FibroTest與肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)評價慢性乙型肝炎纖維化的研究

申曉敏，王春妍，程曉靜

（天津市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津 300192）

論著

FibroTest與肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)評價慢性乙型肝炎纖維化的研究

申曉敏，王春妍，程曉靜

（天津市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，天津 300192）

目的：探討采用FibroTest（FT）與肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)（肝纖4項(xiàng)）兩種檢測方法判斷慢性乙型肝炎肝纖維化程度的意義。方法：留取90例慢性乙型肝炎患者血清，受試者均于同期進(jìn)行肝穿刺活檢，依據(jù)活檢分期進(jìn)行分組，分別檢測α2巨球蛋白、結(jié)合珠蛋白、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、總膽紅素和載脂蛋白AⅠ5個指標(biāo)，根據(jù)性別及年齡計算FT值，同時檢測血清肝纖4項(xiàng)（透明質(zhì)酸、層粘蛋白、Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原），評價FT值和肝纖4項(xiàng)在慢性乙型肝炎肝纖維化程度判斷中的價值。結(jié)果：肝臟病理纖維化分期為S0期5例（5.55%）、S1期49例（54.44%）、S2期24例(26.67%)、S3期7例（7.78%）、S4期5例（5.56%）。90例患者S 0、S 1、S 2、S 3、S 4期的各個檢測值兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0．001。各檢測值與肝臟病理分期呈正相關(guān)（P＜0.01）。結(jié)論：FibroTest聯(lián)合肝纖4項(xiàng)在慢性乙型肝炎肝纖維化程度判斷中有一定價值。

肝硬化；乙型肝炎病毒；FibroTest；肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)

肝纖維化是肝病發(fā)展的重要階段，慢性肝病診療過程中常常根據(jù)肝臟纖維化程度的分期來選擇不同的治療方案。肝纖維化的程度也被臨床上用于評價治療療效。通過肝穿刺吸取肝活組織進(jìn)行病理學(xué)檢測是纖維化分期的金標(biāo)準(zhǔn)。但是作為一種有創(chuàng)的檢查，患者接受程度較差，不能多次進(jìn)行，并且根據(jù)吸取組織部位的不同，病理醫(yī)生的個人專業(yè)素質(zhì)差異容易造成檢測結(jié)果的偏差[1]，以上的原因使得有創(chuàng)活檢不能常規(guī)開展，因此，臨床實(shí)踐中迫切要求開展無創(chuàng)性檢查判斷肝纖維化程度。血清肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)（肝纖4項(xiàng)）包括透明質(zhì)酸（hyaluronan，HA）、層粘蛋白 （laminin，LN）、Ⅲ型前膠原（procollagenⅢ，PⅢ）、Ⅳ型膠原（typeⅣcollagen，Ⅳ－C）的檢測常常被用來判斷患者肝纖維化的程度，評價診療的療效，被多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是較為可靠的檢測指標(biāo)。FibroTest，簡稱FT，是基于血清學(xué)的檢測數(shù)據(jù)判斷肝臟纖維化的模型，國外研究數(shù)據(jù)主要來自于慢性丙型肝炎群體，對于乙型肝炎、肝硬化、肝癌群體的研究較少，而國內(nèi)乙型肝炎患者群體龐大，研究的意義很大。因此本文選取了90例已經(jīng)確診慢性乙型肝炎的患者，檢測肝纖4項(xiàng)和FT值，探討兩種不同的檢測手段判斷肝臟纖維化的可行性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2011年8月-2013年8月在天津市第二人民醫(yī)院住院，符合《慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）》診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]的確診病例90例。男55例，女35例；年齡18～67歲，平均年齡（36.75± 12.24）歲。所有患者除乙型肝炎病毒外其他嗜肝病毒均未檢出，同時血清HBsAg和HBV DNA 6個月以上持續(xù)表達(dá)陽性。血清采集均在肝組織活檢當(dāng)天或前一天完成。

1.2 試劑及方法

1.2.1 FT值計算 肝活組織檢查當(dāng)天或前一天采集不抗凝血液5 mL，4 000 r/min，5 min分離血清檢測。采用德國西門子公司生產(chǎn)BNP生化分析儀檢測載脂蛋白A1（apoAⅠ）、α2－巨球蛋白（α2－MG）、結(jié)合珠蛋白（HP）的值，試劑盒為德國西門子公司原裝進(jìn)口。TBil和GGT為本院生化常規(guī)檢測結(jié)果，所用儀器為日立7180生化分析儀。同時收集病人年齡、性別數(shù)據(jù)，計算公式：FT值＝4．467×log（α2－MG）－1．357×log（HP）＋1．017×log（GGT）＋0．0281×（年齡）＋1．737×log（TBil）－1．184×（apoA I）＋0．301×（性別，男＝1、女＝0）－5．540。

1.2.2 肝纖4項(xiàng) 肝活組織檢查當(dāng)天或前一天留取的不抗凝血液5 mL，4 000 r/min，5 min分離血清，采用放射免疫法檢測HA、LN、PⅢ、Ⅳ-C表達(dá)水平。

1.2.3 肝臟活組織病理檢查 活檢組織要求取6個以上匯管區(qū)，切片長度大于等于1.5 cm，標(biāo)本經(jīng)過固定、包埋，進(jìn)行蘇木精、伊紅、網(wǎng)狀纖維和Masson纖維染色。按照Scheuer分期將90例病例分為S0、S1、S2、S3和S4組。由本院兩名有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師盲法讀片進(jìn)行診斷，直到最終病理診斷的結(jié)果相同為止。病理HE染色見圖1。

圖1 肝臟活組織HE染色病理圖 (×200)Fig 1 HE staining of liver biopsy pathological picture(×200)

1.3 統(tǒng)計方法 數(shù)據(jù)采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件分析。計量資料以±s表示。多組間采用ANOVA單向方差分析。各個檢測值與肝臟病理分期相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝臟病理結(jié)果 90例患者肝纖維化分期：S0期5例（5.55%）、S1期49例（54.44%）、S2期24例（26．67%）、S3期7例（7.78%）、S4期5例（5.56%），見表1。

表1 90例慢性乙型肝炎患者肝臟病理結(jié)果（n）Tab 1 The liver pathology of 90 patients with chronic hepatitis B（n）

2.2 FT及HA、LN、PⅢ、Ⅳ-C的測定結(jié)果 見表2。

表2 各組FT及HA、LN、PⅢ、Ⅳ-C的測定結(jié)果（±s，ng/mL）Tab 2 Determination of FT and HA,LN,P III,IV-C（±s，ng/mL）

表2 各組FT及HA、LN、PⅢ、Ⅳ-C的測定結(jié)果（±s，ng/mL）Tab 2 Determination of FT and HA,LN,P III,IV-C（±s，ng/mL）

S 0、S 1、S 2、S 3、S 4期的各個檢測值兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0．001

組別例數(shù) FT HA LN PⅢ Ⅳ-C S0 05 -0.67±0.99 062.2±9.68 088±7.59 076.40±18.55 072.40±6.35 S1 49 -0.32±1.09 067.68±15.77 103.90±13.52 084.80±26.64 074.00±17.22 S2 24 00.74±1.46 098.54±35.57 112.88±12.77 099.83±44.96 098.54±31.58 S3 07 00.76±1.22 234.29±108.00 167.86±45.11 139.00±63.52 171.57±84.45 S4 05 01.15±1.06 330.4±159.75 172.80±77.49 187.00±18.22 209.20±33.16 F 5.058 44.675 19.953 32.861 12.323

從表2可以得出各檢測值隨著肝臟纖維化程度增高有升高的趨勢，但是各檢測值對于不同分期的評價效果不同，各檢測值對于區(qū)分S0和S1期效果均不明顯，對于區(qū)別無或輕度肝纖維化價值略低。

2.3 FT及HA、LN、PⅢ、Ⅳ-C的測定結(jié)果與肝臟病理分期的相關(guān)性 各個檢測值與肝臟病理分期呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。FT（r＝0．430，P＜0．001），HA（r＝0．676，P＜0．001），LN（r＝0．484，P＜0．001），PⅢ（r＝0321，P＜0．05），Ⅳ－C（r＝0．649，P＜0．001）。

3 討論

肝纖維化是機(jī)體對慢性肝損傷的修復(fù)反應(yīng)，肝纖維化的發(fā)生和轉(zhuǎn)歸是多種因素共同作用的結(jié)果。由致病因子刺激引起慢性肝損害，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失調(diào)和細(xì)胞外間質(zhì)代謝異常，肝內(nèi)彌漫性細(xì)胞外基質(zhì)過度沉淀，最終導(dǎo)致肝纖維化乃至肝硬化，患者預(yù)后與纖維化的程度密切相關(guān)。實(shí)際診療中纖維化程度也是醫(yī)生判斷治療方案的重要依據(jù)。早期識別肝纖維化，能夠?yàn)樵缙诓扇∏‘?dāng)有效干預(yù)措施提供參考。準(zhǔn)確的提供病人肝纖維化程度能夠優(yōu)化治療方案，使患者的肝纖維化過程延緩，延長生存期，提高生活質(zhì)量[3]。肝組織病理活檢能夠直觀觀察到肝組織的病理改變，因而成為肝纖維化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。無創(chuàng)的血清學(xué)檢測能夠較好地反映肝纖維化程度，能夠替代有創(chuàng)診斷，更易被病人接受。

肝纖4項(xiàng)（HA、LN、PⅢ、Ⅳ－C）屬于針對細(xì)胞外基質(zhì)的相關(guān)檢測指標(biāo)，是目前較為成熟的檢測指標(biāo)。有學(xué)者研究了肝纖4項(xiàng)在不同肝病患者表達(dá)水平[4-5]，但是大多采用臨床診斷分組，包括健康組、肝炎、肝硬化、肝癌組。本研究采用診斷金標(biāo)準(zhǔn)病理分期，更能真實(shí)地反應(yīng)患者肝纖維化程度，因此研究結(jié)果更具有說服力。本研究發(fā)現(xiàn)肝纖4項(xiàng)的值與肝纖維化病理分期具有良好的相關(guān)性。FT模型是由法國Imbcrt-Bismut研究小組建立于2001年，采用a2M、HAP、GGT、BIL和Apo AI 5項(xiàng)聯(lián)合檢測，再通過年齡和性別進(jìn)行調(diào)整，可得FT數(shù)值，該值可預(yù)示肝纖維化的程度和發(fā)展過程，明顯提高診斷的準(zhǔn)確性。Myers等[6]認(rèn)為，F(xiàn)T能準(zhǔn)確預(yù)測慢性乙型肝炎患者肝組織纖維化程度，準(zhǔn)確率可達(dá)到92%，46%的患者通過FT值檢測免于進(jìn)行肝活組織檢查。Munteanu[7]和Poynard等[8]研究表明慢性丙型肝炎患者檢測FT值能夠較好地反映肝臟纖維化的程度，同時也可用于其他肝病患者。但是在不同肝纖維化分期FT值的診斷準(zhǔn)確率不同。程曉靜等[9-10]將S2～S4期設(shè)定為顯著纖維化組，S3～S4期為嚴(yán)重肝纖維化組并得出結(jié)論，F(xiàn)T值診斷顯著肝纖維化組的準(zhǔn)確率更高。可能的原因一是樣本量少產(chǎn)生的偏倚，二是HBV DNA高水平復(fù)制及肝臟炎癥的影響。

FT值檢測和肝纖4項(xiàng)檢測都是無創(chuàng)性檢測，易于多次檢測，并且能夠被病人接受，兩種檢測手段聯(lián)合起來能夠彌補(bǔ)單一檢測項(xiàng)目的不足，提高肝纖維化的檢出率、準(zhǔn)確率和減少漏檢，能夠更好地為臨床診療提供可靠的依據(jù)。

[1]郭爭捷，常建東，王衛(wèi)民，等.聲觸診組織量化技術(shù)診斷肝纖維化[J]．中國介入影像與治療學(xué)，2012，9(10)：718

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[3]葉小萍，冉海．聲觸診組織量化技術(shù)無創(chuàng)評估肝纖維化的研究進(jìn)展[J]．中國介入影像與治療學(xué)，2012，9(4)：311

[4]許為民.TBA以及肝纖四項(xiàng)在肝病中的檢測意義[J]．齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2011，32（4）：554

[5]賈曉娟，許澤清，南永剛,等．肝纖四項(xiàng)在乙肝攜帶的肝癌患者血清中的表達(dá)情況[J]．中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（9）：41

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[7] Munteanu M．Noninvasive biomarkers FibroTest actitest for replacing invasive liver biopsy：the need for change and action［J］．J Gastrointestin Liver Dis，2007，16(2)：173

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（2015－04－24收稿）

Diagnostic value of FibroTest combined with four serum liver fibrosis biomarkers for liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B

SHEN Xiao-min，WANG Chun-yan，CHENG Xiao-jing
（Department of Clinical Laboratories,The Second People’s Hospital of Tianjin,Tianjin 300192,China）

Objective：To investigate the diagnostic value of FibroTest combined with 4 serum liver fibrosis biomarkers for liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B (CHB)．Methods：Serum samples were collected from 90 CHB patients who underwent liver biopsy. Serum samples were tested forfive indicators including α2-macroglobulin(α2M)，haptoglobin(HAP)，γ-glutamyl peptidase(GGT)，total bilirubin(BIL)and apolipoprotein AⅠ (Apo AⅠ)and then the FT values as well as the age and sex of patients were calculated．Four serum liver fibrosis biomarkers included hyaluronan，laminin，procollagenⅢ，typeⅣcollagen were tested.The diagnostic values of FibroTest and four serum liver fibrosis biomarkers for liver fibrosis in CHB patients were evaluated.Results：There were 5 cases（5.55%）in the S 0 stage(the pathological stage of liver fibrosis)，49 cases（54.44%）in the S 1stage，24 cases(26.67%)in the S 2 stage，7 cases（7.78%）in the S 3 stage and 5 cases（5.56%）in the S 4 stage．The values were significantly different between any two of the five stages（S 0-S 4）（all P＜0.001）．A positive correlation was found between the values and liverpathological stage(P＜0.01)．Conclusion：The combination of FibroTest and fourserum liverfibrosis biomarkers can evaluate liverfibrosis in CHB patients.

liver cirrhosis;hepatitis B virus;FibroTest；four serum liver fibrosis biomarkers

R512.6+2

A

1006－8147（2015）06-0507-03

申曉敏（1979-），女，主管檢驗(yàn)技師，碩士，研究方向：生化檢驗(yàn)；E-mail：shenxiaomin420@163.com。