六安地區健康成人超敏C反應蛋白參考區間研究

許華斌 張光滿 黃 琴

六安地區健康成人超敏C反應蛋白參考區間研究

許華斌 張光滿 黃 琴

目的 建立六安地區成人超敏C反應蛋白(hs-CRP)的參考區間。 方法 按照CLSI文件C28-A3《臨床實驗室如何確定和建立生物參考區間》要求，于2014年1～8月篩選前來六安市第二人民醫院進行健康體檢者137名，采用顆粒增強免疫透射比濁法測定血清hs-CRP濃度。 結果 去除3例離群值后，134例六安地區健康成人血清hs-CRP明顯呈偏態分布，經對數轉換，男女之間無組間差別(Z

健康成人，六安；超敏C反應蛋白；參考區間

C-反應蛋白(C-reactive protein ,CRP)是急性時相蛋白之一，可以激活補體，加強吞噬細胞的吞噬而起到調理作用，從而清除入侵機體的病原微生物，以及損傷、壞死、凋亡的組織細胞，在機體的天然免疫過程中發揮重要的保護作用。超敏C-反應蛋白(hyper sensitivity C-reactive protein, hs-CRP)與CRP是同一種蛋白，只是由于其測定方法更敏感而得名。采用臨床常規方法測定CRP時，檢測的線性范圍一般為3～200 mg/L，因檢測方法缺乏足夠的敏感性，無法測出血液中含量更低的CRP；而hs-CRP是采用乳膠增強免疫散射比濁法、顆粒增強免疫透射比濁法等技術使檢測的靈敏度得到了很大的提高，檢測低限延伸為0.005～0.100 mg/L[1]，使得低濃度CRP的測定更加準確。在可靠的hs-CRP檢測方法建立之前，原先血清CRP檢測正常的人群，其未來發生心血管疾病的密切相關因素中包括了CRP的升高[2]。大量研究資料表明，動脈粥樣硬化的血栓除了是脂肪堆積的過程也是一個慢性炎癥過程[3]；hs-CRP輕度升高與冠狀動脈事件、中風及周圍血管病相關[2,4-6]，hs-CRP已被證實是由慢性炎癥引發心血管疾病的獨立危險因素，檢測其濃度對心血管疾病的早期干預及預后判斷起重要作用[7]。2003年歐洲高血壓防治指南(ESH/ESC)[8]正式推薦, 高血壓患者需檢測hs-CRP 水平。各實驗室由于儀器、試劑等原因所使用的正常參考范圍各異，因此有必要建立各自的hs-CRP參考區間，為臨床診治提供決策依據。本文對六安地區hs-CRP的正常參考區間進行了調查，具體報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 依據CLSI C28-A3文件的指導原則，本實驗室所篩選的參考人群應滿足以下條件：無糖尿病、癲癇病、腫瘤、器質性腦綜合征、高血壓、慢性感染、冠心病、物質濫用、抑郁、狂躁；糖尿病風險評估為低風險、動脈粥樣硬化風險篩查為低風險；沒有正在服藥、吃補品、特殊飲食習慣、近6個月做過手術、從事接觸化學試劑和放射源的工作、女性處于妊娠期的情況；身體質量指數(body mass index, BMI)控制在18.5～24.0 kg/m2；心電圖、彩超、胸透、內外科檢查正常；實驗室檢測滿足以下條件：Glu≤6.11 mmol/L；Cr≤133 mmol/L；UA≤357 mmol/L；TP≤83 g/L；ALB≤55 g/L；GLB≤32 g/L；TB≤20 μmol/L；DB≤6.8 μmol/L；TC≤5.30 mmol/L；TG≤1.71 mmol/L；WBC：(3.97～9.15)×109/L；RBC：(4.09～5.74)×1012/L(男)、(3.68～5.13)×1012/L(女)；Hb：120～160 g/L(男)、110～150 g/L(女)；PLT：(100～300)×109/L，尿常規正常。

本研究從2014年1～8月收集六安市各縣區的健康體檢人群，職業涵蓋公務員、教師、醫生、警察、工人、農民等。最終得到符合篩選標準且居住在六安地區的參考個體137名，其中男性55例，年齡18～77歲，平均40歲；女性79例，年齡18～75歲，平均43歲。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 采用日立7600-020全自動生化分析儀，德國德賽診斷系統有限公司生產的顆粒增強免疫透射比濁法hs-CRP試劑及其配套校準品和質控品。

1.2.2 標本采集和處理 空腹采血，采血前一天受檢者無飲酒、無劇烈運動，坐姿，自肘靜脈采集靜脈血3～5 mL，不抗凝，離心后分離血清，4 h內檢測完畢。實驗開始和結束時均測定質控物。

1.2.3 參考區間的計算 按照CLSI C28-A3文件[6]建議的Dixon法判斷離群值，若D/R≥1/3則該極值為離群值(D是極大或極小值與相鄰值的絕對差異；R是包含極值在內的所有值中最大值與最小值之間的差)，應棄之，反之則保留。按C28-A3文件推薦的方法計算Z值和Z*值，若Z>Z*則參考區間需要按性別進行分組；反之，則無性別差異，男女可以通用一個參考區間。計算Z值時數據應為正態分布，若是偏態分布則應正態化后再計算。將有效參考個體的觀察值按從小到大的順序排列，應用非參數法計算95%參考區間。

2 結果

2.1 參考人群的一般臨床特征描述 本研究以實驗室檢查結合調查問卷的形式，從生理、病理和生活習慣等方面排除了對hs-CRP有影響的因素，男、女各得到了1組可用于計算參考區間的參考人群，各組臨床特征見表1。

表1 不同性別參考人群的一般臨床特征描述

2.2 hs-CRP的正態性檢驗 137例六安地區健康成人各年齡段hs-CRP的水平分布在0.172 7～6.882 4 mg/L之間，經Dixon法判斷，有3個離群值出現，去除離群值后，hs-CRP的分布為0.172 7～2.532 4 mg/L，經Kolmogorov-Smirnov檢驗P<0.01，表明hs-CRP結果不服從正態分布，同時頻數分布表也進一步說明該組數據成明顯偏態分布(圖1)。對hs-CRP結果取對數后，lg(hs-CRP)經Kolmogorov-Smirnov檢驗P值為0.29，P>0.05，表明服從正態分布，頻數分布表見圖2。

2.3 hs-CRP濃度與性別的關系 134例健康成人根據性別不同分為兩組，經對數處理后的數據，按照C28-A3文件推薦方法，計算Z值和Z*值，結果Z值比Z*值小(見表2)，因此，六安地區成人hs-CRP參考范圍不需要按性別進行分組，可以將男女合并統計，非參數法計算其95%參考上限為2.066 mg/L。

表2 lg(hs-CRP)濃度與性別的關系

3 討論

目前hs-CRP主要采用乳膠增強免疫散射比濁法、顆粒增強免疫透射比濁法等技術檢測，檢測的靈敏度得到了很大提高，使得低濃度CRP的測定更加準確。隨著對冠狀動脈硬化性心臟病(coronary heart disease, CHD)發病機制研究的不斷深入，目前認為炎癥反應是CHD發病與進展的重要因素之一[7]；而通過高靈敏度方法測定的hs-CRP是研究的最廣泛的炎癥標志物，直接參與CHD患者粥樣斑塊的發生、發展、不穩定期及破裂的各個階段，對CHD的發生、發展以及預后具有獨立預測價值[9]。對于hs-CRP，目前各實驗室普遍采用生產廠家的試劑盒所給出的參考范圍，是否適合本地區人群還需要進行驗證或調查。

本研究共收集134例六安地區健康成人，對其hs-CRP的參考范圍進行了調查，結果顯示95%參考上限為2.0664 mg/L。低于文獻報道的歐洲人[10]和日本人[11]hs-CRP濃度，同時也比國內報道的深圳地區人群[12]低，但比玉溪市人群[13]高。其原因一部分可能是不同種族以及不同生活環境、飲食習慣的人群之間hs-CRP血清濃度存在差異；另一部分原因可能是由于本次調查增加了BMI、糖尿病風險評估、動脈粥樣篩查等篩查條件，使得本次調查人群更接近于健康人群，從而使得hs-CRP檢測結果偏低。經對數轉換后，lg(hs-CRP)結果符合正態分布，按照C28-A3文件推薦方法計算，結果Z

本次調查，我們在排除血脂異常的同時，又增加體重指數(BMI)排除指標，使BMI控制在中華人民共和國衛生行業標準規定的正常體重指數范圍之內(18.5～24.0 kg/m2)。BMI是體內脂肪總量的密切相關指標，簡單、實用、可反映全身性肥胖和超重。血清hs-CRP水平與BMI水平相關[14]，在測量身體因超重而面臨心臟病、高血壓等風險時，BMI比單純的以體重來認定更具準確性。因此增加BMI指標可以更加準確地去除由于脂肪組織過多導致的hs-CRP異常可能。同時本研究中還加入了白細胞計數(WBC)指標，從而排除明顯炎癥的干擾。本次調查新引入的篩查指標糖尿病風險評估和動脈粥樣硬化風險篩查，是以往在hs-CRP參考范圍調查中沒有采用過的，目前已有大量文獻表明hs-CRP與糖尿病和冠狀動脈硬化性心臟病的發生關系密切[3-7，15]，同時hs-CRP的基線水平與未來急性心肌梗死的發生呈顯著正相關[2]。因此加入這兩項篩查指標可以去除這部分高水平的hs-CRP結果，這也是我們此次調查的參考范圍偏低的主要原因。

[1] 鄢盛愷. 超敏C反應蛋白的測定在動脈粥樣硬化疾病診治中的應用[J]. 診斷學理論與實踐，2002,1(4):267-269.

[2] Mouridsen MR, Intzilakis T, Binici Z, et al. Prognostic value of high sensitive C-reactive protein in subjects with silent myocardial ischemia[J]. J Electrocardiol, 2012,45(3):260-264.

[3] Hattori Y, Matsumura M, Kasai K. Vascular smooth muscle cell activation by C-reactive protein[J]. Cardiovasc Res,2003,58(1):186-195.

[4] Poon PY, Szeto CC, Kwan BC, et al. Relationship between CRP polymorphism and cardiovascular events in Chinese peritoneal dialysis patients[J]. Clin J Am Soc Nephrol, 2012,7(2):304-349.

[5] Alber HF, Wanitschek MM, Waha S, et al. High-density lipoprotein cholesterol, C-reactive protein, and prevalence and severity of coronary artery disease in 5641 consecutive patients undergoing coronary angiography[J]. Eur J Clin Invest, 2008,38(6):372-380.

[6] Chiba M, Saitoh S, Ohnishi H, et al. Associations of metabolic factors, especially serum retinol-binding protein 4(RBP4), with blood pressure in Japanese-the Tanno and Sobetsu study[J]. Endocr J, 2010,57(9):811-817.

[7] 張志輝，周勝華，祁述善，等. 氧化應激、炎癥與冠心病患者冠狀動脈斑塊的關系[J]. 中南大學學報：醫學版，2006,30(4)：556-559.

[8] European Society of Hypertension-European Society of Cardiology Guidelines Committee. 2003 European society of hypertension-european society of cardiology guidelines for the management of arterial hypertension[J]. J Hypertens, 2003, 21(6):1011-1053.

[9] McColl BW, Allan SM, Rothwell NJ. Systemic infection, inflammation and acute ischemic stroke[J]. Neuroscience, 2009, 158(3):1049-1061.

[10] Hutchinson WL, Koenig W, Froglich M, et al. Immunoradiometric assay of circulating C-Reactive Protein: age-related values in the adult general population[J]. Clinical Chemistry, 2000,46(7):934-938.

[11] Tonari Y, Chida M, Koyama T, et al.Establishment of a reference interval for highly sensitive CRP by exclusion of individuals with abnormal values in related laboratory tests[J]. Japanese Journal of Clinical Pathology, 2001,49(2):178-182.

[12] 賀松，莊嚴，陳莉. 深圳地區健康成人506例超敏C-反應蛋白參考范圍調查[J]. 中國誤診學雜志，2004,4(6):836-838.

[13] 毛星星，徐文波，張興峰. 健康成人血清超敏C反應蛋白的分布及正常參考值[J]. 醫療裝備，2013,26(10):21-22.

[14] 竇念濤，李莉. 2型糖尿病患者超敏C反應蛋白水平與非酒精性脂肪肝的相關性分析[J]. 安徽醫學，2012,33(11):1512-1513.

[15] 方宗信，陶存武，黃瑞茹，等. 冠心病患者脂蛋白(a)同型半胱氨酸和超敏C反應蛋白的檢測及臨床意義[J]. 安徽醫學，2013,34(4):491-492.

(2014-09-20 收稿 2014-12-08 修回)

Investigation of hs-CRP reference interval for healthy adults in Lu'an area

XuHuabin,ZhangGuangman,Huangqin

DepartmentofClinicalLaboratory,Secondpeople′shospitalofLu'an,Lu'an237000,China

Objective To establish the reference interval of high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) for healthy adults in Lu’an area.MethodsBased on the CLSI Guideline C28-A3 Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline-Third Edition, the blood specimens were collected from 137 healthy individuals, including 55 males and 79 females, who had medical examinations in our hospital from Jan 2014 to Aug 2014. The serum concentration of hs-CRP was tested by particle enhanced immune transmission turbidimetry.ResultsExcluding outliers from the data set, the distribution of serum hs-CRP concentrations of 134 cases presented marked skewness. Analysis revealed that, after logarithmic transformation, there was no significant difference in the hs-CRP concentrations between male group and female group (Z

Healthy adult; Lu′an area; high-sensitivity C-reactive protein; Reference interval

安徽省高校省級自然科學研究項目(項目編號：KJ2013Z343)

237008 安徽省六安市第二人民醫院(皖西職業衛生學院附屬醫院特檢科)

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.02.007