非小細胞肺癌患者放療前后血清VEGF的水平變化及臨床意義*

馬瑾璐 金龍 韓蘇夏 郭希婧 何晨琛 田美麗 吳寧麗

(1.西安交通大學第一附屬醫院腫瘤放療科，陜西 西安 710061;2.西安昆侖醫院，陜西 西安 710016)

非小細胞肺癌患者放療前后血清VEGF的水平變化及臨床意義*

馬瑾璐1金龍1韓蘇夏1郭希婧1何晨琛1田美麗1吳寧麗2

(1.西安交通大學第一附屬醫院腫瘤放療科，陜西 西安 710061;2.西安昆侖醫院，陜西 西安 710016)

目的 探討非小細胞肺癌患者放療前后血清血管內皮生長因子(VEGF)水平與近期療效間的關系。方法 對46例非小細胞肺癌患者，采用常規三維適形照射(3D-CRT)及調強照射(IMRT)。用ELISA法檢測患者放療前1天、放療開始后7天及1個月時的血清VEGF含量。按近期療效分為有效組與無效組，分析比較近期療效與血清VEGF水平之間的關系。結果 46例非小細胞肺癌患者經放療6～7周，共30～33次，總治療劑量為60～66Gy。近期療效評價：46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)為65.2%，無效率(NC+PD)為34.8%。有效組放療前后血清VEGF水平均低于無效組，差異有統計學意義(P<0.05)；放療開始后1周VEGF水平與放療前相當，而放療1個月時VEGF水平明顯低于放療前，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 非小細胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一個有前景的生物學標志物，可用來預測放療敏感性和非小細胞肺癌患者的預后。

非小細胞肺癌; 血管內皮生長因子; 放射治療

放射治療是局部晚期非小細胞肺癌的主要治療手段之一。既往研究表明，非小細胞肺癌的局控率與放療劑量成正相關[1]。近年隨著三維適形放療(three dimensional conformal radiation ther-apy，3D-CRT) 和調強放療(intensity modulated radiation therapy，IMRT) 技術的應用，在正常組織受到較好地保護情況下，靶區的照射劑量也能得到有效提高[2]。血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是與腫瘤生長、侵襲和轉移相關的主要調控因子之一[3,4]。研究證實，肺癌VEGF表達與腫瘤組織增生及淋巴結轉移關系密切，患者血清VEGF水平與臨床發病特征及預后之間有著密切關系[5]。

1 資料與方法

1.1 研究對象 為西安交通大學第一附屬醫院腫瘤放療科2013年2月～8月收治經病理證實確診的病歷資料完整患者46例，其中男38例，女8例，年齡45～75歲。病理分期：Ⅱ期2例，Ⅲ期40例，Ⅳ期4例；腺癌25例，鱗癌20例，大細胞癌1例。均未接受手術治療，患者的卡氏評分≥70分；血生化檢查：血紅蛋白≥12g/dL，白細胞≥4.0×109/L，血小板≥100.0×109/L；肌酐≤1.0×正常值上限，總膽紅素≤1.0×正常值上限，谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶≤2.5×正常值上限，AKP≤5.0×正常值上限；患者放療前6個月內未接受過放射治療，均簽署放療知情同意書。

1.2 查體及輔助檢查 治療前2周內對患者進行詳細的病史詢問和全面的體格檢查，包括全血細胞計數、肝腎功能檢查，心電圖、胸部CT，腹部B超或腹部CT檢查。放療期間為了觀察放療可能帶來的不良反應，每周對患者進行體格檢查，記錄呼吸道癥狀，同時進行全血細胞計數檢查。如遇特殊病例，每2～3天重復檢查。

1.3 放射治療 按照我國肺癌診療指南進行，17例患者采用調強放療，29例采用三維適形放療。放療范圍包括原發灶、同側肺門、縱隔可見淋巴結。95% PTV劑量至60～65 Gy，三維TPS中根據放療計劃分別統計V20、V30(接受20 Gy/30 Gy照射的肺占全肺總體積的百分數)和MLD(全肺照射平均劑量)。

1.4 血清VEGF測定 放療前1天、放療開始后7天及1個月采集晨起空腹靜脈血3ml于EDTA抗凝管，3000r/min離心10min。吸取血清放-80℃冰箱保存待測。用ELISA法定量檢測血清VEGF含量，人血管內皮生長因子ELISA試劑盒購于上海西唐生物科技有限公司，具體操作按試劑盒說明書進行，結果在酶標儀主波長450nm讀取光密度值，繪制標準曲線，得出待測血清VEGF含量。

1.5 近期療效及放療副反應評價 所有患者治療前和結束后均行胸部CT掃描。治療結束后3個月評價近期療效。近期療效采用世界衛生組織(WHO)評價標準：CR(所有可見病灶完全消失至少4周)，PR(病灶縮小50%以上但未完全消失至少4周)，NC(病灶縮小不超過50%或增大不超過25%)，PD(病灶增大超過25%或出現新的病灶)。在本研究中，CR+PR為治療有效組，NC+PD為治療無效組。放療副反應分級采用RTOG放射損傷分級標準。

1.6 統計學方法 采用SPSS 10.0軟件進行統計分析，計量資料用t檢驗和方差分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 臨床特征 46例患者經放射治療6～7周，共30～33次，總治療劑量為60～66Gy。其中男38例(82.6%)，女8例(17.4%)；年齡≥55歲者29例(63.0%)，<55歲者17例(37.0%)；病理類型：腺癌25例(54.3%)，鱗癌20例(43.5%)，大細胞癌1例(2.2%)；臨床分期：Ⅱ期2例(8.6%)，Ⅲ期40例(87.0%)，Ⅳ期4例(17.4%)；放療方式：3D-CRT者29例(63.0%)，IMRT 17例(37.0%)。

2.2 近期療效評價 46例患者中CR 2例，PR 28例，NC 10例，PD 6例，有效率(CR+PR)為65.2%，無效率(NC+PD)為34.8%。有效組放療前后血清VEGF水平均低于無效組，差異有統計學意義(均P<0.05)；放療開始后1周VEGF水平與放療前相當，而放療1個月時VEGF水平明顯低于放療前，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.3 并發癥 放療過程中及放療結束后，患者均出現了1項或多項放療副反應，其中放射性肺炎38例，放射性食管炎16例，Ⅰ～Ⅱ度骨髓抑制29例，治療中及治療結束后3個月內未發生Ⅳ度骨髓抑制、大咯血、呼吸衰竭等危及生命的嚴重并發癥。

3 討論

血管內皮生長因子(VEGF)是在牛垂體濾泡星狀細胞體外培養液中純化出來的一種肝素結合因子，它位于6p21.3上，主要參與血管形成，與腫瘤浸潤轉移關系密切[6]。VEGF在多種人實體腫瘤中均有表達,包括結直腸癌、胃癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等[5]。患者血清中VEGF水平與腫瘤侵襲轉移能力呈正相關，繼而與預后有著密切的關系，成為某些腫瘤生物治療靶點[7]。

既往研究證明，VEGF在肺癌組織中的表達，在肺癌組織增殖與淋巴結轉移過程中發揮重要作用。VEGF在肺癌組織中的陽性表達率明顯高于正常組織,且微血管計數值均高于陰性組織，但具體機制尚不完全清楚[8]。

近期研究人員通過meta分析亞洲肺癌患者放療前后VEGF水平與放療敏感性顯示，肺癌患者血清中VEGF表達水平與患者放療敏感性及預后有著密切的關系。放療后1周內血清VEGF水平先是有一個明顯下降過程，然后又迅速上升至治療前水平，治療后1周至1個月再逐漸下降，并明顯低于放療前水平。這一變化可能與腫瘤細胞受照射后DNA損傷修復過程有關，但具體機制不詳。該研究搜查了CISCOM科學網絡、PubMed、谷歌學術、EBSCO及Cochrane圖書館，使用STATA 12.0軟件進行薈萃分析。其中包含了14個臨床研究，包括5個病例對照研究和9個群組研究。分析結果顯示，非小細胞肺癌患者的血清VEGF水平高于健康對照組，放射治療前后血清VEGF水平有著顯著的差異(P<0.05)。進一步研究發現，血清VEGF水平的變化與患者放療療效及預后關系密切。血清VEGF水平與非小細胞肺癌患者組織學評分無明顯關系。本研究結果顯示，放療后1周時血清VEGF水平與放療前接近，放療1個月時VEGF水平則明顯低于放療前水平，有效組放療前后血清VEGF水平均明顯低于無效組(P<0.05)。其機制可能是高水平VEGF對腫瘤血管形成能力與腫瘤細胞乏氧有關，從而影響腫瘤細胞放療療效。

4 結論

我們的研究表明，非小細胞肺癌患者血清VEGF水平可能是一個有前景的生物標志物，可用來預測放療敏感性和非小細胞肺癌患者的預后。

[1] Laine AM, Westover KD, Choy H. Radiation therapy as a backbone of treatment of locally advanced non-small cell lung cancer[J]. Semin Oncol，2014,41:57-68.

[2] Padda SK, Burt BM, Trakul N,etal. Early-stage non-small cell lung cancer: surgery, stereotactic radiosurgery, and individualized adjuvant therapy[J]. Semin Oncol, 2014,41:40-56.

[3] Ferrara N, Houck KA, Jakeman LB,etal. The vascular endothelial growth factor family of polypeptides[J]. J Cell Biochem, 1991,47:211-218.

[4] Petrillo M, Borriello M, Fuoco G,etal. Novel VEGF-independent strategies targeting tumor vasculature: clinical aspects[J]. Curr Pharm Des,2012,18:2702-2712.

[5] Shibuya M. VEGF-VEGFR Signals in Health and Disease[J]. Biomol Ther (Seoul), 2014,22:1-9.

[6] Dvorak HF. Leaky tumor vessels: consequences for tumor stroma generation and for solid tumor therapy[J]. Prog Clin Biol Res, 1990,354(A):317-330.

[7] Funakoshi T, Lee CH, Hsieh JJ. A systematic review of predictive and prognostic biomarkers for VEGF-targeted therapy in renal cell carcinoma[J]. Cancer Treat Rev，2014， 40:533-547.

[8] Alevizakos M, Kaltsas S, Syrigos KN. The VEGF pathway in lung cancer[J]. Cancer Chemother Pharmacol, 2013,72:1169-1181.

Clinical significance of serum VEGF of non-small cell lung cancer patients with radiotherapy

MA Jinlu1, JIN Long1, HAN Suxia1,etal

(1.DepartmentofRadiotherapy,TheFirstAffiliatedHospitalofMedicalCollege,Xi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061; 2.Xi'anKunlunHospital,Xi’an710016)

Objective To investigate the relationship between recent effect of radiotherapy and serum vascular endothelial growth factor (VEGF) level in patients with non-small cell lung cancer (NSCL). Methods 46 patients with non-small cell lung cancer were treated with conventional three-dimensional conformal irradiation (3 d CRT) and intensity modulated radiation (IMRT). The serum VEGF was detected with ELISA before radiotherapy and 1 d, 7 d and 1 month after radiotherapy. According to the recent curative effect, the patients were divided into effective and ineffective group. Results The total therapeutic doses were 60-66 Gy. The efficient rate (CR+PR) was 65.2% and no efficiency rated (NC+PD) was 34.8%. Serum VEGF levels before and after radiotherapy of effective group was lower than that of ineffective group. The difference was statistically significant. VEGF 1 week and 1 month after radiotherapy was lower than that before radiotherapy. The difference was statistically significant. Conclusion Non-small cell lung cancer patients serum VEGF levels may be a promising biomarker, which can be used to predict radiation sensitivity and the prognosis of patients with non-small cell lung cancer.

Non-small cell lung cancer; VEGF; Radiotherapy

國家自然科學基金(81001027)

韓蘇夏，教授，《西部醫學》常務編委，E-mail: shan87@mail.xjtu.edu.cn

R 734；R 815

A

10.3969/j.issn.1672-3511.2015.06.007

2014-06-03； 編輯： 母存培)