人乳頭瘤病毒檢測與宮頸癌預防新進展

林思屹 里進

人乳頭瘤病毒檢測與宮頸癌預防新進展

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目的人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）已經被證實是宮頸癌、生殖道和部分口咽部腫瘤的致病因素，其中宮頸癌是女性常見腫瘤，在發展中國家宮頸癌的發病率和死亡率在女性所有腫瘤中均居第2位，僅次于乳腺癌。目前為止，研究已發現HPV病毒有150～200種型別。很多研究都已表明人乳頭瘤狀病毒感染尤其是高危型HPV是宮頸癌及癌前病變的主要因素，所以病因學在防治宮頸癌的過程中就顯得尤其重要。現文就HPV的致病機制、相關疾病的流行病學特征、最新檢測手段及其預防措施做一闡述。

人乳頭瘤病毒；傳染病預防；分子診斷：疫苗

宮頸癌是世界上眾多癌癥中較少有明確病因的惡性腫瘤，自從1974年德國病毒學家哈拉爾德·楚爾·豪森提出人乳頭瘤狀病毒（HPV）感染與宮頸癌發生存在密切關系以來[1]，病因學在防治宮頸癌的過程中就顯得尤其重要[2]，本文就HPV的致病機制、相關疾病的流行病學特征、最新檢測手段及其預防措施做詳細闡述。

1 HPV的致病機制

性接觸傳播是HPV的主要傳播方式，也有少數通過消化道或母嬰傳播。HPV具有高度的宿主特異性，主要感染人體特異部位皮膚、黏膜的復層鱗狀上皮。HPV通過微小的創口侵入生殖道基底細胞后，在基底細胞內復制，隨基底細胞的分化成熟逐漸向表層移動。HPV的復制過程依賴于角質細胞的分化，角化的上皮細胞很快脫落，不能有效激活免疫系統，因此目前還不能成功體外培養HPV[3]。

從分子機制上來看，高危型HPV 導致癌變的主要分子在于E6、E7基因編碼的蛋白，E6蛋白能特異性結合p53蛋白形成復合物，促使p53蛋白快速降解，從而導致細胞周期失控；E7蛋白和pRb有親和性，使G1期進入S期所需基因得以轉錄，細胞周期失控進而發生細胞永生化。因此，HPV高危型的感染誘發細胞惡性增殖，即發生癌變[4]。

2 HPV與相關疾病的流行病學特征

HPV在年輕成年女性中的流行率為40%～80%，并且女性一生中感染HPV概率為80%～90%。據調查，我國人群HPV感染率約為15%，HPV感染率隨年齡變化呈雙峰狀態，城市和農村感染率第一個高峰都出現在17～24歲，城市第二個感染率高峰在40～44歲，而農村感染率在45～49歲達第二次高峰[5]。

HPV相關的疾病有很多，最常見的除了宮頸上皮內瘤變（CIN）及宮頸癌外，還有泌尿生殖系統疣、尋常疣、扁平疣等良性疾病，以及口咽癌，外陰、陰莖等部位的癌癥，具體參見表1。據2012年世界衛生組織（WHO）公布的數據顯示，估計每年宮頸癌新發病例約53萬人，占所有癌癥死亡女性的7.5%，中國是宮頸癌高發地區，每年新發病例約6.2萬，死亡病例約3萬[6]。

3 HPV檢測方法的進展

鑒于HPV檢測對于診斷宮頸癌及癌前病變的重要意義，HPV檢測方法也在不斷改進之中，探索快速、靈敏地對盡可能多的基因型進行高通量分型的方法是近年來國內外的研究熱點。分子檢測技術的發展使HPV檢測進入了新的時代，使用PCR技術進行HPV-DNA的檢測使得標本來源不受限制，且能進行HPV分型并確診。這些檢測方法包括：PCR+膜雜交法（HybriMax）、實時熒光PCR法、基因芯片法、流式熒光雜交法（Luminex XMAP）、表面等離子體諧振技術（Surface Plasmon Resonance，SPR）和電離飛行時間質譜法（MALDI-TOF-MS）。其中，流式熒光雜交法、表面等離子體諧振技術和電離飛行時間質譜法為近幾年用于HPV的新興檢測技術。Luminex公司的XMAP液相芯片技術核心原理類似流式細胞技術，通過熒光編碼微球技術和共價交聯技術將擴增產物-微球-探針-熒光素雜交成復合物，經Luminex流式儀對微球逐顆分析，可獲得每種微球的編碼及其對應熒光信號的種類和強弱。Luminex XMAP液相芯片具有反應時間短、高通量、無需洗滌等優點，受到了國內外臨床實驗室的廣泛歡迎。表面等離子體諧振（SPR）技術是基于在某些金屬（特別是金、銀）界面上，光能夠激發產生界面等離子波這一原理而研制的應用技術[7]。近幾年來，SPR技術己漸漸從實驗室走向臨床應用。SPR技術采用PCR與SPR芯片核酸雜交相結合的方法檢測HPV，并用生物傳感技術檢測雜交結果，提高了檢測的特異性和靈敏性，重復性好，但成本較高（需要金薄膜），僅適合大樣本量檢測[8]。電離飛行時間質譜（MALDI-TOF-MS）技術檢測臨床HPV樣本具有較好的靈敏性和特異性，但目前主要在研究階段，還未進入臨床應用[9]。

表1 HPV常見的臨床疾病與HPV亞型

4 宮頸癌的預防

宮頸癌病因較明確，其篩查方法較完善，盡管各國對于HPV疫苗注射的指南有所不同，但都基本相似：始終強烈推薦患者在其醫生的指導下選擇性注射疫苗，效果最理想的是青年女性在第一次性生活之前注射疫苗，理論上來說，男性也應該注射HPV疫苗，從而減少HPV的傳播[10]。

此外，要廣泛開展預防子宮頸癌相關知識的宣教，增加公眾對宮頸癌的認知，如多個性伴侶、吸煙、性生活過早（＜16歲）、性傳播疾病、HPV感染等相關因素是宮頸癌發病誘因[11]。通過普及、規范子宮頸癌篩查進行二級預防，但并不是篩查頻率越高越好，要小心仔細權衡篩查的預防作用與潛在的風險，爭取效用最大化的同時盡量降低風險。由美國婦產科醫師學會（ACOG）制定并發表在《Obstetrics & Gynecology》2016年月刊上的最新宮頸癌篩查指南并不建議女性每年進行一次宮頸癌篩查，推薦了如下篩查方案[12]：不論女性第一次性生活的年齡如何，不推薦21歲以下的女性篩查宮頸癌，除非是HIV攜帶者；21～29歲女性推薦每3年進行一次細胞學篩查；30～65歲女性推薦每5年做一次細胞學與HPV聯合篩查，也可繼續選擇21～29歲的篩查方案；年齡超過65歲的女性若既往篩查結果均為陰性，可以停止篩查。由于各地區宮頸癌流行特征不同，臨床醫生可以根據具體情況不同而作出具體調整。

綜上所述，對我國特定地區人群HPV感染情況及HPV型別分布調查，有利于該地區宮頸癌防治工作的開展，并且可探索HPV感染率與年齡等危險因素的關系、HPV型別與宮頸癌病理類型的特異性，為宮頸癌預防提供指導性意見。

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[12]Sawaya GF，Smith-Mccune K． Cervical Cancer Screening[J]．Obstetrics & Gynecology，2016，127（3）：459-467．

Advances in Human Papillomavirus (HPV) Detection and Cervical Cancer Prevention

LIN Siyi1LI Jin21 Clinical Laboratory, The Third People's Hospital of Mianyang, Mianyang Sichuan 621000, China, 2 Clinical Laboratory, Zhongnan Hospital of Wuhan University, Wuhan Hubei 430071, China

HPV has been shown to be anogenital cancers, especially cervical cancer, and some pathogenic factors of oropharyngeal tumours. Cervical cancer is the most common cancer in women in developing countries. The incidence and mortality of women in all tumors were ranked second, second only to breast cancer. It has been found that the HPV type has 150 to 200 kinds. From then on, many studies have found that HPV infection, especially high-oncogenic risk HPV infection, is the major cause of cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia. Thus, etiology plays a signifcant role in the prevention and treatment of cervical cancer. In the following, the mechanism of HPV infection, epidemiology of HPV-related diseases, the latest HPV testing methods and prevention measures will be presented.

HPV, Epidemic prevention, Molecular diagnosis, Vaccine

R737．33

A

1674-9308（2016）35-0043-03

10．3969/j．issn．1674-9308．2016．35．022

武漢大學自主科研基金（青年項目），2042014kf0143

1 綿陽市第三人民醫院檢驗科，四川 綿陽 621000；2 武漢大學中南醫院檢驗科，湖北 武漢 430071

里進，E-mail：wb001030@whu．edu．cn