小興安嶺食藥用真菌黃酮含量的測定

王洪剛，郭興，高智濤，范冬茹

(黑龍江省伊春林業科學院，黑龍江 伊春 153000)

小興安嶺食藥用真菌黃酮含量的測定

王洪剛，郭興，高智濤，范冬茹

(黑龍江省伊春林業科學院，黑龍江 伊春 153000)

以小興安嶺林區常見多孔真菌、常種植的可食真菌為試驗材料，對其黃酮類化合物含量進行檢測，為黃酮類化合物在化妝品、醫藥、食品工業中的應用提供理論依據。試驗結果表明，各品種中黃酮類化合物含量最高的是樺褐孔菌，其含量達到8.98mg/g，野生食藥用真菌和可栽培食用菌6種及其菌糠中均含有黃酮類化合物。

食藥用真菌；黃酮；含量

食藥用菌(Mushroom)古稱蕈菌或菌蕈，俗稱蘑菇，是一類具有肉質、膠質、木質、革質子實體，并有食用與藥用價值的大型菌物，通常是指肉眼可見、可以用手直接采摘、大小達到厘米級、單個子實體重量為50mg以上的大型菌物。

近幾年，天然產物有效成分以其安全、有效性、功能性，廣泛應用于醫藥、食品、化工原料、化妝品、飼料等多個領域，同時也為中藥新藥的研究和發展帶來了新的契機，并取得了良好的效果和效益。劉火安等用大孔樹脂法從葛根中分離出純度較高的葛根黃酮[1]。毛杏飛等用不同的方法提取白花蛇舌草中總黃酮,并確定了最佳的提取條件[2]。應國清等通過用D201大孔強堿性離子交換樹脂分離銀杏葉中的黃酮類化合物的研究,確定了最佳的提取條件,并分離出純度較高的黃酮類化合物[3]。趙瑞艷等從樹葺葉提取出黃酮類化合物并對其的抗氧化性進行研究[4]。張妍從山碴果提取分離總黃酮并進行體外抗腫瘤活性的研究[5]。研究表明，天然黃酮物質具有抗腦缺血的作用、心肌缺血作用、抗心律失常作用、鎮痛作用、保肝護肝作用、對消化性潰瘍的保護作用、抗病毒、抗腫瘤作用等。此外，還有研究表明，天然黃酮類物質有降壓、降血脂、抑制血小板聚集等多種藥理作用，說明天然黃酮物質確有多種生物學活性，且該類天然產物種類繁多，在植物中廣泛存在，毒性較低，應是今后新藥開發研究中一個值得重視的資源，有很大的開發利用前景。

本研究以小興安嶺林區常見多孔真菌、常種植的可食真菌為試驗材料，為食藥用真菌的菌種及成品的銷售推廣提供了理論數據，為黃酮類化合物在化妝品、醫藥、食品工業中的應用提供理論依據；加速食用菌資源的有效開發利用，生產出具有預防和治療多種疾病的藥品和天然保健品。

1 材料

1.1 供試菌株

采集及分類野生食藥用真菌12種；收集可栽培食用菌6種及其菌糠。

表1 供試食藥真菌

1.2 實驗儀器

BAO-35A精密鼓風干燥箱 施都凱儀器設備(上海)有限公司；AL-104高精度電子天平 梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司超聲波；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司；HH-2水浴鍋 金壇市雙捷實驗儀器廠；超聲波細胞破碎儀 上海之信儀器有限公司。

1.3 試驗藥品

乙醇(分析純)；甲醇(分析純)；氫氧化鈉(分析純)；鹽酸(分析純)；亞硝酸鈉(分析純)；硝酸鋁(分析純)；蘆丁(≥98%)。

2 方法

2.1 食藥用真菌黃酮類化合物的提取工藝流程

食藥用真菌子實體→烘干→粉碎→準備稱取→配成70%乙醇料液→超聲波160W，30min→離心→反復提取3次→合并收集濾液→濃縮→真空干燥。

2.2 黃酮類化合物的含量檢測

2.2.1 原理。黃酮類化學結構為2-苯基色原酮，分子中具有酚羥基， 可與Al3+在堿性溶液中顯色，在一定濃度范圍內，其濃度與吸光度符合比耳定律，可進行比色定量。

2.2.2 標準曲線的制作。精密吸取標準蘆丁對照品使用液(200μg/mL)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分別置于10mL比色管中，各加60%乙醇至5mL，加5%NaNO2溶液0.5mL，搖勻放置6min，再加10%A1(NO3)3溶液0.5mL，搖勻，再放置6min，加4%NaOH溶液4mL，搖勻放置10～20min。在510nm波長處，以第一管溶液作空白分別測定吸光度，以吸光度對濃度進行回歸，繪制標準曲線。

2.2.3 樣品的測定。精密吸取黃酮提取液1.0mL于10mL比色管中，按各加60%乙醇至5mL進行操作，加5% NaNO2溶液0.5mL，搖勻放置6min；再加10%Al(NO3)3溶液0.5mL，搖勻放置6min；加4%NaOH溶液4mL，搖勻放置10～20min。在510nm波長處，以第一管溶液作空白分別測定吸光度，以吸光度對濃度進行回歸，繪制標準曲線。

2.2.4 計算

式中：X為樣品中總黃酮的含量(以蘆丁計)，%；A為樣品提取液中黃酮的量，μg；m為樣品的質量，g。

3 結果與分析

3.1 食藥用真菌黃酮類化合物標準曲線的建立

圖1 黃酮類化合物的標準曲線

經紫外可見光分光光度計檢測，將所得的數據進行回歸處理，得到回歸方程Y=0.01085X+0.01437(R2=0.9978)。

3.2 高含黃酮類化合物食藥用真菌的篩選

表2 食藥用真菌中黃酮類化合物的含量

對采集的野生食藥用真菌12種、可栽培食用菌6種及其菌糠進行高含黃酮類化合物食藥用真菌的篩選，各品種中黃酮類化合物的含量見表2。

由表2中可以看出，各品種中黃酮類化合物含量最高的是樺褐孔菌，其含量達到8.98 mg/g，野生食藥用真菌和可栽培食用菌6種及其菌糠中均含有黃酮類化合物。

4 結論

對采集的野生食藥用真菌12種、可栽培食用菌6種及其菌糠進行高含黃酮類化合物食藥用真菌的篩選，各品種中黃酮類化合物含量最高的是樺褐孔菌，其含量達到8.98 mg/g，野生食藥用真菌和可栽培食用菌6種及其菌糠中均含有黃酮類化合物。樺褐孔菌中富含黃酮類化合物，對其精深加工具有較好的市場前景。

[1]劉火安,賈云，戴傳云,等.葛根總黃酮分離純化的研究[J].生物技術通訊,2005,6(5):522-524.

[2]毛杏飛, 羅佳波.白花蛇舌草中總黃酮提取分離工藝的研究[J].中藥材,2002,25(7):499-500.

[3]應國清.銀杏葉黃酮類化合物的分離純化[J].中國生化藥物雜志,2006,27(1):43-45.

[4]趙瑞艷,徐雅琴.樹毒葉片中黃酮類物質提取及抗氧化性研究[J].食品科學,2006,22(2):104-106.

[5]張妍.山碴果總黃酮的提取分離及體外抗腫瘤活性[J].中草藥,2004,35(7):787-789.

Determination of Xiaoxing’an of Mushroom Flavonoids Content

Wang Honggang，Guo Xing，Gao Zhitao，Fan Dongru

(Yichun Academy of Heilongjiang Province Forestry science, Yichun,Heilongjiang 153000)

In this study, in the lesser Xiaoxing’an mountains of common porous fungi, often cultivated edible fungi as tested materials, To detect the content of flavonoid compounds, To provide a theoretical basis for the application of flavonoid in the cosmetics, pharmaceutical, food industry; The experiment indicates that the, The flavonoids content in each breed is the highest of Inonotus obliquus, its content reached 8.98 mg/g, wild edible fungus and cultivation of edible fungi 6 and fungus bran contains flavonoids.

Mushroom;Flavonoids; Content

2015-09-07

黑龍江省森林工業總局基金項目(sgzjQ2012014)

王洪剛(1984-)，男，工程師，從事林業研究，E-mail:whg00119@163.com。

R927.2

A

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.06.005