nup88、Ataxin-3和PTEN在結直腸癌中表達關系的研究

張建波

(平山縣人民醫院外2科，河北 平山 050400)

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nup88、Ataxin-3和PTEN在結直腸癌中表達關系的研究

張建波

(平山縣人民醫院外2科，河北 平山 050400)

摘要：目的檢測核孔蛋白復合體蛋白88(nup88)、脊髓小腦共濟失調癥相關蛋白3(Ataxin-3)和第10號染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源等位基因(PTEN)在結直腸癌中的表達特點，探討三者的表達關系。方法選擇2011年1~12月平山縣人民醫院外2科103例結直腸癌術后患者作為觀察組，選擇68例正常結腸黏膜作為對照組，采用免疫組織化學檢測兩組nup88、Ataxin-3和PTEN的表達，分析其相關性。結果觀察組中nup88表達的陽性率顯著高于對照組[71.8%(74/103)比20.6%(14/68)]，觀察組中Ataxin-3和PTEN表達的陽性率顯著低于對照組[35.0%(36/103)比82.4%(56/68)，19.4%(20/103)比73.5%(50/68)]，差異有統計學意義(P<0.05)。觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達在不同Dukes分期、有無淋巴結轉移、是否有癌結節及脈管浸潤間陽性率差異有統計學意義(P<0.05)；線性相關分析顯示，觀察組中nup88、Ataxin-3與PTEN的表達無相關性(P>0.05)。結論結直腸癌中nup88、Ataxin-3和PTEN異常表達，但是三者不具有協同作用，3種蛋白可能是通過各自的通路發揮促腫瘤進展的作用。

關鍵詞：結直腸癌；核孔蛋白復合體蛋白88；脊髓小腦共濟失調癥相關蛋白3；第10號染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源等位基因

結直腸癌臨床常見，病變進展中多種蛋白出現變化。核孔蛋白復合體蛋白88(nuclear pore complex protein 88，nup88)作為核孔蛋白的重要成員，可加速腫瘤細胞增殖，并參與物質的轉運，其對多種腫瘤有明顯的促進作用，也對調節腫瘤的轉移有重要影響[1]。脊髓小腦共濟失調癥相關蛋白3(spinal cord cerebellar ataxia syndrome related proteins-3,Ataxin-3)是一種多聚谷氨酰胺蛋白，是泛素-蛋白酶體途徑中重要的去泛素化酶，在全身多種組織中表達。Ataxin-3的功能主要與細胞骨架形成、調控轉錄和細胞生長周期的調節有關[2]。第10號染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物基因(phosphatase and tension homologue deletedon chromosome tem,PTEN)是抑癌基因，通過抑制細胞增殖和抑制腫瘤血管生成而發揮作用[3]。本實驗應用免疫組織化學技術，檢測結直腸癌中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達，探討三者的表達特點及表達關系。

1資料與方法

1.1一般資料收集2011年1~12月平山縣人民醫院外2科行結直腸癌根治手術的患者作為觀察組，均經病理學確診。共103例，其中男53例，女 50例，年齡54～78歲，平均(65±4)歲。其中結腸癌70例，直腸癌33例，高分化癌45例，中分化癌30例，低分化癌28例; Dukes分期A+B期63例，C+D期40例。另外選擇68例結直腸癌根治手術患者作為對照組，距離腫瘤邊緣>10 cm切端經病理證實為正常結腸黏膜組織，其中男34例，女34例，年齡55～75歲，平均(66±4)歲。兩組性別、年齡等一般臨床資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2nup88、Ataxin-3和PTEN蛋白檢測將切除的組織制成厚度為4 μm的石蠟包埋切片，切片于50～60 ℃烘箱內烤片30～40 min 后待測，nup88(檢測試劑盒購自上海酶聯生物科技有限公司，批號：101017)、Ataxin-3(檢測試劑盒購自上海金標生物科技有限公司，批號：1011562)和PTEN(檢測試劑盒購自上海美軒生物科技有限公司，批號：100772)均購自北京中杉金橋公司，蛋白的檢測采用免疫組織化學法，應用二步法進行檢測，均在病理科完成，由經驗豐富的病理主管技師完成，嚴格質量控制。

1.3結果的判定標準nup88、Ataxin-3和PTEN以在細胞質中出現棕黃色顆粒為陽性反應細胞，選擇有代表性的染色集中的腫瘤細胞密集區進行判斷(400倍)，計數10個視野，計算陽性細胞百分率，以陽性細胞≥25%為陽性，<25%為陰性[2-3]。

2結果

2.1兩組 nup88、Ataxin-3和PTEN表達陽性率的比較觀察組中nup88表達的陽性率顯著高于對照組，Ataxin-3和PTEN表達的陽性率顯著低于對照組(P<0.01)，見表1。

2.2觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN陽性表達的病理特征觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達陽性率在不同腫瘤Dukes分期、有無淋巴結轉移、是否有癌結節及脈管浸潤間差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)，見表2。

表1　nup88、Ataxin-3和PTEN在觀察組與對照組中表達陽性率的比較　[例(%)]

nup88：復合體蛋白88；Ataxin-3:脊髓小腦共濟失調癥相關蛋白3；PTEN：張力蛋白同源等位基因；觀察組：取癌組織組；對照組：取正常結腸黏膜組織組

表2　觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN表達的陽性率在不同臨床特征中的比較　[例(%)]

nup88:復合體蛋白88；Ataxin-3:脊髓小腦共濟失調癥相關蛋白3；PTEN：張力蛋白同源等位基因；觀察組：取癌組織組

2.3觀察組中nup88、Ataxin-3與PTEN表達的相關性經線性相關性分析顯示，觀察組中nup88、Ataxin-3與PTEN的表達無明顯相關(r=-0.231，P=0.372；r=0.043，P=0.417)。

3討論

泛素-蛋白酶體途徑是細胞內重要的蛋白質調控方式，其主要構成成分包括泛素及啟動酶和蛋白酶體系統，其在發揮作用時最重要的功能是降解需要精確調控的短半衰期蛋白和發生折疊異常的內質網，并通過啟動酶系統活化泛素，進行有效的調控。Ataxin-3作為體內重要的去泛素化酶，其異常表達時使對泛素-蛋白酶體途徑的平衡調節失調。Ataxin-3在體內高表達，其低表達對惡性腫瘤的發生和進展也有一定作用[4]。PTEN是第一個具有磷酸酯酶活性的腫瘤抑制基因[5]，其編碼產物具有磷酸酶活性，能使細胞內第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸去磷酸化，負性調節磷脂肌醇3-激酶途徑，使細胞凋亡和(或)抑制細胞周期進程，并誘導其停止在G1期，從而抑制細胞增殖[6]。Nup88是核孔復合物的一種，通過細胞核雙膜形成水溶性通道，連接細胞核和細胞質并進行有效的物質交換，以保證細胞周期和細胞生長的進行[7-8]。相關研究顯示，nup88在多種惡性腫瘤中高表達，并對腫瘤進展起重要作用[9-10]。

本研究采用免疫組織化學技術檢測結直腸癌中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達，結果顯示，觀察組中nup88表達的陽性率顯著高于對照組，觀察組中Ataxin-3和PTEN表達的陽性率顯著低于對照組，提示3種蛋白異常表達是腫瘤發生的重要因素。觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達陽性率在不同Dukes分期、有關淋巴結轉移、是否有癌結節及脈管浸潤間差異有統計學意義(P<0.05或P<0.01)，提示3種蛋白參與腫瘤的進展。nup88、Ataxin-3和PTEN異常表達時通過調解細胞因子、生長因子和連接蛋白，進而對生長因子的生物利用度進行有效調控，誘導細胞遷移，使腫瘤細胞具有侵襲性。由于Dukes分期、淋巴結轉移、是否有癌結節及脈管浸潤均為結直腸癌患者判斷預后和生物學行為的重要指標，因此聯合檢測nup88、Ataxin-3和PTEN的表達可能與預后相關。是否有癌結節及脈管浸潤均反映腫瘤的侵襲性生長能力，因此3種蛋白異常表達是腫瘤浸潤性生長及播散的可能性標志物。線性相關分析顯示，觀察組中nup88、Ataxin-3和PTEN的表達無相關性，提示三者不具有相關性。因此3種蛋白對結直腸癌發生、發展過程中的作用，可能是通過各自的通路發揮作用的。

綜上所述，結直腸癌中nup88、Ataxin-3和PTEN異常表達，但是三者不具有協同作用，3種蛋白可能是通過各自的通路發揮促腫瘤進展的作用。

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The Research of Nup88,Ataxin-3 and PTEN Expression Relations in Colorectal CancerZHANGJian-bo.(SurgeryDepartmentTwo,PingshanCountyPeople′sHospital,Pingshan050400,China)

Abstract：ObjectiveTo detect the expression characteristics of nuclear pore complex protein 88 (nup88), spinal cord ceredellar ataxia syndrome related proteins 3 (Ataxin-3) and phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten (PTEN) in colorectal cancer,focusing on the expression relationships between them.MethodsA total of 103 postoperative patients with colorectal cancer were chosen in Pingshan county in Surgery Department Two of Pingshan County People′s Hospital from Jan.to Dec.2011 as observation group,and another 68 cases of normal colonic mucosa were included as control group，and nup88,Ataxin-3 and PTEN expression of the two groups were detected using immunohistochemical method,and the correlation was analyzed.Resultsnup88 expression in observation group was significantly higher than that in control group[71.8%(74/103) vs 20.6%(14/68)],Ataxin-3 and PTEN expression rate in observation group were significantly lower than those in the control group[35.0%(36/103) vs 82.4%(56/68)，19.4%(20/103) vs 73.5%(50/68)],the difference were statistically significant(P<0.05).The expression of nup88,Ataxin-3 and PTEN in observation group and Dukes staging,lymph node metastasis,whether to have carcinoma nodules and vascular invasion were closely related;linear correlation analysis showed nup88,Ataxin-3 in the observation group and the expression of PTEN had no relevance(P>0.05).ConclusionThe expression of nup88,Ataxin-3 and PTEN in colorectal cancer is abnormal,but no synergy of them is observed,so the three kinds of proteins may play the role of promoting tumor progression through their respective pathways.

Key words:Colorectal cancer; Nuclear pore complex protein 88; Spinal cord cerebellar ataxia syndrome related proteins-3; Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten

收稿日期：2014-10-08修回日期：2014-11-30編輯：相丹峰

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.14.070

中圖分類號：R735

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)14-2674-03