阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠心肌細胞PPAR-γ及GLUT-4表達的影響研究*

蒲麗君，羅 勇，趙 珂

(川北醫學院附屬醫院，四川 南充 637000)

高血壓病是最常見的心血管疾病之一，也是其它心血管疾病的一個主要危險因素。近年來隨著我國社會經濟狀況的改善和人民生活方式的轉變，其發病率呈增加趨勢，我國高血壓患者已逾1億人口［1］。由于高血壓病的病因及發病機制較為復雜，尚未完全闡明，使其防治工作成為目前一大難題。有文獻研究發現，心臟在高負荷狀態下能量代謝的改變是心肌肥厚發生發展的機制之一［2］。因此，臨床上抑制高血壓心肌肥厚已經成為成為治療高血壓的新途徑。有學者研究，改善心肌細胞代謝是抑制高血壓心肌肥厚的有效途徑。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)與葡萄糖轉運蛋白4(GLUT-4)與心肌細胞代謝密切相關［3］。本文就選擇20只自發性高血壓大鼠為研究對象，探討分析阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠心肌細胞PPAR-γ及GLUT-4表達水平的影響，為臨床運用提供理論指導。

1 資料與方法

1.1 實驗動物:選擇8周齡180～200g的健康雄性自發性高血壓大鼠20只，隨機分為A組與B組，同期同批次選擇10只同周齡和體重的健康雄性大鼠組成C組。在保持溫度(20±2.5)℃、24h自由進食與進水的條件下喂養三組大鼠。

1.2 藥物喂養方法:A組大鼠按照50mg·kg-1·d-1的水平喂養阿托伐他汀溶液，連續喂養10周，每周3次;同時喂養B組、C組大鼠等量的蒸餾水，連續喂養10周，每周3次.觀察三組大鼠的血壓值、血脂水平、左心室質量指數水平以及PPAR-γ及GLUT-4表達水平的差異性。

1.3 實驗組器材以及試劑:CODA尾袖套法無創血壓系統;DW-86L386型-80℃低溫冰箱;全自動化學分析儀;免疫組化光學顯微鏡;各種規格的量筒、燒杯、EP管、槍頭及槍頭盒;UV-2500紫外分光光度計;阿托伐他汀，規格為20mg/片;鼠抗鼠PPARγ單克隆抗體;鼠抗鼠GLUT4單克隆抗體等。

1.4 血壓監測:采用CODA尾袖套法無創血壓系統檢測三組大鼠第1周、3周、5周、7周以及10周的的血壓水平，比較三組大鼠的血壓的差異性。

1.5 血脂水平以及左心室質量指數水平的檢測:使用全自動化學分析儀檢測三組大鼠TC、TG、HDL-C以及LDL-C等的水平。嚴格按照實驗組操作方法制備實驗標本，計算三組大鼠的左心室質量指數水平，比較差異性。

1.6 PPAR-γ、GLUT-4 表達水平的檢測［4］:采用免疫組化法及PT-PCR法檢測三組大鼠的PPAR-γ及GLUT-4表達水平。檢測過程嚴格按照試劑盒操作標準操作，保證檢測結果的科學性。

1.7 統計學方法:數據處理軟件包為SPSS16.0，計量的比較采用t值檢驗，計數的比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示有顯著性差異。

2 結 果

2.1 三組大鼠血壓值的比較:A組與B組大鼠的舒張壓與收縮壓水平較C組大鼠均較高，具有明顯差異性(P＜0.05)，A組與B組大鼠的血壓值水平比較，差異性不明顯(P＞0.05)。具體見表1。

2.2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較:A組與B組大鼠的TC、TG、HDL-C以及LDL-C等血脂水平較C組大鼠均較低，具有明顯差異性(P＜0.05)，A組與B組比較血脂水平無差異性(P＞0.05)。三組大鼠的LVM1水平兩兩比較均具有顯著性差異(P＞0.05)，但B組大鼠的LVM1水平最高，其次是A組，C組大鼠水平最低。見表2。

2.3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較:干預前，A組與B組大鼠PPAR-γ及GLUT-4表達水平均較C組較低，具有統計學意義(P＜0.05)，但A組與B組比較差異性不大(P＞0.05);干預后，A組大鼠PPAR-γ及GLUT-4表達水平顯著提高，與C組大鼠比較差異性不大，但與B組大鼠比較，具有較大差異性(P＜0.05)。見表 3。

表1 三組大鼠血壓值的比較(±s)

表1 三組大鼠血壓值的比較(±s)

時間 血壓 A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P 1 周 舒張壓 122.80±13.80 125.30±16.50 99.10±12.10 0.943 ＞0.05 4.204 ＜0.05 5.132 ＜0.05收縮壓 166.50±35.20 167.80±36.10 141.04±14.50 0.823 ＞0.05 5.043 ＜0.05 4.893 ＜0.05 3 周 舒張壓 123.30±13.50 125.30±15.50 98.80±13.10 0.847 ＞0.05 5.132 ＜0.05 4.321 ＜0.05收縮壓 168.30±34.10 169.20±37.20 140.35±15.12 0.475 ＞0.05 5.054 ＜0.05 5.012 ＜0.05 5 周 舒張壓 124.20±14.20 125.40±12.90 99.50±12.20 0.124 ＞0.05 4.982 ＜0.05 4.892 ＜0.05收縮壓 169.50±36.20 169.80±37.80 139.18±15.20 0.784 ＞0.05 4.829 ＜0.05 5.013 ＜0.05 7 周 舒張壓 122.40±12.20 124.30±14.60 100.10±11.15 0.673 ＞0.05 4.545 ＜0.05 5.312 ＜0.05收縮壓 167.50±36.20 170.50±37.10 140.32±15.50 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.554 ＜0.05 10 周 舒張壓 123.40±12.70 122.80±14.50 98.85±12.60 0.783 ＞0.05 5.012 ＜0.05 5.984 ＜0.05收縮壓 170.50±34.80 168.50±37.50 141.2±15.30 0.384 ＞0.05 5.392 ＜0.05 5.324 ＜0.05

表2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較±s)

表2 三組大鼠血脂水平、LVM1水平的比較±s)

指標 A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P TC(mmoL/L) 0.32±0.02 0.33±0.02 0.58±0.06 0.583 ＞0.05 4.021 ＜0.05 4.092 ＜0.05 TG(mmoL/L) 1.36±0.21 1.37±0.23 2.35±0.35 0.832 ＞0.05 4.943 ＜0.05 4.343 ＜0.05 HDL-C(mmoL/L) 0.40±0.10 0.41±0.08 0.93±0.18 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.091 ＜0.05 LDL-C(mmoL/L) 0.84±0.11 0.82±0.13 1.25±0.16 0.482 ＞0.05 5.475 ＜0.05 5.043 ＜0.05 LVM1(mg/g) 3.31±0.24 3.86±0.46 2.88±0.16 4.901 ＜0.05 5.132 ＜0.05 4.823 ＜0.05

表3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較(±s)

表3 三組大鼠PPAR-γ、GLUT-4表達水平的比較(±s)

指標 A組 B組 C組 A組與B組比較χ2 P A組與C組比較χ2 P B組與C組比較χ2 P PPAR-γ 干預前 1.15±0.03 1.13±0.02 1.28±0.05 0.854 ＞0.05 5.493 ＜0.05 4.343 ＜0.05干預后 1.25±0.06 1.13±0.03 1.28±0.06 5.034 ＜0.05 0.989 ＞0.05 5.034 ＜0.05 GLUT-4 干預前 1.10±0.02 1.08±0.01 1.25±0.06 0.912 ＞0.05 4.844 ＜0.05 5.175 ＜0.05干預后 1.23±0.05 1.08±0.02 1.25±0.07 4.983 ＜0.05 0.894 ＞0.05 4.434 ＜0.05

3 討論

高血壓是一種遺傳異質性疾病，若干有微弱效應的基因累積作用生成高血壓，并受一系列環境因素的影響［5，6］。該疾病的病理過程常涉及動脈血管壁增厚、左室肥厚及心肌纖維化即心血管重塑的過程。血管壁重塑可引致高血壓靶器官的損害，而高血壓長期壓力超負荷所引起的心臟結構改變即左心室肥厚，明顯增加心臟事件的發生率和死亡率，嚴重威脅到患者的生命安全［7，8］。隨著我國高血壓的發病率呈增加趨勢，患病人口超過1億人口，因此，如何治療高血壓，如何改善心臟機能成為當今醫學研究的熱點課題［9］。

阿托伐他汀是第三代他汀類藥物，是新型的全合成的高效他汀類藥物。他汀類藥物又名羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，是目前臨床應用最廣泛最重要的降低膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的藥物，且對各種類型的高脂血癥均有一定療效［10］。但是本文研究發現，在阿托伐他汀干預的A組大鼠與蒸餾水喂養的B組大鼠的血脂水平差異性不明顯，這可能與實驗樣本數量較少及阿托伐他汀干預時間較短有關。過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)是PPARs亞型之一，屬于核內受體轉錄因子超家族成員，是一類由配體激活的核轉錄因子，在脂肪組織、骨骼肌組織中高表達，最新研究發現其在心臟組織內也存在［11］。有文獻報道［12］，PPAR-γ 通過以下機制發揮作用:①通過阻斷內皮素的產生，抑制血管緊張素Ⅱ及其受體的表達②抑制促纖維化因子轉化生長因子β、基質金屬蛋白酶(MMPs)及炎性細胞因子的表達;③抑制心肌細胞凋亡以及改善心肌脂質代謝來。葡萄糖轉運蛋白(GLUTs)是細胞膜上的一種載體蛋白，負責葡萄糖分子或果糖分子的運載。有作者研究發現［13］，隨年齡增長心肌中GLUT1的表達逐漸降低，GLUT4的表達升高，并伴隨著糖分解代謝到氧化代謝的轉變，但在心肌肥厚的過程中出現GLUT4的表達減少，GLUT1的表達增加，這說明葡萄糖轉運蛋白參與了肥厚心肌的糖代謝過程。本文研究發現，阿托伐他汀干預的A組大鼠的PPAR-γ、GLUT-4表達水平較B組大鼠顯著升高，與正常大鼠水平相差無幾，并且A組大鼠的左心室質量指數(LVM1)水平明顯降低，血壓水平與B組、C組相差無幾。這說明了阿托伐他汀不是通過影響血壓，而是通過增強PPAR-γ、GLUT-4高表達的途徑影響LVM1水平。因此，這一結論為臨床研究提供了理論參考依據，具有較高的臨床價值。，

［1］ 康蘭，胡申江.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠p27蛋白表達及心肌細胞凋亡的影響［J］.中國應用生理學雜志，2008，24(1):46～49.

［2］ 王安才，成蓓，謝曉竟，等.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠血壓和心肌血管緊張素Ⅱ1型和2型受體表達的影響［J］.中國動脈硬化雜志，2005，13(1):40～44.

［3］ 蒲麗君，趙珂，羅勇.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠心肌組織GLUT4表達的影響及意義［J］.川北醫學院學報，2013，28(04):368～372.

［4］ 陳紅娟，陳君柱，王興祥，等.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠心肌組織PPARs表達的影響［J］.中國病理生理雜志，2008，24(6):1069～1073.

［5］ 李衛萍，孫明，周宏研，等.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠主動脈活性氧、AT_1受體和p22phox表達的影響［J］.臨床心血管病雜志，2005，21(2):104～107.

［6］ Yan L，Zhang JD，Wang B，Lv YJ，Jiang H，et al.Quercetin inhibits left ventricular hypertrophy in spontaneously hypertensive rats and inhibits angiotensinⅡ-induced H9C2 cells hypertrophy by enhancing PPAR-γ expression and suppressing AP-1 activity［J］.PLoS One，2013，8(9):72548.

［7］ 張斌，江力勤，張建勤，等.纈沙坦對自發性高血壓大鼠左心室肥厚心肌細胞GRK2的表達及亞細胞分布的影響［J］.心電與循環，2013，(4):285～288.

［8］ Silva-Junior Gde O，Torres Tda S，Mendonca Lde S，et al.Rosiglitazone(peroxisome proliferator-activated receptorgamma)counters hypertension and adverse cardiac and vascular remodeling in 2K1C hypertensive rats［J］.Exp Toxicol Pathol，2011，63(1-2):1～7.

［9］ 趙珂，蒲麗君，羅勇.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠肥厚心肌中過氧化物酶體增殖物激活受體γ及葡萄糖轉運蛋白4表達的影響［J］.中華高血壓雜志，2013，21(06):542～547.

［10］ 張翼鴻，楊玉輝，孫薇，等.白藜蘆醇上調糖尿病大鼠脂肪組織PPAR-γ及GluT-4蛋白表達［J］.黑龍江醫學，2011，35(3):175～177.

［11］ Lee TI，Kao YH，Chen YC，et al.The dipeptidyl peptidase-4 inhibitor-sitagliptin modulates calcium dysregulation，inflammation，and PPARs in hypertensive cardiomyocytes［J］.Int Cardiol，2013，168(6):5390～5395.

［12］ 遲鋮，金苗苗，母義明，等.大黃酸上調糖尿病大鼠脂肪組織PPAR-γ及GluT-4表達并改善胰島素敏感性［J］.中國糖尿病雜志，2008，16(12):746～748.

［13］ 林愛琴，倪居，朱曉菡，等.阿托伐他汀對自發性高血壓大鼠MAI及ET-1蛋白、eNOS蛋白、TNF-α蛋白表達的影響［J］.中國醫院藥學雜志，2011，31(12):978～981.