豬干擾素基因的克隆與原核表達載體的構建

牛偉濤

（邢臺學院化學工程與生物技術學院，河北邢臺 054001）

豬干擾素基因的克隆與原核表達載體的構建

牛偉濤

（邢臺學院化學工程與生物技術學院，河北邢臺 054001）

干擾素(Interferon)是一種廣譜抗病毒劑，具有抗腫瘤、抗病毒和免疫調節等多種作用而被廣泛應用于病毒性疾病的預防和治療。本實驗以豬肝臟組織為材料，提取豬肝臟組織DNA，根據GenBank收錄的豬干擾素基因序列設計特異性引物，以豬肝臟DNA為模板進行高保真擴增得到IFN基因的ORF片段，然后進行了T載體克隆。再利用引入EcoRⅠ、SalⅠ酶切位點的特異性引物對IFN成熟肽段的基因進行亞克隆，經雙酶切、連接、轉化后，成功構建了pET28a-ifn原核表達重組質粒，為干擾素基因的原核表達奠定了基礎。

豬干擾素基因；基因克??；表達載體構建

干擾素是一種細胞因子，具備免疫調節、抗病毒和抗腫瘤等作用，它是科學家在1957年研究流感病毒干擾現象時發現的[1]。干擾素是一類分泌型糖蛋白，它主要通過與細胞表面受體相互作用從而使細胞、組織或器官產生一種或幾種抗病毒的蛋白，這樣便可以增強免疫應答[2]。干擾素主要由激活的胸腺細胞和自然殺傷細胞產生，病毒入侵時，干擾素在短時間內就能讓機體處于抗病毒形態，并使機體在1～3周時間內抵制病毒反復感染[3]。生物體中廣泛存在干擾素，人、豬、羊等哺乳動物都產生干擾素。我國豬場眾多，大小豬病毒性傳染病隨季節變化危害較大，種類繁多，給很多養殖戶造成巨大損失，干擾素就成為醫藥、獸藥市場最具發展前景的一類生物制劑[4]?！?br>