、臺灣南部也有少量的栽培,到2000年為止,全國肉桂產量占世界的38.1%[3],而廣西、廣東兩省肉桂產量占我國肉桂產量的95%以上[4]。廣西作為我國最大的肉桂產區,主要分布于防城與西江流域[5]。原花青素屬黃酮類物質,以兒茶素、表兒茶素及其取代物作為結構單元,具有多種生物活性,在食品、保健品、化妝品等領域具有廣泛的應用前景[6],1995年被美國公眾評為最受歡迎的10種植物藥之一[7]。按照原花青素聚合度的大小,通常將二~四聚體稱為低聚原花青素(OPC),五聚體以上的稱為多聚原花青素(PPC),OPC與PPC相比,OPC在抗氧化、酶抑制、預防心血管疾病、抗癌、抗炎止痛、止血、增進免疫調節,促進心臟缺血后復蘇,防止動脈硬化,減少對皮膚的刺激和抗糖尿病等方面有顯著的生物活性[8],其在體內的抗氧化能力是VE的50倍、Vc的20倍[9]。Gu等[10]對41種食品中原花青素的含量進行評價,發現肉桂中原花青素含量最高,然而其中高聚原花青素占49.3%,高聚原花青素由于受到空間位阻的影響,生物活性降低。因此為了有效發揮原花青素的抗氧化性,需對原花青素進行分級處理,富集原花青素低聚體成分,提高原花青素生物功效。本實驗采用資源豐富的廣西肉桂為原材料,提取的原花青素以及用AB- 8大孔吸附樹脂對肉桂原花青素按聚合度進行分離,以期為肉桂原花青素的工業化生產及應用提供參考。

1 實 驗

1.1 材料與儀器

無水乙醇、甲醇、丙酮、香草醛、鹽酸(分析純,上海國藥集團有限公司);(+)-兒茶素標準品、(- )-表兒茶素標準品、原花青素標準品(國家標準物質檢定所), 1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH ·),AB- 8大孔吸附樹脂。TU-1810DASPC型紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司),Agilent 1200series 高效液相色譜儀。

1.2 肉桂原花青素的提取

1.2.1 原花青素的提取 分別稱取5 000.0 mg 肉桂粉末(0.078~0.178 mm)于500 mL三口燒瓶中,分別量取蒸餾水、無水乙醇、 60%乙醇、無水丙酮各150 mL,置于預熱的50 ℃恒溫水浴鍋中,安裝好冷凝管、磁力攪拌器攪拌,啟動攪拌裝置提取1.5 h,隨后取出燒瓶并冷卻至室溫,過濾后,濾液利用石油醚萃取,萃取液用旋轉蒸發器于45±5 ℃減壓干燥,得到干燥肉桂原花青素初提物,稱質量,利用公式(1)計算出初提物提取率。

(1)

式中:y—初提物提取率,%;m—肉桂粉末質量,mg;m1—初提物質量,mg。

1.2.2 初提物中原花青素含量以及原花青素提取率測定 在實驗室現有條件下用香草醛-鹽酸法測定原花青素的含量[11],稱取2 mg初提物,置于10 mL比色管中,用甲醇定容,將其配制成0.2 g/L的初提物甲醇溶液,取0.5 mL初提物甲醇溶液加入10 mL比色管中后,依次加入3 mL 40 g/L的香草醛-甲醇溶液,1.5 mL濃鹽酸,加塞搖勻,在20±1 ℃避光條件下反應15 min后,于500 nm處測其吸光度,利用(+)-兒茶素標準品建立標準曲線,稱取10 mg(+)-兒茶素標準品,甲醇溶解定容至25 mL,質量濃度為0.4 g/L,混勻(避光保存)。分別取0、 2、 4、 6、 8、 10 mL至10 mL比色管中,甲醇定容至 10 mL(質量濃度分別為:0、 0.08、 0.16、 0.24、 0.32、 0.4 g/L)。在上述條件下反應并測定吸光度,以此繪制(+)-兒茶素標準曲線。利用標準曲線計算得到溶液中原花青素濃度,并利用公式(2)計算初提物中原花青素質量分數。

(2)

式中:y1—初提物中原花青素質量分數,%;ci—初提物甲醇溶液中原花青素質量濃度,g/L;Vi—初提物甲醇溶液體積,mL;mi—初提物質量,mg。

利用公式(3)計算出原花青素提取率。

(3)

式中:y2—原花青素提取率,%;y1—初提物原花青素質量分數,%;m—肉桂皮粉末質量,mg;m1—初提物質量,mg。

1.3 AB- 8大孔吸附樹脂對原花青素分級處理

1.3.1 原料的制備 選擇原花青素提取率最高的提取條件進行提取,提取后溶液用石油醚萃取,萃取后溶液用旋轉蒸發器于45±5 ℃溫度下蒸餾除去乙醇、水,既得所需原料樣品。

1.3.2 原花青素的分級 將1 000 mg肉桂原花青素初提物作為樣品溶解在少量60%乙醇中,制得的濃溶液勻速加入吸附柱中,依次用10%、 50%、 70%、 100%體積分數的乙醇溶液進行梯度洗脫,分批收集不同體積分數乙醇的洗脫液。

1.3.3 樣品原花青素含量及回收率測定 對各部分洗脫液于45±5 ℃溫度下旋轉蒸發回收溶劑,所得樣品分別標記為F10、F50、F70、F100,稱質量并利用公式(4)計算回收率。

(4)

式中:R—樣品回收率,%;mi—各部分洗脫液所得樣品質量,mg;m樣—上柱樣品質量,mg。

按照1.2.2節所述香草醛-鹽酸法測定樣品中原花青素含量。

1.4 平均聚合度的測定

1.4.1 測定原理 本試驗采用HPLC法測定聚合度,然而HPLC法不能直接測定原花青素(PC)的平均聚合度,測定之前先采用硫解法預處理,PC可在親核試劑存在的酸性條件下降解,末端的黃烷3-醇結構單元(兒茶素或表兒茶素)被釋放出來的同時,另一結構片段(延伸單元)中C環4位所形成的碳正離子易被適當的親核試劑捕捉,從而形成親核試劑附加產物。這兩個片段可直接由HPLC得到對應的峰面積,利用建立的(+)-兒茶素、 (- )-表兒茶素、硫解目標產物的峰面積標準曲線,計算得到對應的物質的量。然后利用公式計算聚合度。

1.4.2 色譜分析條件 色譜柱:Agilent Analytical Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,0.5 μm);流動相A:水(含TFA 0.1%),B:乙腈體系(含TFA 0.1%);梯度洗脫0~40 min (4%~25% B),40~45 min (25%~30% B),45~55 min(30%~95% B),55~65 min(95%~4% B);柱溫30 ℃;流速1.0 mL/min;進樣量0.01 mL;檢測波長280 nm。

1.4.3 標準曲線的建立

1.4.3.1 (+)-兒茶素標準曲線的建立 分別稱取(+)-兒茶素標準品0.000 1、 0.000 2、 0.000 6、 0.001 2、 0.001 8和0.002 8 mg,置于10 mL容量瓶,用甲醇定容,不同濃度的(+)-兒茶素甲醇溶液,過濾后進行高效液相色譜分析,以(+)-兒茶素質量為橫坐標,以峰面積為縱坐標建立標準曲線并擬合回歸方程。

1.4.3.2 (- )-表兒茶素標準曲線的建立 分別稱取(- )-表兒茶素標準品0.000 1、 0.000 2、 0.000 6、 0.000 8、 0.001 2和0.001 8 mg,置于10 mL容量瓶,用甲醇定容,不同濃度的(- )-表兒茶素甲醇溶液,過濾后進行高效液相色譜分析,以(- )-表兒茶素質量為橫坐標,以峰面積為縱坐標建立標準曲線并擬合回歸方程。

1.4.3.3 硫解目標產物標準曲線的建立

A)硫解反應:樣品溶液配制:精確稱取提取獲得的肉桂原花青素樣品10 mg置于10 mL容量瓶,用 60%乙醇定容,得到質量濃度為1 g/L的溶液。2-巰基乙醇反應液的配置:分別精確量取2.5 mL 2-巰基乙醇、 27.5 mL乙醇、 16 mL蒸餾水、 4 mL 4%鹽酸水溶液,充分混勻。硫解反應:分別取0.1 mL樣品溶液、 0.4 mL 2-巰基乙醇反應液于試管內,充分混勻,以0.1 mL 60%乙醇、 0.4 mL 2-巰基乙醇反應液為對照。于70 ℃恒溫水浴條件下反應4 h,放置室溫冷卻。

B)硫解目標產物的HPLC分析及制備:利用硫解反應液,2-巰基乙醇標準品溶液、(+)-兒茶素、(- )-表兒茶素標準品進行HPLC分析,得到反應產生的硫解目標產物的波峰。將硫解反應擴大,反應后溶液經大孔樹脂HP-20吸附,用蒸餾水洗脫,除去剩余的2-巰基乙醇、鹽酸等,用甲醇洗脫后溶液用旋轉蒸發蒸干后既得到硫解目標產物。將樣品用少量蒸餾水溶解,上Sephadax柱,依次用400 mL 20%、 40%、 60%、 80%甲醇洗脫,以薄層層析為指導合并洗脫液,再以HPLC分析為指導,找到硫解目標產物,將硫解目標產物干燥。然后將硫解目標產物用少量蒸餾水溶解上CG161M柱進行純化,依次用200 mL 10%、 30%、 50%、 70%、 80%甲醇洗脫,以薄層層析為指導合并洗脫液,再以高效液相色譜分析為指導,找到硫解目標產物,將硫解目標產物命名為2-ME-ec[12]。

C)建立標準曲線:以制備的硫解目標產物為標準品,分別稱取硫解目標產物0.000 5、 0.001、 0.002、 0.004、 0.006和0.008 mg,置于10 mL容量瓶,用甲醇定容,不同濃度的硫解目標產物溶液,過濾后進行高效液相色譜分析,以硫解目標產物質量為橫坐標,以峰面積為縱坐標建立標準曲線并擬合回歸方程。

1.4.3.4 平均聚合度的計算 待測樣品按照1.4.3.3節硫解反應的方法處理以后,經HPLC分析檢測得到其相對應的(+)-兒茶素、(- )-表兒茶素、硫解目標產物的峰面積,再根據相對應的標準曲線計算得到相對應的物質的量,由公式(6)計算出其平均聚合度。

(5)

1.5 抗氧化性的測定

本實驗采用測定DPPH ·自由基清除率來評價樣品抗氧化性,DPPH ·自由基清除率越高則說明該樣品抗氧化性越強。將F10、 F50、 F70、 F100以及Vc(Vc作為對照品)用60%乙醇配制成不同濃度的溶液,濃度分別為0.5、 1.0、 1.5、 2.0、 2.5、 3.0、 3.5 和4.0 g/L,用60%乙醇配制100 mL 0.000 2 mol/L 的DPPH·自由基溶液,向2 mL DPPH ·自由基溶液中加入2 mL樣品溶液,使總體積為4 mL,搖勻,避光,于40 ℃水浴中放置30 min后,測定其在517 nm處的吸光值(A樣品);向2 mL 60%乙醇中加2 mL樣品,記錄吸光值(A對照),向2 mL 60%乙醇中加2 mL DPPH ·自由基溶液,記錄吸光值(A空白),即空白對照。

η=1-(A樣品-A對照)/A空白×100%

(6)

式中:η—DPPH ·自由基清除率,%;A樣品—DPPH ·自由基溶液與樣品溶液反應后吸光光度值;A對照—60%乙醇中加入樣品后吸光光度值;A空白—DPPH ·自由基溶液中加入60%乙醇后吸光光度值。

1.6 紅外光譜試

分級后的樣品采用溴化鉀壓片法(溴化鉀與樣品質量比100 ∶1)進行紅外光譜測定,與原花青素標準品的紅外光譜進行對照。

2 結果與討論

2.1 原花青素提取試驗結果

2.1.1 初提物原花青素含量

2.1.1.1 標準曲線的建立 以(+)-兒茶素標準品所作標準曲線,擬合回歸線性方程:y= 353.516 2x-14.230 8,相關系數R2= 0.999 6,式中:x為(+)-兒茶素質量濃度,g/L;y為吸光度。

2.1.1.2 初提物原花青素含量 無水乙醇、60%乙醇、無水丙酮、蒸餾水4種溶劑對肉桂原花青素進行提取,但是由于用蒸餾水提取原花青素,提取液很難在旋轉蒸發器下濃縮干燥,因此無法完成后續測定。從表1中可以得到利用無水乙醇、60%乙醇、無水丙酮3種溶劑提取肉桂原花青素,初提物提取率分別為11.39%、 12.72%、 11.95%,初提物中原花青素質量分數為75.38%、 85.25%、 71.32%,原花青素提取率分別8.58%、 10.84%、 8.52%。因此從提取物原花青素的含量來看,可以確定肉桂原花青素的提取溶劑為60%乙醇。

2.1.2 初提物提取率以及原花青素提取率 表1為初提物提取率、原花青素含量以及原花青素提取率,從表1可以看出,利用無水乙醇、60%乙醇、無水丙酮3種溶劑提取肉桂原花青素,利用公式(1)計算初提物提取率分別為11.39%、 12.72%、 11.95%,利用公式(3)計算原花青素提取率分別為8.58%、 10.84%、 8.52%,3種溶劑提取效果的明顯不同,是由于無水乙醇以及丙酮的極性與60%乙醇相比較小,與肉桂原花青素的極性相比存在較大差異,而60%乙醇與肉桂原花青素的極性差異較小,根據相似相溶原理,60%乙醇對肉桂原花青素的提取率最高,因此可以確定肉桂原花青素的提取溶劑為60%乙醇。

表1 肉桂原花青素初提試驗結果

表2分級處理試驗結果

2.2 分級處理試驗結果

表2為分級處理實驗結果,大孔吸附樹脂AB- 8 吸附肉桂原花青素,經10%、 50%、 70%、 100%乙醇梯度洗脫后得到4部分樣品,樣品分別標記為:F10、F50、F70、F100,4部分中質量最大的是F70為410 mg、純度為87.21%;樣品純度最高的是F10為90.03%;F100純度較低為42%,整個過程的回收率為93%。AB- 8大孔吸附樹脂為弱極性樹脂,在吸附過程中樹脂與極性較小部分作用力較強,而對于解吸過程中,不斷增加乙醇濃度,洗脫液極性逐漸減小,依據相似相溶原理極性較大的部分被最先洗脫下來,極性較小的部分被最后被洗脫下來,因此F10部分極性大于其他3個部分,F100部分的極性最小。

2.3 平均聚合度測定

2.3.1 標準曲線的建立

2.3.1.1 (+)-兒茶素標準曲線的建立 按1.4.3.1節配制不同濃度的(+)-兒茶素標準品甲醇溶液,過濾后進行HPLC分析。所得標準曲線經擬合回歸后得到線性方程:y=513.2x+11.462,R2=0.999 2,式中:x為(+)-兒茶素質量,mg;y為吸收峰面積。

2.3.1.2 (- )-表兒茶素標準曲線的建立 按1.4.3.2節配制不同濃度的(- )-表兒茶素標準品甲醇溶液,過濾后進行HPLC分析。所得標準曲線經擬合回歸后得到線性方程:y=618.43x+6.791 3,R2= 0.999 9,式中:x為(- )-表兒茶素質量,mg;y為吸收峰面積。

2.3.1.3 硫解目標產物標準曲線的建立 按1.4.3.3節制備的硫解目標產物2-ME-ec為標準品,配制不同濃度的硫解目標產物溶液,過濾后進行HPLC分析。所得標準曲線經擬合回歸后得到線性方程:y=309.76x-15.298,R2= 0.999 9,式中:x為2-ME-ec質量,mg;y為吸收峰面積。

2.3.2 平均聚合度計算 樣品與巰基乙醇反應產物經HPLC分析,得到相對應的(+)-兒茶素、(- )-表兒茶素、2-ME-ec的峰面積,由公式(6)計算出其平均聚合度,各部分物質的量及聚合度結果如表3所示,利用60%乙醇提取肉桂原花青素得到原料聚合度為6.2,對吸附在大孔吸附樹脂上的原料進行洗脫,10%乙醇溶液洗脫下來的部分聚合度為2.7,50%乙醇溶液洗脫下來的部分聚合度為4.5,70%乙醇溶液洗脫下來的部分聚合度為7.1,100%乙醇溶液洗脫下來的部分聚合度為6.9。因此當乙醇在10%~50%時洗脫下來的原花青素平均聚合度為2~5,可以認為主要為低聚體;當乙醇在70%~100%時洗脫下來的原花青素平均聚合度大于5,可以認為主要為高聚體。

表3 AB- 8大孔吸附樹脂分離原花青素結果

2.4 抗氧化試驗結果

表4 不同組分及聚合度對DPPH ·自由基清除的IC50值

抗氧化性與聚合度的關系如表4所示,可以得出聚合度越低抗氧化性越高,原花青素的抗氧化性取決于其分子結構及分子中大量酚羥基的存在[13],隨著聚合度的增加,分子中越來越多的酚羥基形成了分子內氫鍵,使其自由基清除能力呈下降趨勢[14]。圖1為分級處理后每部分樣品濃度與抗氧化性之間的關系,通過擬合方程,F10、 F50、 F70、 F100樣品及Vc 的IC50值分別為0.91、 1.28、 1.37、 1.71和3.21 g/L,在同一濃度時,F10部分的自由基清除率都明顯高于其他4個部分,當質量濃度為4 g/L時F10、 F50、 F70、 F1004部分以及Vc清除率分別為:93.54%、 81.34%、 79.83%、 77.54%、 52.33%,說明F10的抗氧化性大于其他4個部分,同時可以得到Vc的IC50值是肉桂原花青素低聚體IC50的3.5倍,也就是肉桂原花青素低聚體的抗氧化性是Vc的3.5倍。

圖1 不同組分對DPPH ·自由基的清除率 圖2 紅外光譜圖

Fig.1 The scavenging rate curves of different

Fig.2 IR spectrafractions for DPPH·

2.5 分級產物的紅外光譜分析

比較原料、F10、F50、F70以及F1005個紅外光譜圖,特征碳骨架振動產生特征峰的波形、頻率和強度相近,同時與標準品原花青素的光譜特征極為相似,如圖2中可以看到肉桂原花青素的特征骨架振動主要集中在3600~3000、1700~1000和850~650 cm-1區域。其中3450.60 cm-1峰為原花青素分子中羥基的伸縮振動;1624.05、 1533.40和1460.11 cm-1是苯環的骨架振動特征吸收峰;1 265.30、1 055.06 cm-1吸收峰為C環中的C—O—C伸縮振動;1112.94 cm-1吸收峰為C環中的C—H伸縮振動;當苯環上有3個相鄰的H存在時,指紋區域850~750 cm-1出現較強的吸收峰,在圖中807.61、 787 cm-1的吸收峰,可能是原花青素C2、 C3、 C4結構中3個相鄰H產生的。

3 結 論

3.1 采用無水乙醇、60%乙醇、無水丙酮3種溶劑對肉桂原花青素進行提取,初提物提取率分別為11.39%、 12.72%、 11.95%,初提物中原花青素為75.38%、 85.25%、 71.32%,原花青素提取率分別8.58%、 10.84%、 8.52%,確定肉桂原花青素的提取溶劑為60%乙醇。

3.2 大孔吸附樹脂AB- 8吸附肉桂原花青素初提物,經10%、 50%、 70%、 100%乙醇梯度洗脫后得到4部分樣品,樣品分別標記為:F10、F50、F70、F100,4部分中質量最大的是F70為410 mg、純度為87.21%;樣品純度最高的是F10為90.03%;F100純度較低為42%,整個過程的回收率為93%。

3.3 洗脫液中原花青素的平均聚合度隨乙醇濃度的提高而升高,當乙醇在10%~50%時洗脫液中原花青素的平均聚合度為2~5,可以認為主要為低聚體。當乙醇在70%~100%時洗脫液中原花青素的平均聚合度為大于5,可以認為主要為原花青素高聚體。

3.4 原花青素抗氧化活性受聚合度影響,F10、F50、F70、F100各部分樣品及Vc 的IC50值分別為0.91、 1.28、 1.37、 1.71和3.21 g/L,當質量濃度為4 g/L時F10、F50、F70、F1004部分以及Vc清除率分別為:93.54%、 81.34%、 79.83%、 77.54%、 52.33%,低聚體的抗氧化性高于高聚體的抗氧化性。

3.5 紅外光譜分析經分級得到的各部分結構和原花青素標準品的結構基本一致。

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松香色度標準裝置(又名《松香顏色分級標準》玻璃比色塊),是符合我國松香光學特性具有完整體系的松香顏色分級標準。1982年榮獲林業部科技成果二等獎。1987年至今,被《脂松香》、《松香試驗方法》國家標準所采用,并多次經國家質量監督檢驗檢疫總局復查考核合格。

Isolation of Cinnamon Proanthocyanidins by AB- 8 Macroporous Adsorption Resin

JIANG Qian1,ZHANG Jia-yan1,LEI Fu-hou2,LIU Zu-guang2

(1.Faculty of Material Engineering,Southwest Forestry College, Kunming 650224, China; 2.Guangxi Key Laboratory of Chemistry and Engineering of Forest Products,Guangxi University for Nationalities, Nanning 530006, China)

Isolation of cinnamon proanthocyanidins was performed on AB- 8 resin.1000 mg procyanidins raw materials were dissolved in small amount of 60% ethanol,then the concentrated solution was added to adsorption column in a constant rate.Ethanol solutions with volume fraction of 10%,50%,70%,100% were selected in gradient eluting by AB- 8 resin.The mass of F10that could be obtained from the ethanol 10% eluent was 290 mg;that of F50obtained from the ethanol 50% eluent was 150 mg; that of F70was 410 mg; that of F100was 80 mg.The sample with the highest purity in the four parts was F10, and its purity was 90.03%.The F100had the lowest purity in the four parts,and its purity was 42.11%.The eluting recovery achieved 93%.According to the analysis of polymerization degree and antioxidant activity,10%~50% ethanol eluent contained mainly oligomeric proanthocyanidins (OPC),70%~100% ethanol eluent contained polymeric proanthocyanidins (PPC).The antioxidative activity of 10% ethanol eluent was the highest.

proanthocyanidins;fractionation;antioxidative activity

聯系地址:210042 南京市鎖金五村16號中國林科院林產化學工業研究所電 話:(025)85482449,85482533聯系人:譚衛紅傳 真:(025)85482450

10.3969/j.issn.1673-5854.2015.01.005

2014- 08- 07

廣西林產化學與工程重點實驗室開放基金(GXFC12-04) 作者簡介:姜 倩(1987— ),女,內蒙古牙克石人,碩士,研究方向為提取物化學與生物質化學品

TQ35

A

1673-5854(2015)01- 0026- 07

*通訊作者:張加研(1964—),男,四川樂山人,教授,博士,從事天然產物提取及加工方面的研究及教學;E-mail:245385416@qq.com。

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