艾瑞德免疫分析儀C反應蛋白檢測項目的性能評價

姜 華，吳軍錄，姚懿雯，戴 燕，萬海英

(同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科,上海 200065)

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·論 著·

艾瑞德免疫分析儀C反應蛋白檢測項目的性能評價

姜 華，吳軍錄，姚懿雯，戴 燕，萬海英

(同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科,上海 200065)

目的 對檢測C反應蛋白的艾瑞德干式免疫分析儀進行性能驗證，確保其結果的準確、可靠。方法 參考美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)推薦的EP5-A2文件進行精密度驗證，參考EP15-A2文件進行正確度的驗證，參考EP6-A2文件進行線性范圍的驗證，參考CLSI C28-A2文件進行參考區(qū)間的驗證，參考常規(guī)檢測方法進行攜帶污染率的驗證。結果 全血高、低濃度批內精密度分別為3.29%、3.68%，總精密度分別為4.91%、5.26%；參考區(qū)間為0～10 mg/L；線性回歸方程Y=1.070 2X+0.448 4，r=0.979；線性范圍為2.5～160.0 mg/L；攜帶污染率小于1%。結論 艾瑞德免疫分析儀具有良好的精密度、準確度，較寬的線性范圍、較快的檢測速度等優(yōu)點，適用于臨床檢測。

C反應蛋白； 性能驗證； 應用

C反應蛋白(CRP)是一種經典的急性時相蛋白，1930年由Tiettl 及Trannis首先在急性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)，此后其在臨床中的應用越來越廣泛。目前，普遍認為CRP有助于區(qū)分機體感染和非感染的急慢性炎癥，鑒別細菌和病毒感染、監(jiān)控創(chuàng)傷、術后感染、器官移植、抗菌藥物療效、區(qū)別不同臨床狀態(tài)等[1]。本研究為了解艾瑞德免疫分析儀的性能，從總精密度、批內精密度、正確度、參考區(qū)間、線性范圍、攜帶污染率等幾個方面進行驗證來評價其在臨床應用方面的可靠性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 采用艾瑞德免疫分析儀及配套試劑。比對前做好儀器維護及校準，檢測期間做好室內質控。

1.2 標本來源 所有標本均來自2012年3月至2014年5月上海市同濟醫(yī)院的門、急診和住院患者。標本均用乙二胺四乙胺二鉀(EDTA-K2)真空抗凝管采集。

1.3 實驗方法

1.3.2 正確度參考CLSI EP15-A2[3]文件評價方案使用上海市臨床檢驗中心的調查品驗證：選擇5種水平的調查品，分別上機檢測2次，收集測定結果計算均值。均值落在相應的靶值范圍內為可接受。

1.3.3 線性范圍參考CLSI EP6-A2[4]文件選取一份高值(H)和一份低值(L)患者標本(廠家標定線性參數(shù)為2.5～160.0 mg/L)。標本分別按L、9L+1H、8L+2H、7L+3H、6L+4H、5L+5H、4L+6H、3L+7H、2L+8H、L+9H、H的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定3次，計算均值。將實測值與理論值作比較，計算Y=bX+a，驗證線性范圍。結果判斷：斜率b值在1±0.05范圍內，相關系數(shù)r≥0.975即線性符合要求。

1.3.4 參考區(qū)間參考CLSI C28-A2[5]文件搜集男女各20例體檢健康人標本，上機檢測每份標本測定2次取均值，若90%的檢測值在廠家所提供的參考區(qū)間內(0～10 mg/L)，則認為參考區(qū)間為可接受。

1.3.5 攜帶污染率采用常規(guī)檢測方法進行攜帶污染率實驗驗證。收集低值樣本(L)和高值樣本(H)，二者的濃度盡可能相差10倍。將低值樣本(L)和高值樣本(H)按下列順序上機測定：L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6、H4、H5、H6、L7、L8、L9、H7、H8、H9、L10。攜帶污染率(K)小于1%，結果為可接受。計算公式：

2 結 果

2.1 批內、總密度 檢測均值為30、100 mg/L中、高兩種水平的患者血清，根據(jù)CLSI EP5-A2評價方案的統(tǒng)計方法進行分析，如表1所示，批內精密度、總精密度2個評價指標與廠家提供的性能要求比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，該精密度可接受。

表1 2個不同濃度水平患者血清批內、批間精密度(%)

2.2 正確度 檢測5種水平的調查品，其結果均在相應的靶值范圍內，該儀器的正確度可接受。見表2。

表2 5種水平的調查品檢測結果(mg/L)

表3 高值(H)和低值(L)患者標本進行比例 稀釋檢測結果(mg/L)

圖1 標本理論值與檢測值的回歸方程

2.3 線性范圍 選取一份高值和低值患者標本進行比例稀釋檢測，結果見表3。統(tǒng)計結果顯示r=0.979，b=1.070 2，回歸方程Y=1.070 2X+0.448 4(Y為測定值,X為理論值)，斜率b值在1±0.05范圍內，相關系數(shù)r>0.975，在2.5～160 mg/L范圍內呈良好的線性關系。見圖1。

2.4 參考區(qū)間 CRP在健康人群中為左偏態(tài)分布,因此統(tǒng)計方法采用百分位數(shù)，用40例健康人標本數(shù)據(jù)驗證結果的中位數(shù)為4.8 mg/L，其最小值至最大值范圍為2.5～8.6 mg/L，所選標本的檢測值100%落在0～10 mg/L參考區(qū)間范圍內。

2.5 攜帶污染率 將低值標本(L)和高值標本(H)按下列順序L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6、H4、H5、H6、L7、L8、L9、H7、H8、H9、L10上機檢測，計算出、攜帶污染率為K=0.88%，滿足K<1%的要求。

3 討 論

CRP對于疾病的診斷雖無特異性，但其濃度上升是炎癥和組織損傷的靈敏指標[6-7]。CRP快速定量檢測能夠給臨床醫(yī)生及時提供定量結果,特別為是否使用抗菌藥物提供了依據(jù)[8]。艾瑞德干式免疫分析儀能夠在5 min內獲得CRP定量結果,可以滿足臨床早期診斷和及時判斷療效的需要。

從試驗結果來看，艾瑞德干式免疫分析儀具有良好精密度，批內精密度低值CV為3.68%，高值CV為3.29%；總精密度低值CV為5.26%，高值CV為4.91%，均滿足實驗要求；試劑盒的線性范圍是2.5～160.0 mg/L，測試結果在此范圍內呈良好的線形關系，相關系數(shù)(r)>0.975，截距較小，標本在本實驗的高、低范圍內線形理想。正確度參照上海市臨床檢驗中心室間質評質控品進行的比對實驗顯示，正確度符合臨床要求；參考區(qū)間驗證符合廠家說明；攜帶污染率小于1%。而且，該機器操作簡單，模式多樣化，適合多種類標本的測定。

綜上所述，艾瑞德干式免疫分析儀主要分析性能驗證結果符合質量目標，能夠滿足臨床的質量要求。對檢測系統(tǒng)的性能進行有效的評估，有助于提高檢測結果的準確性和可靠性。

[1]阮晶華，王燕，宋克征．血清中CRP濃度測定的臨床價值[J]．中國醫(yī)學檢驗雜志，2004，5(1)：62-64．

[2]NCCLS.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods[S].Wayne,PA，USA:NCCLS，2004.

[3]NCCLS.User demonstration of performance for prevision and accuracy[S] .Wayne,PA，USA:NCCLS,2004.

[4]NCCLS.Evaluation of the linearity of quantitative measurement proceduers[S].Wayne,PA，USA:NCCLS,2003.

[5]Clinical Laboratory Standards Institute.How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory[S].Wayne,PA，USA:NCCLS,2000.

[6]Charurnks N，Laoha jinda B，Ruji S，et al， Reference value for C-reactive protein and its distribution pattern in Thai adults[J].Cire J，2005，69(3):339-344.

[7]Young B，Gleeson M，Gripps AW.C-reactive protein:a critical review[J].Pathology，1991，23(3):118-124.

[8]柴舟，張佑貴.C反應蛋白在兒科感染性疾病診斷中的應用[J].咸寧學院學報：醫(yī)學版，2008，22(3):249.

Evaluate performance of i-READER immunity analyzer in C reactive protein detection

JIANGHua,WUJun-lu,YAOYi-wen,DAIYan,WANHai-ying

(DepartmentofClinicalLaboratory,TongjiHospitalofTongjiUniversity,Shanghai200065,China)

Objective To evaluate the performance of i-READER immunity analyzer in C reactive protein(CRP) detection.Methods The precision,accuracy,linearity and reference interval of CRP were validated according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) documents EP5-A2,EPl5-A2,EP6-A2 and C28-A2 respetively.Conventional detection method was used to measure carry pollution rate.Results The within-run precisions of high level and low level samples of CRP were 3.29% and 3.68% respectively.And the total precisions were 4.91% and 5.26% respectively.The reference interval of CRP was between 0 and 10 mg/L.Equation of linear regression wasY=1.070 2X+0.448 4 (r=0.979) and linearity range was from 2.5 to 160.0 mg/L.The carry pollution was less than 1%.Conclusion The i-reader immunity analyzer might be suitable for clinical testing with good precision,accuracy,wide linear range and faster detection speed.

C-reactive protein； performance evaluation; application

姜華，女，本科，初級檢驗師，主要從事凝血相關研究工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.04.013

A

1672-9455(2015)04-0466-02

2014-07-17

2014-09-22)