胸腺肽α1改善惡性梗阻性黃疸患者免疫功能的臨床研究

駱旭航++曾輝

[摘要] 目的 探討惡性梗阻性黃疸對患者機體免疫功能的影響及胸腺肽α1改善免疫功能的作用。 方法 選擇50例惡性梗阻性黃疸患者隨機分為A1組和A2組各25例，另分別選擇同期良性梗阻性黃疸患者30例（B組）和體檢健康者30例（C組），對比各組外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞百分比及ALT水平，A2組術后給予胸腺肽α1連續治療7 d，對比A1和A2組術后以上指標值，并分析ALT與免疫功能的關系。 結果 A1組和A2組術前與B組、C組外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、NK細胞百分比及ALT水平有顯著性差異（P<0.05），A2組術后外周血CD3+、CD4+、CD4+CD25+Treg百分比及ALT水平變化顯著（P<0.05），術后3天A2組外周血CD3+、CD4+百分比均顯著高于A1組（P<0.05），ALT顯著低于A1組（P<0.05），術后7 d A2組CD4+CD25+Treg百分比均顯著低于A1組（P<0.05），ALT與CD3+、CD4+百分比均呈負相關（r=-0.483、-598，P均<0.05），ALT與CD4+CD25+Treg百分比呈正相關（r=0.519，P<0.05）。 結論 惡性梗阻性黃疸患者細胞免疫功能明顯降低，肝功能嚴重受損，術后給予免疫增強劑胸腺肽α1治療可明顯改善患者細胞免疫功能及肝功能。

[關鍵詞] 惡性梗阻性黃疸；T淋巴細胞亞群；調節性T淋巴細胞；免疫調節

[中圖分類號] R735 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2015）01-0028-04

Clinical research of thymopeptides α1 to improve the immune function of patients with malignant obstructive jaundice

LUO Xuhang1 ZENG Hui2

1.NO.2 Department of Surgery， Yiwu Central Hospital in Zhejiang Province， Yiwu 322000，China；2. Department of Infection，the Affiliated Beijing Ditan Hospital of Capital Medical University，Beijing 100015，China

[Abstract] Objective To investigate the impact in immune function of malignant obstructive jaundice and effect of thymopeptides α1 improve immune function. Methods A total of 50 cases of malignant obstructive jaundice patients were randomly divided into A1 and A2 group， each group had 25 cases ， selected same period another 30 cases of benign obstructive jaundice （group B）， and 30 cases of healthy subjects （group C）， compared each peripheral blood T lymphocyte subsets， NK cell percentage and ALT levels， A2 group were given continuous treatment with thymopeptides α1 in 7 d， comparing A1 and A2 group aforementioned index， and to analyze the relationship between ALT and immune function. Results The levels of peripheral blood CD3+， CD4+， CD8+， CD4+ CD25+ Treg， NK cell percentage and ALT in A1 and A2 group were significant difference with group B， group C（P<0.05）， postoperation ，the levels of periphery blood CD3+， CD4+， CD4+ CD25+ Treg percentages and ALT in A2 group changed significantly（P<0.05）， postoperation 3 days， peripheral blood CD3+， CD4+ percentages of A2 group were significantly higher than A1 group（P<0.05）， ALT were significantly lower than A1 group（P<0.05）， postoperation 7 days， the CD4+ CD25+ Treg percentages of A2 group were significantly lower than A1 group（P<0.05）， ALT and CD3+， CD4+ percentage were negatively correlated （r=-0.483， -598， P<0.05）， ALT and CD4+ CD25+ Treg percentage were positively correlated（r=0.519， P<0.05）. Conclusion Cellular immune function in patients with malignant obstructive jaundice decreased， liver function is severely impaired， postoperation give immunopotentiator thymopeptides α1 therapy could significantly improve cellular immune function and liver function.

[Key words] Malignant obstructive jaundice； T lymphocyte subsets； Regulatory T lymphocytes； Immune regulation

惡性梗阻性黃疸常見于消化系統惡性腫瘤侵犯或轉移壓迫膽管所致，除原發腫瘤造成患者身體機能損害外，膽道梗阻引起高膽紅素血癥、內毒素血癥，造成肝細胞被嚴重損害并影響患者生活質量和預后[1]。經皮經肝穿刺膽管外引流術治療是主要的減黃手段之一，但術后常出現復發，有研究認為惡性梗阻性黃疸對免疫功能造成的影響可能與術后復發和減黃預后差有關[2]。胸腺肽α1是一種免疫增強劑，廣泛用于治療各類原發或繼發性T細胞缺陷疾病，T細胞參與機體內對腫瘤細胞的細胞免疫。本研究對惡性梗阻性黃疸患者T細胞亞群及調節性T細胞進行觀察，并應用胸腺肽α1對惡性梗阻性黃疸減黃術后患者進行干預，觀察其改善患者免疫功能和保護肝細胞的作用，為臨床治療提供參考依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2012年1月～2013年10月我院住院治療的惡性梗阻性黃疸患者50例（A組），良性梗阻性黃疸患者30例（B組），同期體檢健康者30例（C組）作為研究對象。納入標準：惡性、良性梗阻性黃疸患者經影像學、病理檢查等確診良惡性，總膽紅素>17.1 μmol/L[3]；惡性梗阻性黃疸患者無遠處轉移，入院前未經抗腫瘤治療，均行經皮經肝穿刺膽管外引流術治療；三組年齡、性別組成匹配。排除標準：B、C兩組患者均無肝臟或膽囊手術史；三組6個月內未使用免疫調節劑；均無合并感染性疾病、免疫系統缺陷疾病。A組再隨機分為A1組和A2組各25例，A1組為常規術后治療，A2組給予胸腺肽免疫調節治療。A1組男16例，女9例，平均年齡（53.23±8.23）歲，膽管癌10例，肝癌8例，胰腺癌5例，膽囊癌2例，總膽紅素（310.43±76.49）μmol/L，A2組男14例，女11例，平均年齡（52.96±8.67）歲，膽管癌11例，肝癌9例，胰腺癌3例，膽囊癌2例，總膽紅素（306.19±75.03）μmol/L；B組男17例，女13例，平均年齡（53.12±9.34）歲，均為膽石癥，總膽紅素（210.84±89.67）μmol/L；C組男17例，女13例，平均年齡（51.92±8.59）歲，總膽紅素（8.26±2.54）μmol/L。A1組和A2組年齡、性別、疾病類型、總膽紅素比較，差異無統計學意義（P>0.05）。各組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2治療方法

A1和A2組術前30 min給予10 mg安定肌肉注射，常規消毒鋪巾，2%利多卡因局部麻醉，均在X線透視下定位在腋中線8～10肋間穿刺點，沿肋骨上緣進針穿刺右肝管，注入造影劑，通過數字減影血管造影觀察梗阻部位長度、膽管分布，常規插入并留置引流管固定于皮膚，術畢。A1和A2組術后給予常規抗感染、護肝及對癥治療，A2組在此基礎上于術后當天給予注射用胸腺肽α1（日達仙，美國賽生藥業生產，國藥準字H20050339，規格1.6 mg）1.6 mg/L使用隨盒1.0 ml注射用水溶解后皮下注射，1次/d，連續7 d。

1.3 觀察指標及方法

A1和A2組分別在術前、術后第1、3、7天抽取空腹外周靜脈血4 mL，采用免疫熒光標記技術和流式細胞儀技術檢測CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg 及NK細胞百分比，采用全自動生化檢測儀測定丙氨酸氨基轉移酶（ALT）。B組和C組分別在確診后和體檢當日以上述方法檢測CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、NK細胞百分比及ALT水平。

1.4統計學處理

采用SPSS17.0統計學軟件包進行數據分析，計量資料以（x±s）表示，兩組計量資料比較采用t檢驗，多組計量資料比較采用方差分析，其中兩兩比較采用q檢驗，兩變量相關性采用Pearson直線相關分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組T細胞亞群、NK細胞及ALT水平比較

A1組和A2組術前與B組、C組外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、NK細胞百分比及ALT水平比較，差異均有統計學意義（P<0.05），A1組和A2組外周血CD3+、CD4+、CD8+、NK細胞百分比均顯著低于B組和C組，CD4+CD25+Treg百分比及ALT水平均顯著高于B組和C組，但兩組外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、NK細胞百分比及ALT水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05），見表1。A1組術后外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、NK細胞百分比無明顯變化（P>0.05），ALT水平逐漸降低，差異有統計學意義（P<0.05），A2組術后外周血CD3+、CD4+、CD4+CD25+Treg百分比及ALT水平變化顯著（P<0.05），兩組CD3+、CD4+、CD4+CD25+Treg百分比及ALT水平有顯著差異（P<0.05）。術后3 d A2組外周血CD3+、CD4+百分比均顯著高于A1組（P<0.05），ALT顯著低于A1組（P<0.05），術后7 d A2組CD4+CD25+Treg百分比均顯著低于A1組（P<0.05），見表2。

2.2 ALT與免疫功能的關系

ALT與CD3+、CD4+百分比均呈負相關（r=-0.483、-598，P均<0.05），ALT與CD4+CD25+Treg百分比呈正相關（r=0.519，P<0.05），ALT與CD8+、NK細胞百分比無明顯直線相關性（r=-0.179、0.102，P>0.05）。

3討論

本研究結果顯示，惡性梗阻性黃疸患者與良性梗阻性黃疸、正常人群相比存在嚴重的免疫功能下降，CD3+、CD4+、CD8+T細胞亞群均明顯降低，表明惡性梗阻性黃疸患者T細胞增殖整體減弱，活性降低。以往研究認為惡性腫瘤患者存在細胞免疫功能降低，體液免疫不變或代償性增加的現象，惡性梗阻性黃疸導致腸道內分泌型免疫球蛋白入腸道受阻，腸道內免疫屏障破壞，細菌移位、內毒素增加并進入血液循環導致敗血癥、內毒素血癥[4，5]。CD4+與CD8+的平衡反映細胞免疫和體液免疫的功能狀態，本研究結果顯示，惡性梗阻性黃疸患者CD4+與CD8+存在顯著失衡，與以往研究結果一致[6，7]。

NK細胞減少可能受到T細胞增殖減弱，大量炎癥細胞因子抑制作用有關，降低NK細胞對腫瘤細胞的吞噬和殺傷能力，進一步降低機體免疫功能[8]。CD4+CD25+Treg是一種調節性T細胞，活化后主要發揮免疫抑制調節，提高機體對免疫原的耐受，在腫瘤細胞、病毒等逃避免疫殺傷中起重要作用[9]，本研究結果中，惡性梗阻性黃疸患者CD4+CD25+Treg顯著增加，尤其高于正常人群，可見患者機體內存在明顯的免疫抑制，與腫瘤細胞的增殖、生長、侵襲，腸內細菌繁殖，內毒素增加密切相關[10]。內毒素也可刺激巨噬細胞分泌抑制細胞免疫的細胞因子，并產生可激活細胞毒性T細胞的細胞因子，細胞毒性T細胞對肝細胞的攻擊可導致肝細胞的凋亡，從而使肝功能嚴重受損；梗阻導致膽紅素、膽汁酸等物質無法排出進入血液引起高膽紅素血癥和高膽汁酸血癥，會加劇肝功能損害[11，12]。本研究結果顯示，惡性梗阻性黃疸患者ALT明顯升高，表明患者有大量肝細胞損傷，肝功能受損，對患者預后產生不良影響。

單純的解除梗阻減黃，對惡性梗阻性黃疸患者的免疫功能有一定改善，提高細胞免疫活性，主要與改善內環境，減少內毒素、膽紅素及膽汁酸等毒性作用和對免疫系統的抑制作用有關[13]。術后患者由于惡性腫瘤的抑制作用和體質虛弱免疫功能仍然低下，極易發生感染性并發癥，甚至發生膿毒癥或多器官功能不全的，嚴重威脅患者生命的不良預后，并可能增加術后復發的風險[14]。

胸腺肽α1可誘導T細胞增殖、分化各階段，促進T細胞成熟，增強活性，調節免疫平衡狀態，有增強免疫功能的作用。本研究對A2組患者術后當日開始皮下注射給藥，連續治療7 d，結果顯示，A1、A2組術后CD3+、CD4+、CD8+百分比均有所提高，CD4+CD25+Treg百分比有所降低，但A1組變化并不顯著，兩組NK細胞均無顯著性變化，表明減黃術后患者機體免疫功能有所改善，與以往研究結果相似[15]，但改善并不明顯。A2組術后1天CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg百分比變化更為明顯，仍與A1無明顯差異，術后3 d，A2組CD3+、CD4+百分比升至顯著高于A1組，CD4+CD25+Treg百分比則在術后7 d降至顯著低于A1組，雖然CD8+百分比升高并不明顯，但仍表明A2組患者T細胞增殖和活性明顯增強，尤其是CD4+介導的細胞免疫功能得到顯著提高，免疫抑制作用減弱，胸腺肽α1在術后應用有效增強了機體細胞免疫功能。減黃術后血液循環膽紅素、膽汁酸等減少，免疫功能增強有助于進一步改善內環境，腸源性內毒素減少，有利于肝細胞功能逐漸恢復[16]，結果顯示，A2組術后3 d ALT水平已顯著低于A1組，表明肝功能受損恢復效果更好，有利于改善患者生活質量和預后。進一步分析結果顯示，ALT與CD3+、CD4+百分比均呈負相關，而與CD4+CD25+Treg百分比呈正相關，表明肝細胞結構和功能的完整性與細胞免疫功能有關，促進惡性梗阻性黃疸患者細胞免疫功能的提高有益于肝功能保護，減輕患者機體負擔，改善預后。

綜上所述，惡性梗阻性黃疸患者免疫功能低下，減黃術后應重視對免疫功能的干預，適當應用免疫增強劑有助于改善臨床療效。

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（收稿日期：2014-07-14）