邁克全自動化學發光儀測定促甲狀腺激素的性能驗證

王 萍,魏紅璐

(重慶市第五人民醫院檢驗科 400062)

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·論 著·

邁克全自動化學發光儀測定促甲狀腺激素的性能驗證

王 萍,魏紅璐△

(重慶市第五人民醫院檢驗科 400062)

目的 通過對邁克IS1200全自動化學發光測定儀進行性能驗證及評價，探討邁克IS1200全自動化學發光測定儀臨床應用的可行性。方法 參考ISO15189:2007《醫學實驗室質量和能力認可準則》的國際標準和相關文獻，同時結合實際工作，對IS1200的穩定性、精密度、正確度、線性相關性、攜帶污染率、儀器間的比對等分析性能進行驗證及評價。結果 邁克IS1200儀器性能穩定，穩定性試驗4 h后的相對偏倚為3.43%，8 h后的相對偏倚為5.04%，批內不精密度小于5%，總不精密度小于10%，攜帶污染率小于2 ppm，線性相關系數為0.999 92。結論 邁克IS1200儀器穩定性較好，線性良好，攜帶污染率低，良好的精密度和正確度，可應用于臨床。

全自動化學發光測定儀； 精密度； 攜帶污染率； 正確度

隨著中國經濟的持續高增長、醫療保健意識及醫療技術水平的提升，醫療器械市場持續穩定的高速增長，原本由國外醫療器械壟斷高端醫療器械市場的格局正伴隨著國家新一輪的醫改政策及國內醫療器械生產商的崛起而逐漸被改變。以新醫改政策為導向，本著支持國產儀器的宗旨，本科室于2013年11月采購了一臺邁克公司自主研發的IS1200全自動化學發光測定儀。作者通過學習并應用ISO15189:2007《醫學實驗室質量和能力認可準則》的國際標準作為科室質量管理的標準，通過促甲狀腺激素(TSH)項目對科室引進的邁克IS1200全自動化學發光測定儀進行全面的性能驗證及評價，以幫助大家了解國產化學發光儀的性能水平，在選擇儀器時根據醫療單位自身狀況選擇合適的儀器。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 四川邁克生物科技股份有限公司生產的IS1200全自動化學發光測定儀。TSH檢測試劑、校準品、質控品均為邁克生產。

1.2 測定樣品 儀器評價期間采用邁克生產的化學發光質控品兩種水平。精密度測試采用臨床新鮮混合血清。正確度實驗采用衛生部2013年內分泌學室間質評標本。

1.3 方法

1.3.1 儀器穩定性 待儀器開機穩定后，用配套的TSH校準品對項目進行校準，測試TSH正常值質控物，重復測試3次，計算平均值，過4、8 h后再上機重復測試3次，計算平均值,以第1次的測定結果作為基準值，按下方公式計算相對偏倚(a，%)，測試結果的相對偏倚應不超過±10%。

1.3.2 精密度測試 按照美國臨床和實驗室標準化委員會EP15[1]文件要求對IS1200進行精密度評價。主要評價批內不精密度和總不精密度。臨床新鮮混合血清，具有不同臨床意義兩種水平。低值標本濃度要求為正常參考范圍內，高值標本濃度為正常參考范圍高限的1.5～3.0倍。同一條件下，每天重復檢測兩種水平的標本各3次，持續5d。

1.3.2.1 批內精密度 批內不精密度標準差(Sr)計算公式：

Sr=批內不精密度標準差，D=測試時間內所有檢測次數(5d)，n=每天重復的總次數(3次)，Xdi=第d天重復第i次的結果，Xd=第d天所有結果的平均值。評價實驗結果計算出的批內不精密度標準差小于廠家說明書的不精密度標準差，驗證合格。

1.3.2.2 總精密度 總不精密度標準差(Sl)計算公式：

如果所有樣本實驗室中位數在驗證區間以內，說明待測系統測定結果與標識物定值保持一致，待測系統正確度被證實。否則，待測系統測定結果與標識物定值不一致，待測系統正確度未被證實。

1.3.4 線性相關性 使用濃度比不小于2個數量級的線性上限標本和線性下限標本,用線性下限標本將線性上限標本按比例稀釋成至少五個不同濃度的標本，混合均勻后將各個濃度的標本分別重復測定3次。記錄各標本的測量結果，并計算各標本3次測量值的平均值(yi)。以稀釋濃度(xi)為自變量，以測定結果均值(yi)為因變量求出線性回歸方程。按下方公式計算線性回歸的相關系數(r)，應滿足r≥0.99。

1.3.5 攜帶污染率 準備TSH濃度不低于2 000μU/mL的標本(A),使用TSH試劑，以TSH標本A和蒸餾水作為標本，按照TSH標本A、TSH標本A、TSH標本A、蒸餾水、蒸餾水、蒸餾水的順序為一組，在分析儀上進行測定，共進行5組測定；每一組的測定中，第4個標本的測定值為A4，第6個標本的測定值為A6；按照下方公式計算每組的攜帶污染率；5組攜帶污染率中的最大值應符合TSH測試攜帶污染率應小于或等于10ppm的規定。

式中：A4=每組中第4個標本的測定值；A6=每組中第6個標本的測定值

A原=TSH標本3次測定結果平均值：(A1+A2+A3)/3

注：若因試劑盒線性范圍限制而使得系統無法準確檢測TSH高于2 000μU/mL的標本，可采用稀釋推算法，在測完3組蒸餾水后，再測量3組稀釋50倍后的A標本，以經推算后的平均值作為TSH標本A濃度值。

2 結 果

2.1 儀器穩定性 初測3次的平均值為0.496，4h后測試3次的平均值為0.513，8h后測試3次的平均值為0.521。4h后的相對偏倚為3.43%，8h后的相對偏倚為5.04%，均低于偏倚(±10%)要求，可以接受。

2.2 精密度測試 低值濃度1批內不精密度2.39%，總不精密度4.96%；高值濃度2批內不精密度3.78%，總不精密度5.42%。批內不精密度小于YY/T1155-2009標準的要求(≤8%)，總不精密度小于廠家聲明要求(≤15%)，可以接受。

2.3 正確度分析 測定2013年室間質評標本第3個(水平1)和第4個(水平2)濃度結果見表1。由表1可以看出，水平1標本標識值6.01和水平2標本標識值38.1均在各自的驗證區間以內，即待測系統測定結果與標識物定值保持一致，待測系統準確性被證實。

表1 2013年室間質評第3個和第4個標本結果

2.4 線性相關性結果r=0.999 92，滿足標準要求，可接受。見表2。

表2 線性相關性結果

2.5 攜帶污染率結果 測定50倍稀釋的高濃度標本,3次測定結果分別為：Rep1=39.979，Rep2=42.089，Rep3=44.157，經推算后的高濃度值平均值為2 103.75。計算5輪攜帶污染率分別為：0.333、1.521、0.523、0.951、0.143 ppm，滿足YY/T 1155-2009要求小于或等于10 ppm，可接受。

3 討 論

由《醫療機構臨床實驗室管理方法》和《ISO15189：2007醫學實驗室質量和能力認可準則》的要求，為保證檢驗質量，對新的檢驗儀器及方法在正式使用前，都需進行系統性能評價[2-3]。本實驗室選擇通過項目TSH的測定，對邁克IS1200全自動化學發光測定儀性能進行評估。

由于對國產儀器及試劑的信心不足，因此本實驗室對TSH進行了穩定性的評價，分別檢測及時，4、8 h穩定性。隨著時間的延長，相對偏倚逐漸增大，最大在5.04%，尚能滿足對偏倚的要求。因此在此儀器上進行標本檢測時，試劑盒開瓶上機后，如果標本量大，導致標本檢測等候時間長，在8 h內檢測對結果無影響。精密度的評價是對儀器其他項目評價的基礎，與尹志軍等[4]在Roche Cobas e411上檢測TSH相比，批內及總精密度均要大，特別是總精密度為Roche Cobas e411的2倍多。與陳芳芳等[5]在Beckman DXI 800全自動化學發光儀上檢測TSH相比，批內精密度差不多，總精密度IS1200要稍高一點。與趙靜峰等[6]在Beckman ACCESS2 上檢測TSH相比，批內精密度差不多，但總精密度要小。IS1200在精密度上與國際常用品牌相比沒有優勢，但表現也不是太差，處于中等水平。本科室精密度驗證結果小于廠家聲明的要求，可以接受。本次驗證未分別驗證出儀器、試劑、標本的穩定性，由于此儀器就是配套使用本儀器廠家試劑，因此在驗證其穩定性上，驗證其總穩定性才能了解此儀器狀況，將其分別驗證意義并不大，在實際工作中，標本放置4 h以上進行檢測是時有發生的事情，也不可能將標本進行冷凍保存以減少標本本身偏差。如果能夠驗證出常溫放置或者2～8 ℃冷藏保存條件下標本隨時間延長的自身偏差，對于日常工作正確處理未及時檢驗的標本是十分有益的，但本次驗證因為最初實驗設計的不足，未能驗證。正確度驗證上，由于本儀器未參加衛生部室間質評，因此采用EP15文件上對正確度的驗證方法對此儀器正確度進行驗證，從廠家獲取此臺儀器在參加室間質評的總體數據進行驗證，驗證結果正確度可接受。線性相關性，與廠家提供線性較一致，可接受。由于在驗證線性時，需要對標本進行稀釋處理，這與操作人員的手法有極大關系，且與稀釋液有關，一般使用廠家要求的稀釋液，但隨著稀釋程度的增加，會存在一定的基質效應。因此本次實驗采用低值標本與高值標本按比例進行稀釋，減少基質效應。在攜帶污染率上，由于此儀器使用一次性吸頭，每份標本使用獨立吸頭，因此不存在標本的攜帶污染，所以驗證的就主要是試劑間污染，驗證結果滿足廠家聲明要求。

綜上所述，邁克生產IS1200在穩定性、精密度、正確性、線性、攜帶污染率上均能滿足廠家聲明要求。由于國內儀器及試劑研發水平較國際整體偏低，與國際成熟品牌相比在性能質量上并沒有太大的優勢，但國產儀器及試劑成本較低，特別在新一輪醫改政策及物價政策下，各醫院會適當合理的使用國產儀器及試劑，所以對國產儀器及試劑的質量控制就尤為重要。在使用國產儀器及試劑時，要更好地控制環境條件，保存好試劑，對儀器進行更嚴格的維護與驗證，堅持室內質控，參加室間質評，牢牢把握儀器的質量性能狀況。

[1]NCCLS.EP15-A User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy [S].Wayne,PA，USA:2001:1-15.

[2]中華人民共和國衛生部.醫療機構臨床實驗室管理辦法[S].2006-02-27.

[3]International Organization For Standardization,SO 15189-2007.Medical laboratories-Particular requirements for quality and competence[S],2007.

[4]尹志軍，隋洪，黃雪珍．電化學發光免疫分析儀檢測TSH的性能驗證[J]．國際檢驗醫學雜志，2011，32(21)：2521-2523．

[5]陳芳芳，李家亮，王國洪．BECKMAN DxI 800全自動化學發光儀甲狀腺檢測項目的性能驗證[J]．東南國防醫藥，2013，15(6)：585-587．

[6]趙靜峰，羅天敏，王攀．全自動微粒子化學發光免疫分析法與放射免疫分析法測定血清促甲狀腺激素的對比分析[J]．實用心腦肺血管病雜志，2013，21(9)：96-97．

Performance evaluation of Maker automated chemiluminescence analyzer in thyroid hormone detection

WANGPing,WEIHong-lu△

(DepartmentofClinicalLaboratory,theFifthPeople′sHospitalofChongqing,400062,China)

Objective To explore the feasibility of clinical applications of Maker IS1200 automated chemiluminescent analyzer based on the performance verification and evaluation.Methods According to the standard of ISO15189:2007 established by Chinese Pharmaceutical Industry,related literature,and combined with practical work,the stability,precision,accuracy,linearity correlation,carryover contamination rate and comparison between different instrument of IS1200 were conducted.Results The relative bias was 3.43% after 4 h stability test and 5.04% after 8.In the same batch,the imprecision was less than 5%,the total imprecision was less than 10%,and carryover contamination rate was less than 2 ppm,the linear correlation coefficient was 0.999 92.Conclusion The Maker IS1200 could be applied in clinica due to the stabile performance,good linearity,low carryover contamination rate,good precision and accuracy.

automated chemiluminescence analyzer; precision; carryover; accuracy

王萍，女，大專，主管檢驗師，主要從事醫學檢驗技術研究。△

，E-mail:37690327@qq.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.04.016

A

1672-9455(2015)04-0473-03

2014-06-24

2014-09-20)