止咳清咽緩釋顆粒提取工藝研究

王娜 劉曉龍

止咳清咽緩釋顆粒提取工藝研究

王娜 劉曉龍

目的優選止咳清咽緩釋顆粒最佳提取工藝。方法以木犀草素的提取率為評價指標,以提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度為考察因素, 采用響應面法優選提取工藝。結果最佳提取工藝條件為提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。結論所優選工藝合理﹑可行, 可用于止咳清咽緩釋顆粒的提取。

止咳清咽緩釋顆粒；響應面法；提取工藝；木犀草素

止咳清咽緩釋顆粒系是本院國醫堂在《醫學心語》中 “止咳散”的基礎上［1-5］, 根據中醫辨證施治原則, 加入羌活﹑獨活﹑柴胡﹑前胡﹑茯苓﹑枳殼﹑川芎﹑黨參等, 用于治療外感風寒癥, 具有散寒祛風除濕﹑益氣解表﹑止咳之功效。為了提高產品質量, 穩定制備工藝, 需要對提取工藝進行合理優化［6］, 根據方中藥味所含有效成分及其藥性, 實驗以桔梗中木犀草素的提取率為指標, 采用響應面法優選止咳清咽緩釋顆粒的提取工藝, 為后續的劑型開發和工業化生產提供實驗依據。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 試藥 止咳清咽緩釋顆粒的處方藥材(其中桔梗中木犀草素含量為240 μg/g)﹑木犀草素對照品。

1.2 儀器 色譜純試劑Waters液相色譜儀﹑超聲波提取器﹑萬分之一電子天平。

1.2 試驗方法

1.2.1 木犀草素標準曲線 課題研究中, 木犀草素對照品為5.6 mg/ml, 標準線性方程為A=7884.1C-5140.3, R=0.9996,線性范圍為11.20～67.20 μg/ml。

1.2.2 色譜條件 色譜柱：AlltimaC18(4.6 mm×250 mm, 5 μm)；流動相：乙腈-0.5%磷酸(35：65)；柱溫340 nm；流速1.0 ml/min；檢測波長340 nm。

1.2.3 提取方法 以處方量的藥材提取, 選擇提取時間﹑液料比﹑乙醇濃度作為考察因素, 按照表2安排試驗。以生產中的設備為基礎, 提取2次。考察因素的參數范圍見表1。

表1 考察因素的參數范圍

1.2.4 供試品制備 取提取液20 ml置容量瓶中, 加入甲醇,精密定容至50 ml。高速離心(4000 r/min)30 min, 取上清液5 ml, 甲醇定容至10 ml, 作為供試品, 冷藏﹑備用。

1.2.5 提取率 將1.2.4項中供試品中木犀草素的含量, 與藥材中木犀草素的總含量比較, 進而計算木犀草素的提取率。

C：供試品中木犀草素濃度；V：提取液的體積；M：藥材中木犀草素的含量。

2 結果與分析

2.1 響應面優化結果與分析 采用響應面D-optimal設計方

法, 根據3個因素的參數范圍進行試驗設計, 設計方案及結果。見表2, 圖1。

表2 止咳清咽緩釋顆粒提取率

圖1 止咳清咽緩釋顆粒提取率3D圖

利用Design-Expert8軟件對數據進行多元回歸, 得到響應回歸方程為：

式中, 方程系數可知影響因素為X2＞X1＞X3, 且均為正相關, 其中X1和X2與X3均存在較強的交互作用, 呈正相關性,而且交互作用的影響度要大于單個因素。R2表明模型對提取率的實際值與預測值有很好的擬合度, 可以對提取工藝參數進行較好的分析和預測。利用軟件分析所得最優工藝參數為：提取時間為1.1 h, 液料比為8, 乙醇濃度為89%。

2.2 最優工藝驗證 依據求解所得工藝參數, 進行3次平行試驗驗證, 計算RSD值。見表3。

表3 3次平行試驗提取率(%)

結果表明, 響應面分析法優化得到的工藝參數可信度高,具有較強重現性。

3 小結

響應面法在提取工藝中, 能較好的預測試驗結果, 較正交試驗優點更加突出, 試驗次數少﹑周期短, 能在整個區域上查找明確工藝參數, 求得高精度的表達式等［7-12］。通過試驗所得工藝參數較之前正交試驗, 有效成分提取率提高, 在工藝條件上更加精確, 具有很強的實用價值。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.22.216

2015-07-20］

河南省中醫管理局立項課題(項目編號：2013ZY02084)

450000 鄭州大學附屬鄭州中心醫院